首页 > 文献资料
-
基于中医理论及临床验证基础上的射干作用机制研究
目的:以中医理论为指导,依据射干临床应用病种,探讨射干提取物对合胞病毒(RSV)感染豚鼠气道炎症白介素-4(IL-4)、干扰素-y(IFN-y)、白三烯-4(LTC4)表达的影响.方法:实验分空白组、模型组、给药组,每组10只,除空白组外,其余各组豚鼠在乙醚浅麻后鼻腔滴注100TCID50的RSV悬液100 μL(每天滴鼻2次,早晚各1次,空白组给予相同剂量的5％DMEM培养液),连续给药1周.收集肺泡灌洗液(BALF)计数,并测定肺泡灌洗液中IL-4、IFN-γ、LTC4水平变化,HE染色观察肺组织形态学变化.结果:射干提取物的干预治疗能显著降低小鼠BALF中炎性细胞总数;BALF上清液中IFN-γ水平明显升高,IL-4、LTC4水平显著下降,与RSV感染模型组比较有显著性差异(P＜ 0.05).结论:射干提取物能明显降低豚鼠模型BALF中炎性细胞数量,影响细胞因子水平变化,减轻肺组织炎症.
-
射干提取物含药血清对豚鼠离体气管平滑肌收缩功能的影响
目的:研究射干提取物含药血清对豚鼠离体气管平滑肌收缩功能的影响.方法:取豚鼠气管,在Kreb's液中制备气管平滑肌螺旋条,于恒温浴槽装置中,加入组胺(His)使其收缩,观察加入射干提取物含药血清后3,5,10 min的解痉率.结果:射干提取物含药血清对组胺引起的气管平滑肌收缩反应有一定拈抗作用,其中剂量(0.46 g?kg-1)3,5,10 min解痉率分别为44.29％,45.27％和48.30％；高剂量(0.92 g?kg-1)3,5 min解痉率分别为31.17％和31.83％,与空白对照组比较有显著性差异(P ＜0.05或P＜0.01),药物与标本接触5 min效果好.结论:射干提取物含药血清对His引起的气管平滑肌收缩反应具有一定的拮抗作用.
-
射干提取物体内体外抑菌作用的研究
目的:研究射干提取物的体内外抑菌作用.方法:通过测定抑菌圈直径考察射干提取物对不同菌株的敏感性;采用2倍稀释法检测射干提取物的小抑菌浓度(MIC);通过ip金黄色葡萄球菌观察射干提取物低、中、高(0.46,0.92.1.84g·kg-1)3个剂量ig给药7 d对小鼠的致死保护率.结果:肺炎链球菌、铜绿假单胞菌对射干提取物有较强的敏感性,金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、无乳链球菌、化脓链球菌、痢疾志贺菌对射干提取物中度敏感;射干提取物对金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、无乳链球菌、化脓链球菌、痢疾志贺菌的小抑菌浓度(MIC/g·mL-1)分别为0.0625,0.0156.0.2500,0.0312,0.0156,0.0156.0.0625;射干提取物低、中、高3个剂量组均显著降低金黄色葡萄球菌酵母悬液引起的小鼠死亡率,死亡率分别为45%,35%,30%,与模型对照组死亡率100%比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论:射干提取物体内体外对所试菌株均有抑菌作用.
-
射干提取物对小鼠免疫功能的影响
目的 研究射干提取物对小鼠免疫功能的影响.方法以环磷酰胺制备小鼠免疫低下模型,测定腹腔注射印度墨汁后小鼠网状内皮细胞(RES,单核巨噬细胞)炭粒廓清指数,观察其对小鼠非特异性免疫功能的影响；通过测定正常小鼠血清溶血素水平观察射干提取物对小鼠体液免疫的影响.结果射干提取物可增强小鼠网状内皮细胞的吞噬功能；促进抗体溶血素的产生.结论射干提取物对非特异性免疫功能和特异性免疫功能都有增强的作用.
