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金荞麦提取物对肠易激综合征大鼠肥大细胞,PAR-2,SP的影响
目的:观察金荞麦提取物(Fag)对肠易激综合征(IBS)模型大鼠内脏高敏感的作用以及对肥大细胞(MC),蛋白酶激活受体-2(PAR-2),P物质(SP)的影响.方法:将清洁级新生雄性乳大鼠采用新生期母婴分离、乙酸灌肠、鸡卵清白蛋白腹腔注射的复合造模方法制备IBS内脏高敏感模型,大鼠随机分为正常组(生理盐水),模型组(生理盐水),Fag低、中、高剂量组(0.14,0.42,1.26 g·kg-1),酮替芬组(0.18 mg·kg-1),每组10只,连续灌胃14 d.采用腹壁撤退反应(AWR)评估大鼠内脏敏感性,免疫组化法(immunohistochemistry)检测大鼠结肠MC数量、脱颗粒程度,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PAR-2蛋白表达,免疫组化、酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠结肠SP水平.结果:与正常组比较,模型组20,40,60 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)压力下AWR评分明显升高,结肠MC数量,脱颗粒程度,PAR-2,SP表达明显上升(P＜0.05);与模型组比较,Fag中剂量组(20,40,60 mmHg压力下),Fag高剂量组(20,40 mmHg压力下)的AWR评分,远端结肠MC数量,脱颗粒程度,PAR-2,SP表达明显下降(P＜0.05);与酮替芬组比较,Fag高剂量组AWR评分(40 mmHg压力下),SP水平降低(P＜0.05).结论:Fag能降低IBS模型大鼠内脏敏感性,其机制与抑制MC数量及活化脱颗粒程度,下调PAR-2受体,降低SP有关,并且镇痛作用优于酮替芬.
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金荞麦提取物对IBS大鼠脊髓镇痛的干预机制
目的:观察金荞麦(Fagopyrum cymosum,Fag)提取物对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)样结肠刺激(colon irritation,CI)模型内脏高敏感性的改善作用以及对动物脊髓背角内5-HT及其受体的影响.方法:采用结肠刺激新生期乳大鼠来制作IBS样CI模型.CI大鼠成年后给予口服Fag 2 wk,并用腹壁撤退反射(AWR)评分来评价给药后CI大鼠内脏高敏感性的变化,取大鼠脊髓用免疫组织化学法观察5-HT免疫染色,用蛋白印迹法检测5-HTIA受体(5-HT1AR)、5-HT3A受体(5-HT3AR)表达.结果:和对照组比,CI组大鼠AWR评分明显增高(20 mmHg:0.625±0.518 vs 1.333±0.778;30 mmHg:0.750±0.463 vs 1.667±0.888;40 mmHg:1.125±0.641 vs 2.000±0.739;50 mmHg:1.500±0.926 vs 2.583±0.793;60 mmHg:2.125±0.991 vs 3.083±0.669;均P＜0.05)；且脊髓内5-HT染色度增加(11.250±4.833 vs 21.125±7.827,P＜0.01),5-HT3A受体表达升高(179.038±29.786,P＜0.01),5-HT1A受体则表达降低(64.523±16.873,P＜0.01)；高剂量Fag可降低CI大鼠AWR评分(20 mmHg:0.250±0.002; 30 mmHg:0.875±0.044;40 mmHg:1.250±0.036; 50 mmHg:1.875±0.050; 60 mmHg:2.625±0.037;均P＜0.05),并下调脊髓内5-HT(13.375±5.579,P＜0.05)和5-HT3AR的表达(114.200±20.983,P＜0.05),上调5-HT1AR的表达(93.008±13.523,P＜0.05)；低剂量Fag则对CI大鼠的影响不明显.结论:Fag对IBS样CI大鼠有镇痛作用,并通过调节其脊髓内5-HT及其受体来改善痛觉过敏.
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金荞麦提取物的抗癌研究
金养麦为蓼科植物,其提取物对体外培养的人个旧肺腺癌细胞、宫颈鳞癌细胞、胃腺癌细胞及鼻咽癌细胞均具有杀伤作用;在体内对小鼠移植性肉瘤、Lewis,~癌、宫颈癌有抑制作用.同时金荞麦能够抑制端粒酶、MMPs等的活性.使癌细胞凋亡.就金养麦提取物对相应癌细胞的杀伤和押制作用做如下综述.
