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1,8-二甲基-3,5,7-三硝基-2-喹诺酮诱导人肺癌A549细胞凋亡
目的:研究1,8-二甲基-3,5,7-三硝基-2-喹诺酮对人肺癌A549细胞的促凋亡作用及其可能的分子机制.方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定1,8-二甲基-3,5,7-三硝基-2-喹诺酮对A549细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测1,8-二甲基-3,5,7-三硝基-2-喹诺酮对A549细胞中活化型半胱天冬酶-3(cleaved-Caspase-3),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),总蛋白激酶B(Akt),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt),叉头框蛋白O1(FOXO1),磷酸化叉头框蛋白O1(p-FOXOI),Bel-2促细胞凋亡蛋白(Bim)表达的干预作用.结果:1,8-二甲基-3,5,7-三硝基-2-喹诺酮(1.25,2.5,5,10,20 mg·L-1)能质量浓度和时间依赖性地抑制A549细胞增殖.作用12,24 h的半数抑制浓度(IC50)分别为2.80,2.05μmol·L-.流式细胞术结果显示1,8-二甲基-3,5,7-三硝基-2-喹诺酮能显著诱导细胞凋亡,随着药物质量浓度的提高,细胞凋亡率逐渐上升.Western blot检测显示,1,8-二甲基-3,5,7-三硝基-2-喹诺酮上调cleaved-Caspase-3 和Bax蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达.同时会下调p-Akt和p-FOXO1的表达,上调Bim的表达.结论:1,8-二甲基-3,5,7-三硝基-2-喹诺酮能够诱导A549细胞凋亡,该药理作用可能与1,8-二甲基-3,5,7-三硝基-2-喹诺酮抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt/FOXO1信号通路有关.
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康心饮对缺血性心肌病大鼠心肌凋亡及PI3K/Akt/FoxO1信号通路的影响
目的 观察康心饮对缺血性心肌痛(ICM)大鼠心肌凋亡及PI3K/Akt/FoxO1信号通路的影响,探讨其对ICM的作用及可能机制.方法 66只大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、卡托普利组及康心饮低、中、高剂量组,每组11只.采用左前降支结扎法制备缺血性心肌病模型.模型组予生理盐水10 mL/(kg·d)早晚灌胃,卡托普利组予卡托普利2.86 mg/(kg · d)早晚灌胃,康心饮低、中、高组分另予康心饮9.2、18.4、36.8 g/(kg·d)早晚灌胃,给药2周.TUNEL法检测心肌凋亡情况,Western blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、PI3K、Akt、FoxO1蛋白表达,RT-PCR检测PI3K、Akt、FoxO1 mRNA表达.结果 与假手术组比较,模型组心肌凋亡增多(P＜0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达量升高(P ＜0.05,P＜0.01),Bcl-2蛋白表达量下降(P＜0.01),PI3K、p-Akt、p-FoxO1蛋白和PI3K、Akt、FoxO1 mRNA表达均下降(P＜0.05);与模型组比较,康心饮组低、中、高剂量和卡托普利组心肌凋亡均明显减少(P＜0.01),Bax和Caspase-3蛋白表达下降,Bcl-2蛋白表达增加(均P＜0.05),PI3K、p-Akt、p-FoxO1蛋白及PI3K、Akt、FoxO1 rn RNA表达均升高(P＜0.01),且康心饮高剂量组和卡托普利组优于康心饮低、中剂量组(P＜0.05).结论康心饮可能通过激活PI3 K/Akt/FoxO1信号通路,抑制ICM心肌细胞凋亡.
关键词： 缺血性心肌病 细胞凋亡 PI3K/Akt/FOXO1信号通路 康心饮 -
PI3K/AKT/FOXO1信号通路参与复方中药CFF-1诱导的前列腺癌细胞凋亡和周期阻滞
目的:研究复方中药CFF-1诱导前列腺癌细胞的凋亡作用及其相关分子机制的探讨. 方法:通过形态学观察、噻唑蓝(MTT)比色实验、CCK-8实验测定前列腺癌细胞的存活能力;采用DAPI染色法测定细胞核凝缩破裂;运用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术测定前列腺癌细胞的凋亡率.再通过PI单染流式细胞术测定前列腺癌细胞的周期变化;以及采用蛋白质免疫印迹实验检测PI3 K/AKT/FOXO1信号通路以及其下游凋亡相关蛋白和周期相关蛋白的表达. 结果:复方中药CFF-1使前列腺癌细胞周期阻滞在G1期,并呈浓度依赖性降低细胞的存活能力、增加细胞核凝缩破裂以及核小体的形成,显著提高前列腺癌细胞的凋亡率.在分子机制上,CFF-1呈现浓度依赖性下调PI3K/AKT活性,降低FOXO1磷酸化水平,进而上调FOXO1的转录活性,终影响凋亡相关基因和周期相关基因的表达. 结论:CFF-1对前列腺癌细胞的生长有显著的抑制作用,并且通过PI3 K/AKT/FOXO1信号通路诱导前列腺癌细胞周期阻滞并发生凋亡,对治疗前列腺癌具有潜在的临床应用价值.