-
射干提取物抑菌实验研究
采用体外抑菌法和体内抑菌法,对射干提取物进行了实验研究.结果表明体外实验表明射干提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、停乳链球菌、肺炎链球菌有抑制作用,小抑菌浓度分别为2.60 mg提取物/mL、41.63 mg提取物/mL、20.81 mg提取物/mL、2.60 mg提取物/mL和2.60 mg提取物/mL.体内实验表明,射干提取物的低(0.078 g提取物/kg)、中(0.156 g提取物/kg)和高(0.312 g提取物/kg)剂量组有明显降低金黄色葡萄球菌感染小鼠死亡率的作用(P ＜0.05、P＜0.01和P＜0.01).
-
射干提取物在大鼠体内的药动学研究
目的 研究射干提取物中鸢尾苷及鸢尾黄素在大鼠体内的药动学.方法 Wistar大鼠一次性ig给予相当于32倍临床等效剂量即10.8 9/kg射干提取物(每1 g提取物相当于5 g生药量),采用高效液相色谱法对血浆中鸢尾苷和鸢尾黄素进行定量测定,应用DAS软件计算主要药动学参数.结果 鸢尾苷及鸢尾黄素在大鼠体内的药时过程符合二室模型,tmax均为1.5 h,Cmax分别为0.89、3.35 μg/mL,AUC0-t分别为0.983、19.769 mg·L(-1)·h,AUC0-∞分别为1.034、23.927 mg·L-1·h;鸢尾苷及鸢尾黄素的t1/2分别为1.05、8.863 h.结论 鸢尾黄素与鸢尾苷的达峰时间相同,但鸢尾黄素的消除半衰期比鸢尾苷消除半衰期长,说明鸢尾黄素在体内的药效有可能发挥得更持久.
-
射干提取物止咳祛痰药理实验研究
[目的]研究射干提取物对浓氨水引起小鼠咳嗽次数及咳嗽潜伏期的影响、对小鼠腹腔注射酚红后引起气管酚红排泌量的影响.[方法]将小鼠放入加有浓氨水的诱咳引喘仪内,雾化5sec,观察记录小鼠的咳嗽潜伏期和2min内咳嗽次数,小鼠腹腔注射5%酚红溶液,测定30min后小鼠气管酚红的排泌量.[结果]射干提取物0.46 g(提取物)/kg、0.92 g(提取物)/kg、1.84 g(提取物)/kg剂量能明显延长氨水引起的小鼠咳嗽潜伏期、降低2min内小鼠咳嗽次数,明显增加小鼠气管酚红排泌量,与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01,P<0.001).[结论]射干提取物具有止咳祛痰作用.
-
射干提取物制备工艺及其含量测定
目的:探讨射干提取物的佳提取工艺并建立射干提取物的含量测定方法.方法:应用高效液相色谱法对射干2种活性成分射干苷和鸢尾黄素进行了定量分析的方法学考察；以射干苷(tectoridin)和鸢尾黄素(tectorigenin)为指标物,应用L9(34)正交试验优选射干提取物的提取工艺.结果:在选定的色谱条件下2种成分分离良好,在检测浓度范围内线性良好,精密度RSD小于3.124％,稳定性RSD小于4.827％,加样回收大于96％.佳提取工艺为:6倍量80％乙醇,提取3次,每次提取时间1.5h.结论:本研究成功建立了射干中2种有效成分的含量测定方法,并优选出佳提取工艺.
-
射干提取物在大鼠体内分布研究
目的 研究射干提取物在大鼠体内的组织分布特征.方法 射干提取物给大鼠灌药后,以鸢尾黄素为研究指标,采用高效液相色谱法测定其在大鼠心、肝、脾、肺、肾中的含量.结果 鸢尾黄素在大鼠体内各部分的分布顺序为:肝＞肾＞肺＞心＞脾.结论 射干提取物中鸢尾黄素在大鼠体内分布广泛,在肝肾肺组织中药物浓度较高,并且在肺组织中达到平衡后能较长时间保持药物浓度,与射干药材归肺经相符合,提示鸢尾黄素可能是射干用于治疗上呼吸道作用的药效物质之一.