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金荞麦提取物抑制腹泻型肠易激综合征大鼠的肠运动功能
目的 探讨金荞麦提取物(Fag)对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠的肠运动功能的影响.方法 用新生期乳大鼠母源性分离(NMS)联合醋酸(AA)灌肠法制作D-IBS模型；造模成功后,成年IBS大鼠给予Fag 6 g/kg和Fag 24 g/kg灌胃2周；用双歧三联活菌胶囊(Bifico)作为阳性对照药物,以生理盐水灌胃作为正常对照.用腹壁撤退反射(AWR)评分评估结肠敏感性变化,用Bristol大便性状评分评估大鼠粪便稀便级并计算其粪便颗粒数的变化.结果 D-IBS模型大鼠在20、40及60 mm Hg压力下AWR、Bristol评分及粪便颗粒数均增加(P＜0.05或P＜0.01),24 g/kg的Fag干预后与Bifico同样能明显降低模型大鼠的AWR评分和改善排便异常(P＜0.05或P＜0.01).结论 Fag可改善D-IBS大鼠肠功能亢进引发的痛觉过敏和腹泻.
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应用苏木素法测定非单体中药提取物对细胞增殖的影响
目的 建立测定非单体中药提取物对贴壁细胞增殖影响的方法.方法 分别用苏木素染色法、MTT比色法及CCK-8比色法测定HUVEC细胞44 h的增殖活性,并用苏木素法、MTT比色法和CCK-8比色法检测金荞麦提取物对M21细胞增殖的影响,葡萄籽原花青素(GSP)对HUVEC细胞增殖的影响,并对不同方法进行比对.结果 苏木素法检测HUVEC细胞44 h的增殖结果与CCK-8和MTT比色法结果具有一致性.在测定非单体中药提取物对贴壁细胞增殖影响方面,苏木素法与CCK-8以及MTT比色法相比具有更好的重复性和准确性.结论 苏木素染色法测定非单体中药提取物对贴壁细胞增殖的影响具有稳定、简便和经济等优点.
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金荞麦提取物药理作用的研究进展
通过金荞麦有效部位的研究,发现金荞麦提取物具有抗癌细胞侵袭和转移的作用,能增强巨噬细胞的吞噬功能,提高机体的免疫机能;通过体内外的感染实验提示金荞麦提取物具有对小白鼠体内感染的保护作用.另外药理实验证明金荞麦提取物具有降血脂和血糖、镇咳祛痰及抗突变的作用,对血小板聚集的抑制作用的研究也取得了很大进展.
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金荞麦提取物干预后COPD大鼠模型血清指标及肺组织纤维化指标的检测
目的:研究金荞麦提取物对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型血清指标及肺组织纤维化指标的影响.方法:选择成年雄性SD大鼠,采用烟熏法制作COPD模型,给予金荞麦提取物进行治疗.治疗后检测肺纤维化宏观指标、分子指标以及血清中炎症反应相关分子.结果:(1)肺组织纤维化:与对照组比较,模型组的气道阻力、胸腔内压力以及Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)、转化生长因子-β(TGF-β)、Smad3含量增加,肺组织动态顺应性以及水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白5(AQP5)含量降低;与模型组比较,治疗组的气道阻力、胸腔内压力以及Col Ⅰ、Col Ⅲ、TGF-β、Smad3含量降低,肺组织动态顺应性以及AQP1、AQP5含量增加;(2)血清指标:与对照组比较,模型组血清中γ-干扰素(INF-γ)、CXCR3、白介素-17(IL-17)、降钙素原(PCT)、白三烯B4 (LTB4)的含量明显升高;与模型组比较,治疗组血清中INF-γ、CXCR3、IL-17、PCT、LTB4的含量明显降低.结论:金荞麦提取物干预能够改善肺组织纤维化、缓解炎症反应程度,是治疗COPD的理想药物.
