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三叶青提取物对肺癌A549细胞的体外抑制作用
目的:探讨三叶青提取物对肺癌细胞A549的体外抑制作用.方法:采用体外细胞培养技术,用MTT法观察三叶青提取物对肺癌细胞A549体外抑制作用的时效、量效关系;琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;RT-PCR法检测细胞凋亡相关基因BcL-2的表达.结果:三叶青提取物以1×10-3g·L-1的浓度与A549细胞共培养48h,其细胞活性有显著降低;不同浓度的三叶青提取物和A549细胞共同培养,药物浓度为1 ×10-2、1 ×10-3、1 × 10-4g·L-1的三叶青提取物对A549细胞活性有显著性抑制作用.琼脂糖凝胶电泳有明显的梯状条带;不同浓度三叶青提取物作用于A549细胞后,细胞BcL-2基因的表达随浓度的增加而降低.结论:三叶青提取物对A549细胞具有明显的体外抑制作用,其抑制作用与药物的浓度和作用时间呈明显正相关.
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三叶青提取物抗炎、镇痛及解热作用的实验研究
目的:探讨三叶青提取物(ERT)的抗炎、镇痛及解热作用,并验证其相关功效.方法:以小鼠腹腔毛细血管通透法、小鼠耳肿胀法及大鼠足肿胀法观察其抗炎作用;以小鼠扭体法、热板法观察其镇痛作用;以干酵母致热法及2,4-二硝基苯酚致热法观察其解热作用.结果:三叶青提取物能明显抑制小鼠腹腔毛细血管炎性渗出,抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀及10%蛋清致大鼠足跖肿胀;减少醋酸致小鼠扭体次数,提高热板法小鼠痛阈值;并降低干酵母和2,4-二硝基苯酚致大鼠发热模型的体温.结论:三叶青提取物具有较好的抗炎、镇痛及解热作用,与其相关的中医临床功效及主治相符.
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三叶青的化学成分研究
三叶青的基源为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤Tetrastigma hemsleyanum Diels et.Gilg.异名为蛇附子(<植物名实图考>),石抱子(<江西草药>),金线吊葫芦、三叶对(<浙江民间常用草药>),小扁藤、三叶扁藤、拦山虎(<广西实用中草药新选>),雷胆子(<湖南中草药新医疗法资料选编>).三叶青生长于山谷林中或沟边坡地,分布于我国西南及安徽、浙江、江西、福建、湖北、湖南、广东、广西等省.三叶青以块根或全草入药,具有清热解毒、祛风化痰、活血止痛的功能,用于治疗高热惊厥、肺炎、哮喘、肝炎、风湿、月经不调、咽痛、瘰疬等症,具有很好的疗效[1].药理实验表明三叶青提取物有抗病毒作用[2]和明显的消炎镇痛[3]及保肝作用[4],在民间有着广泛的应用.
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三叶青提取物抗人类免疫缺陷病毒活性研究
目的:探讨三叶青提取物对人类免疫缺陷病毒(HIV)活性的抑制作用.方法:以不同HIV-1病毒株(实验株HIV-1ⅢB、HIV-1耐药株HIV-174V、HIV-1临床分离株HIV-1KM018)为研究对象,通过合胞体抑制等多种方法检测三叶青提取物对不同病毒株的抑制作用,MTr法、ELISA法及荧光法分别检测三叶青提取物体外细胞毒性、提取物对HIV-1逆转录酶及蛋白酶活性的抑制作用.结果:三叶青提取物对C8166、MT4、PBMC的体外细胞毒性作用CC50值分别为158.73 μg/mL、96.42Iμg/mL、120.67 μg/mL.三叶青提取物对不同HIV-1病毒株有不同程度的抑制作用,EC50值在3.54 ～78.56 μg/mL之间,TI值在2.03 ～43.18之间;其中实验株HIV-1 ⅢB急性感染C8166细胞抑制HIV-1 p24抗原表达EC50值大,C8166细胞形成合胞体TI值大.提取物对HIV-1慢性感染细胞与正常T淋巴细胞C8166融合阻断、重组HIV-1逆转录酶抑制的EC50值分别为14.79 μg/mL、170.15μg/mL.结论:三叶青提取物体外对HIV-1活性有一定的抑制作用,且可能是通过抑制HIV-1病毒至细胞及HIV-1逆转录酶活性达到抗HIV活性的目的.
