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基于DNA条形码对凉山虫草及近缘物种和其混伪品的分子鉴定
目的：结合ITS基因和COI基因对《四川省中药材标准》收录的凉山虫草和近缘物种及当地市场上出现的混伪品进行分子鉴定，考察其方法的可行性。方法：对收集的28份样品通过DNA提取、PCR扩增，分别获得其ITS序列和COI序列。用Codon Code Aligner V3.7.1，Mega 5.0等软件进行比对分析，构建基于ITS序列和COI序列的样品的NJ树，进行聚类分析。结果：凉山虫草和近缘物种及混伪品寄生真菌的ITS序列种间小K-2P距离大于各物种种内大K-2P距离：种内变异小，种间差异较大，从而基于ITS序列的NJ树能将凉山虫草与其他近缘物种及其混伪品很好地归属；凉山虫草和近缘物种及其混伪品寄主昆虫的COI序列种间小K-2P距离大于各物种种内大K-2P距离：种内变异小，种间差异较大，通过遗传距离及NJ树的分析能将凉山虫草与其他近缘物种其及其混伪品及其他近缘物种很好地区分。结论：结合ITS序列和COI序列的DNA条形码技术可以很好地鉴定凉山虫草与其近缘物种及其混伪品，并对虫草属的系统学和分类研究提供了技术支持。
关键词： 凉山虫草 混伪品 ITS序列 COI序列DNA条形码 -
冬虫夏草人工繁育品与野生品基于甾醇特征图谱的比较研究
目的:对冬虫夏草人工繁育品与野生品进行比较研究,建立基于甾醇类成分的特征图谱,并比较麦角甾醇含量的差异,为该药材的质量监管提供参考.方法:以10批冬虫夏草人工繁育品、17批野生品以及5批凉山虫草为研究对象,采用超高效液相色谱法,以麦角甾醇为对照品,选用XBridgeC18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.6 μm);流动相为甲醇-水(95∶5),检测波长282 nm,流速0.3 mL·min-1,柱温30℃,采用CHEMPATTERN化学计量学软件对野生品色谱图进行处理,生成特征图谱,并计算所有批次的相似度.结果:17批野生冬虫夏草、10批冬虫夏草人工繁育品与野生品对照图谱之间的相似度均大于0.9,相似度良好;而5批凉山虫草相似度均未超过0.8,相似度较低.10批人工繁育品的平均含量为0.121％±0.031％;17批野生品的平均含量为0.115％±0.045％;5批凉山虫草的平均含量为0.468％±0.038％.冬虫夏草人工繁育品和野生品基于甾醇的特征图谱以及麦角甾醇含量基本一致;与凉山虫草有显著性差异.结论:本研究有助于冬虫夏草的真伪鉴别,同时为冬虫夏草人工繁育资源开发以及合理使用提供科学依据.
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冬虫夏草的本草新考
为更好的开发利用冬虫夏草资源,古为今用,考证历代中医药典籍,对冬虫夏草进行本草学新考.结果显示古代中医所用冬虫夏草来源于多个品种,历代医家对其药性存在较大争议,四川为冬虫夏草传统产区和集散地.建议加强凉山虫草等近缘品种研究,为冬虫夏草替代资源的寻找和开发利用提供依据;加强冬虫夏草药性研究,结合现代药理药效学研究成果和临床应用实际,明确冬虫夏草寒热药性属性.
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冬虫夏草及其伪品的鉴别
冬虫夏草是我国传统的名贵中药,具有补肺益肾、止血化痰的功效.由于其疗效显著,药源稀少,因此价格昂贵,市场上经常出现一些伪品,常见的有亚香棒虫草、分枝虫草、凉山虫草.
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冬虫夏草与混、伪品的鉴别
冬虫夏草具补肺益肾、止血化痰功能,据药理实验冬虫夏草能明显促进免疫功能,增加冠脉流量,有明显降压平喘作用,市场上常有以亚香棒虫草,凉山虫草充当正品使用,必须加以鉴别.
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冬虫夏草的真伪鉴别
冬虫夏草是我国传统的名贵中药,与人参、鹿茸齐名,并列为三大补品.冬虫夏草味甘性平,具有补肺益肾,止血化痰的功效.可用于久咳虚喘、劳嗽咳血、阳痿遗精、腰膝酸痛.因其资源稀少,价格昂贵,常发现有许多伪劣冬虫夏草和掺杂混淆品,需注意真伪鉴别,具体鉴别如下,以供参考.