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金荞麦提取物对人宫颈癌Hela细胞增殖和诱导凋亡的影响
目的:探讨金荞麦提取物对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡作用及可能机制.方法:经不同浓度金荞麦提取物(0.4、2、10、50、250 g/ml)处理体外培养的人宫颈癌Hela细胞,采用MTI法检测细胞增殖活性;经6 g/mrl金荞麦提取物处理的Hela细胞,相差显微镜和荧光显微镜观察细胞形态,Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳法检测DNA碎片,ELISA法检测Caspase-1、3、8、9活性,Western blot法检测PARP、细胞色素C含量、Bcl-2、Bax蛋白表达.结果:与空白对照组比较,金荞麦提取物浓度为0.2 g/m1开始起效,24h内明显抑制Hela细胞增殖,并呈时间和剂量依赖性;与空白对照组比较,6 g/ml金荞麦提取物处理的Hela细胞出现明显的核固缩、核碎裂,细胞凋亡率、DNA碎片明显增加;与金荞麦提取物组比较,金荞麦提取物与caspase抑制剂混合组DNA碎片明显减少,细胞成活率明显升高;与作用Oh组比较,6 g/ml金荞麦提取物处理的Hela细胞PARP裂片、细胞色素C、Bax和Caspase-3、8、9明显增加,Bcl-2明显减少.结论:金荞麦提取物可抑制Hela细胞增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与通过促进诱导凋亡蛋白Bax表达和抑制抗凋亡蛋白Bcl-2表达,从而增加细胞色素C和Caspases有关.
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金荞麦提取物改善肠易激综合征大鼠内脏痛觉过敏的效果及其机制
目的 观察金荞麦提取物(Fag)对肠易激综合征(IBS)大鼠内脏痛觉过敏的影响及其机制.方法 采用腹壁撤退反射(AWR)评分观察Fag(6、24 g·kg-1)口服给药两周后的IBS大鼠模型的内脏痛觉过敏的变化,并用免疫荧光法观察腰骶段脊髓背根神经(DRG)的辣椒素受体亚型TRPV1表达水平;采用细胞膜片钳记录Fag(0.1、0.3、1、3 g·L-1)对辣椒素(CAP)激活大鼠的DRG细胞TRPV1电流(ITRPV1)的影响.结果 Fag 24 g·kg-1在体内可显著降低升高的IBS大鼠AWR评分,IBS大鼠腰骶段DRG的TRPV1表达增高;Fag 6、24 g·kg-1干预后DRG的TRPV1表达下降;体外0.1、0.3、1、3 g·L-1 Fag可浓度依赖地抑制CAP激活的分离DRG神经元ITRPV1,IC50为0.83 g·L-1.结论 Fag可通过下调IBS大鼠TRPV1受体表达改善大鼠痛觉过敏,可抑制DRG神经元ITRPV1峰值,调节痛觉信号传递.
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金荞麦提取物对WM239迁移的抑制作用及WM239与Huvec共培养体系N-Cadherin磷酸化的影响
目的:探讨金养麦提取物对WM239细胞穿越内皮细胞过程中N-钙黏附分子的影响.方法:采用苏木素方法测定金养麦提取物对HUVEC和WM239细胞增殖的影响,筛选合适的金养麦提取物浓度；利用Transwell迁移实验,测定金养麦提取物对WM239细胞迁移能力的影响；流式细胞术(FCM)测定金荞麦提取物对HUVEC和WM239细胞共培养体系N-cadherin表达的影响；免疫共沉淀实验测定金荞麦提取物对N-cadherin胞内段磷酸化及其与β-catenin结合的影响；Westem blot检测金荞麦提取物对Src活化的影响.结果:金荞麦提取物浓度在25～100mg/L之间对WM239和HUVEC的增殖无明显抑制作用.金荞麦提取物在此药物浓度范围内可对WM239细胞的迁移能力有较强的抑制作用.金养麦提取物对共培养细胞N-cadherin表达量几乎没有影响,但可导致p-Src蛋白的表达减少,N-cadherin胞内段的磷酸化减低,引起N-cadherin与β-catenin的解离减少.结论:金荞麦提取物可抑制WM239的增殖和迁移能力,减少Src蛋白的活化,降低N -cadherin胞内段磷酸化水平及N-cadherin与β-catenin的解离.