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不同产地三叶青提取物解热作用及对大白鼠下丘脑5-羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺含量的影响
目的 探讨不同产地三叶青提取物(ETR)对酵母致大白鼠发热和下丘脑5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)含量的影响,为三叶青进一步种质优化,发挥地理优势,开发优质资源提供强有力的科学依据.方法 用荧光分光光度计在365、385、325 nm处为激发波长,以485、480、375 nm为发射波长,测定不同产地三叶青的5-HT、NE和DA含量.结果 给药组大白鼠在给予不同产地的三叶青提取物后1h体温都有明显下降,下丘脑组织中5-HT、NE和DA的含量明显低于空白对照组.结论 不同产地的三叶青提取物对酵母致发热大白鼠均有明显的解热作用,其中浙江乐清、舟山地产三叶青解热作用和对影响体温调节中枢介质5-HT、NE、DA的作用尤为显著.
关键词： 三叶青提取物 产地 解热作用 5-羟色胺(5-HT) 去甲肾上腺素(NE) 多巴胺(DA) -
三叶青提取物解热作用及对大白鼠下丘脑5-羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺含量的影响
目的 探讨三叶青提取物(E[R)对酵母致大白鼠发热和下丘脑5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)含量的影响,为其解热降温机理作用提供科学依据.方法 用荧光分光光度计在365、385、325 nm处为激发波长,以485、480、375 nm为发射波长,测定5-HT、NE和DA含量.结果 给药组大白鼠在给予三叶青提取物后1h体温显著下降,下丘脑组织中5-HT、NE和DA含量明显低于空白对照组.结论 三叶青提取物对酵母致发热大白鼠有明显的解热作用,其解热作用与影响体温调节中枢介质5-HT、NE、DA的含量有关.
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三叶青乙酸乙酯提取物对结肠癌HT29细胞皮下移植瘤的诱导凋亡作用
目的:观察三叶青乙酸乙酯提取物对结肠癌HT29细胞皮下移植瘤的诱导凋亡作用,探讨其可能的作用机制,为三叶青在临床上应用于结肠癌的治疗提供实验依据.方法:以HT-29结肠癌细胞荷瘤裸鼠为模型.实验分5组,模型组、阳性对照组及三叶青提取物低、中、高剂量组,各组裸鼠给予相应药物或生理盐水灌胃14 d.观察各组裸鼠的一般情况,以及对HT29细胞皮下移植瘤的抑瘤率;HE染色后观察肿瘤组织细胞形态学改变,免疫组织化学方法检测瘤组织内Caspase-3的蛋白表达水平.结果:三叶青提取物中、高剂量组及阳性组瘤重较模型组减轻(P＜0.05),阳性组瘤重轻;中药各组随着剂量的增加,抑瘤率上升.与模型对照组比较,各给药组荷瘤鼠瘸细胞凋亡程度增强;三叶青提取物中、高剂量组瘤组织Caspase-3蛋白表达水平显著上调.结论:三叶青乙酸乙酯提取物可抑制结肠癌HT29细胞皮下移植瘤的生长,作用机制之一为上调Caspase-3蛋白的表达,诱导结肠癌HT29细胞皮下移植瘤凋亡.
关键词： 结肠肿瘤 三叶青提取物 细胞凋亡 Balh/c-nu裸鼠 -
三叶青提取物对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用及急性毒性实验
三叶青Radix Tetrastigmae为葡萄科植物三叶崖爬藤Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg的干燥块根,分布于我国浙江,江西,福建,台湾,湖北,广东,广西,四川,贵州及云南等省区[1],具有清热解毒,祛风化痰,活血止痛的功能,主要用于治疗高热惊厥、腹痛、肺炎、哮喘及跌打损伤等症[2].
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三叶青提取物抗消化系统肿瘤作用的研究进展
三叶青提取物由中药三叶崖爬藤中提取所得,属黄酮类化合物,具有抑制肿瘤、保肝、抗炎及调节机体免疫等多种药理活性,能抑制肝癌、胃癌及结肠癌等多种消化系肿瘤细胞的增殖并促进其凋亡,而对正常细胞无明显毒副作用,其抗瘤机制包括激活胱天蛋白酶(Caspase)家族启动凋亡、引起B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)基因家族表达变化从而促进细胞色素C的释放等.本文对三叶青提取物抗消化系统肿瘤的作用及其机制进行了综述.