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菟丝子等4组中药伪品特征及简易识别
1 菟丝子 又名吐丝子。因其水煮后会吐出新芽，形如吐丝，而得名。1.1 正品 菟丝子，呈类球形或卵圆形，直径1～1.5 mm。表面灰棕色或灰黄色，在放大镜下观察，可见细密突起的小点，一端有微凹的线形种脐，质坚实，不易被指甲压碎。气微，味淡。1.2 伪品 某厂为生产“壮腰健肾丸”而购进中药原料药菟丝子。经送检鉴定为同科植物大菟丝子。其形如正品，不同之处为个较大，呈类圆球形或三棱形，直径2～3 mm。表面黄棕色或淡黄色，质坚硬。水煮后较长时间才露出黄白色卷旋状的胚。2 冬虫夏草2.1 正品 虫体呈蚕状，长3～5 cm，直径0.3～0.8 cm。表面深黄色至黄棕色，有环纹20～30个。近头部的环纹较细，头部红棕色，腹部有足8对，中部4对较明显。质脆，易折断，断面略平坦，淡黄白色。子座呈长棒状，长4～7 cm，直径约0.3 cm。头部稍膨大。表面深棕色至棕褐色，折断面类白色，柄部有细纵纹。2.2 伪品 从今年咨询该品种的3批(次)看，除1批(次)为正品外，另外2批(次)均为非正品。经进一步鉴定为凉山虫草。其形与正品相似，不同之处为，凉山虫草虫体较粗，且表面有被棕至棕褐色菌膜，菌膜脱落处呈紫褐色，有环纹9～12个，足不明显。子座线状，长10～30 cm，直径0.1～0.2 cm，较正品细长。
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Tricine-SDS-PAGE分析极低分子量蛋白的条件优化
目的 优化适合分析极低分子量蛋白的Tricine-SDS-PAGE电泳方法.方法 采用Tricine-SDS-PAGE电泳方法,考察凝胶浓度、交联度对分离效果的影响,筛选出佳电泳条件.并利用所优化方法分析验证凉山虫草中的蛋白质组分.结果 在分离胶交联度为0.165、浓度为5%及浓缩胶交联度为0.04、浓度为2.7%时,Tricine-SDS-PAGE对3～20 kDa蛋白质有较高的分辨率,凉山虫草中的极低分子量蛋白质组分在该条件下比在Tris-SDS-PAGE系统下可得到更好的分离.结论 所优化的方法对20 kDa以下极低分子量蛋白的分辨率高,条带的线性关系良好.
关键词： Tricine-SDS-PAGE 凉山虫草 极低分子量蛋白 -
HPLC测定凉山虫草中的腺苷
目的 测定凉山虫草中腺苷的含量.方法 采用HPLC法,Diamonsil C_(18)色谱柱为(200 mm×4.6 mm,5μm),以磷酸盐缓冲液(pH6.5)-甲醇(80:20)为流动相,流速0.6 mL·min~(-1),柱温30℃;检测波长260 nm.结果 腺苷1～40μg·mL~(-1)与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9994);平均回收率为101.89%,RSD=3.11%(n=9).测定了10批样品中腺苷的含量,含量范围为0.0367～0.0590 mg·g~(-1).结论 所建方法准确、快速、简便,适用于凉山虫草中腺苷的测定.
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凉山虫草的薄层色谱研究
目的:建立一种快速、有效的凉山虫草成分鉴别方法,完善药材的质量标准.方法:采用薄层色谱法,以腺苷为对照品,以三氯甲烷-乙酸乙酯-异丙醇-水-浓氨水(5:2:6:0.6:0.13)为展开剂,对凉山虫草进行薄层分析.结果:10批凉山虫草样品薄层色谱中,在与对照品色谱相同位置上均显相同颜色的斑点,且色谱斑点清晰,无拖尾,分离度良好.结论:该方法简便,快速,结果准确度高,重现性好,药材用量少,是一种行之有效的凉山虫草鉴别方法.
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凉山虫草与冬虫夏草中多糖的含量比较研究
目的 比较凉山虫草与冬虫夏草在多糖含量上的差异,为凉山虫草的资源开发利用提供依据.方法 采用苯酚-硫酸法,以葡萄糖为对照品,测定凉山虫草与冬虫夏草中多糖含量.结果 凉山虫草样品多糖含量分别为1.30％、1.44A,冬虫夏草样品多糖含量分别为2.02％、2.27％.结论 凉山虫草中含有丰富的多糖成分,含量低于冬虫夏草.
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凉山虫草的资源开发和利用探讨
凉山虫草作为冬虫夏草的补充资源,生长在海拔较低的环境,资源丰富,其基原动物与冬虫夏草有较近的亲缘关系,在形态等方面与冬虫夏草有明显的区别但化学成分相似；凉山虫草的镇静作用、耐缺氧作用、对细胞免疫和非特异性免疫功能的影响等主要药理作用与虫草相似,但略弱于冬虫夏草,而毒性小于冬虫夏草,属于一种值得进一步研究的虫草资源.
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冬虫夏草真伪鉴别
冬虫夏草常见伪品有亚香棒虫草、凉山虫草、珊瑚虫草等，鉴别如下。
1 冬虫夏草
麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordyceps sinensis （BerK.） Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体［1］。由虫体与从虫头部长出的真菌子座相连而成。虫体似蚕，长3～5cm，直径0.3～0.8cm。表面深黄色至黄棕色，有环纹20～30个，近头部的环纹较细，头部红棕色。足8对，中部4对较明显；尾如蚕尾［2］。质脆，易折断，断面略平坦，淡黄白色。子座细长圆柱形，长4～7cm，直径0.3cm。表面深棕色至棕褐色，有细纵皱纹，上部稍膨大；质柔韧，断面类白色。气微腥，味微苦。