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三叶青提取物对肺癌A549细胞中Caspase-3表达的影响
目的 探讨三叶青提取物对肺瘸A549细胞半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达的影响.方法 分别用浓度为0.1、0.01和0.001 g/L的三叶青提取物(D1、D2和D3组)和生理盐水(对照组)处理休外培养的肺癌A549细胞48 h后,采用Westem blot法检测各组细胞中Caspase-3的表达.结果 D1、D2和D3组Caspase-3的表达均离子C组(P＜0.05),并且呈浓度依赖性.结论 三叶青提取物可通过激活Casase-3诱导人肺癌A549细胞凋亡,并且呈剂量依赖性.
关键词： 三叶青提取物 A549细胞 半胱天冬氨酸蛋白酶3 -
三叶青提取物对白血病HL60细胞增殖抑制作用研究
目的 探讨三叶青提取物对白血病HL60细胞的增殖、凋亡的影响.方法 将不同浓度的受试物作用于体外培养的HL60细胞,用四氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪观察细胞凋亡.结果 受试物处理24 h后6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 μg/ml组,受试物处理48、72 h后所有浓度组HL60细胞的增殖率和凋亡率均呈不同程度的下降或上升,差异均有统计学意义.结论 三叶青提取物能有效抑制体外HL60细胞的增殖,诱导HL60细胞凋亡.
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三叶青提取物对人结肠癌细胞系RKO细胞凋亡的影响
[目的]观察三叶青提取物对人结肠癌细胞系RKO细胞凋亡的作用,初步探讨其可能的机制.[方法]采用体外细胞培养技术,用MTT法观察三叶青提取物RKO细胞的影响;琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;RT-PCR检测Bid,Bax,Bcl-2和Bcl-XL的表达改变.[结果]三叶青提取物能显著地抑制人结肠癌细胞系RKO细胞的生长,并且具有浓度依赖性,且细胞有明显的凋亡特征性改变,并能下调Bcl-XL、上调Bid来诱导凋亡.[结论]三叶青提取物具有对人结肠癌细胞系RKO细胞抗增殖和诱导凋亡的作用,且呈剂量依赖性.
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三叶青提取物诱导肺癌A549株细胞凋亡的研究
目的 探讨三叶青提取物对肺癌细胞A549的作用,初步探讨其机制.方法 采用体外细胞培养技术,采用流式细胞仪检测A549细胞株的细胞周期分布相和细胞凋亡率.结果 流式细胞仪检测结果显示:加三叶青提取物10-1 g/L、10-2 g/L处理后的细胞凋亡比例明显高于对照组.结论 三叶青提取物对A549细胞具有诱导凋亡的作用.
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三叶青提取物体内抑瘤作用及其机理研究
目的:探讨S180荷瘤小鼠经三叶青提取物干预后抑瘤率、细胞免疫功能和抗氧化能力的变化.方法:本次试验设正常对照组、肿瘤对照组、三叶青提取物低、高(5和15 g/kg·BW)两个剂量组、环磷酰胺(CTX)阳性对照组和联合组(三叶青提取物高剂量+CTX).除正常对照组外均接种S180肿瘤细胞,经药物干预后观察各组外周血T细胞亚群(CD3、CD4、CD8和CD4/CD8)和抗氧化指标(MDA、SOD和CAT)的变化,并比较抑瘤率的大小.结果:与肿瘤对照组比较,三叶青提取物高剂量组外周血T细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD4/CD8均有明显改善且趋于正常,脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量明显下降,混合功能氧化酶过氧化氢酶(CAT)的活性明显升高,且均有统计学差异;经三叶青提取物高剂量干预后的抑瘤率达36.06%.结论:三叶青提取物具有一定的抑瘤效果,其作用机理可能与改善荷瘤小鼠机体的细胞免疫功能,激活机体的抗氧化作用途径有关.
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中药三叶青提取物抗肿瘤机制初探
目的:通过对三叶青提取物小鼠免疫调节功能的评价,初步确定其抗肿瘤作用的基本机制.方法:从细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞吞噬作用和自然杀伤细胞的攻击作用4个方面观察三叶青提取物对小鼠免疫功能的影响.结果:三叶青提取物5.0、15.0、25.0g/kg·BW剂量组均能提高ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖能力和小鼠左后足跖部厚度差24h测量值;2.5、5.0g/kg·BW剂量组均能提高小鼠溶血空斑数;2.5、5.0、15.0和25.0g/kg·BW剂量组均能提高小鼠碳廓清的能力;15.0g/kg·BW剂量组能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数.结论:三叶青提取物具有增强小鼠免疫力作用,为其抗肿瘤作用机制之一.
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三叶青提取物对白血病K562细胞增殖的抑制作用
目的:探讨三叶青提取物对白血病K562细胞增殖的抑制作用及其作用机制.方法:将不同浓度的受试物作用于体外培养的K562细胞,用四氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪观察细胞凋亡,采用实时荧光定量PCR技术分析P53和C-myc基因的mRNA表达水平.结果:受试物对白血病细胞的增殖具有明显的抑制作用,能诱导白血病K562细胞发生凋亡,对P53基因的mRNA表达水平有明显上调趋势,而对C-myc基因的mRNA表达水平则有明显下调趋势.结论:三叶青提取物具有显著的体外抗白血病作用,促进抑癌基因P53高表达和癌基因C-myc的低表达可能是其重要作用机制之一.
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三叶青提取物诱导人肝内胆管癌HCCC-9810细胞凋亡的研究
目的:探讨三叶青提取物(Extract from Tetrastigma hemsleyanum,ETH)诱导人肝癌HCCC-9810细胞凋亡的作用及相关机理.方法:MTT法测定不同浓度和时间ETH处理后HCCC-9810细胞的增殖抑制率;Hoechst33258染色法检验HCCC-9810细胞凋亡特征,流式细胞术检验不同浓度ETH处理HCCC-9810后细胞凋亡率的变化;Western-blot法检验ETH处理HC-CC-9810后Pro-caspase3和胞浆细胞色素C的表达变化.结果:ETH对HCCC-9810细胞生长具有明显的剂量与时间依赖性抑制作用,ETH作用HCCC-9810细胞24h、48 h和72 h后的IC50值分别为275.3 mg·L-1、183.3 mg· L-1、75.8 mg· L-1.随着ETH浓度增大细胞核出现染色质固缩,染色加深固缩等凋亡特征,细胞凋亡率逐渐增高,200 mg·L-1 ETH,24h处理组凋亡率为(33.5±8.1)％,胞浆细胞色素C表达逐渐增强和Caspase-3前体量的下降.结论:ETH诱导HCCC-9810细胞凋亡,其机制可能与激活Caspase及其介导的线粒体凋亡途径的激活有关.
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三叶青提取物抗肿瘤作用及机制研究进展
三叶青为葡萄科崖爬藤属多年生蔓生藤本植物,具有显著的抗肿瘤活性.通过总结相关研究文献,对近年来三叶青提取物抗肿瘤作用及作用机制的研究成果做一综述,为三叶青抗肿瘤在临床上的开发利用提供科学的理论依据.
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三叶青提取物对烫伤大鼠肠道局部和全身免疫功能的影响
目的:探讨三叶青提取物对烫伤大鼠肠道局部和全身免疫功能的影响.方法:复制大鼠40%Ⅲ度烫伤模型,采用免疫透射比浊法测定大鼠血清中免疫球蛋白A(IgA)含量;采用双抗体夹心ELISA法,测定大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)含量;用放射免疫分析法测定大鼠回肠粘液提取液中S-IgA含量;比色法测定大鼠肠粘膜丙二醛(MDA)含量;检测大鼠脾淋巴细胞增殖情况及自然杀伤细胞(NK)活性.结果:三叶青提取物能拮抗烫伤致大鼠血清IgA含量降低、回肠粘液中S-IgA含量降低及肠粘膜中MDA含量升高作用;能拮抗烫伤致大鼠脾脏淋巴细胞增殖能力下降、NK细胞活性降低及烫伤引起的血清IL-6水平增加作用.结论:三叶青提取物对烫伤引起的肠道局部和全身免疫紊乱有纠正作用.