-
浊点萃取结合UPLC-MS/MS法测定气道炎症模型豚鼠灌胃射干提取物后血浆中LTB4的浓度
目的:建立测定气道炎症豚鼠血浆中白三烯B4(LTB4)浓度的方法,考察给予射干提取物后其对豚鼠血浆中LTB4浓度的影响,为阐明射干提取物抗炎止咳的作用机制提供参考.方法:将30只豚鼠随机分为空白组、模型组和射干提取物组,每组10只.除空白组外,其余2组豚鼠采用烟熏+合胞病毒滴鼻法制造气道炎症模型.造模结束后次日,射干提取物组豚鼠灌胃给药(10 mg/kg射干提取物,以野鸢尾黄素计),空白组和模型组豚鼠灌胃等体积生理盐水,每天给药1次,连续给药7 d,末次给药后收集血浆样品.分别考察表面活性剂Triton X-114浓度、盐酸浓度、盐酸加入量、平衡温度和平衡时间对LTB4提取回收率的影响(以44.5 g/L的牛血清白蛋白生理盐水溶液替代空白血浆),确定优浊点萃取工艺进行生物样品处理.然后以吲哚美辛为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定血浆中LTB4浓度.色谱条件:色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18,流动相为0.2％甲酸水-乙腈(40:60,V/V),流速为0.4 mL/min,柱温为40℃,进样量为5μL;MS条件:电喷雾离子源,正离子模式下扫描,LTB4用于定量的离子为[M+H]+质荷比(m/z)335.2194→195.0998,吲哚美辛为[M+H]+m/z 356.0836→312.0842.结果:浊点萃取优条件为Triton X-114浓度5％,加入0.3 mol/L盐酸50μL调至酸性、平衡温度50℃,平衡时间20 min.在该含量测定条件下方法学验证结果均符合相关要求.与空白组比较,模型组豚鼠血浆中LTB4浓度显著升高(P<0.05);与模型组比较,射干提取物组豚鼠血浆中LTB4浓度显著降低(P<0.05).结论:本研究中样品处理方法绿色环保,含量检测方法灵敏度高、准确性好,适用于血浆中LTB4浓度的测定;射干提取物可使气道炎症豚鼠血浆中升高的LTB4浓度得到显著回调.
关键词： 浊点萃取 超高效液相色谱-串联质谱法 射干提取物 白三烯B4 豚鼠 -
射干提取物对慢性咽炎家兔血清中白细胞介素－4和免疫球蛋白E表达的影响
目的：观察射干提取物用于慢性咽炎家兔血清中白细胞介素－4（IL－4）和免疫球蛋白E ( IgE )指标的变化，以进一步探讨其治疗作用机制。方法应用氨水和松节油直接作用于大耳白家兔咽部黏膜制备慢性咽炎病理模型，以射干提取物进行治疗，观察药物对模型动物血清IL－4和IgE表达的影响。结果模型组动物血清中的IL－4和IgE含量显著高于空白组（ P<0．05），经射干提取物治疗后血清中IL－4和IgE水平均较模型组降低。结论射干治疗慢性咽炎药理活性作用可能是通过调节细胞因子的表达而实现的。
-
射干提取物止咳药效动力学研究
目的:探讨三种射干提取物止咳作用的强弱及其药效动力学过程.方法:采用一次性灌胃给药,以浓氨水雾化诱咳的方法,观察记录小鼠的咳嗽潜伏期和2分钟内咳嗽次数,建立相应的时间-效应方程及剂量—效应方程,计算相关药效动力学参数.结果:三种射干提取物在小鼠体内均呈一室模型特征,2号、6号、7号止咳效应半衰期分别为1.314h、2.149 h、0.538 h,效应消除半衰期分别为8.226h、3.971 h、8.026 h,药效作用期分别为5.73h、7.74h、7.38 h,效应达峰时间分别为为1.0h、2.0h、2.0h;2号、6号、7号延长咳嗽潜伏期效应半衰期分别为0.272h、8.427h、0.553h；效应消除半衰期分别为2.579h、8.428h、5.259h；药效作用期分别为4.14h、6.64h、7.29h,效应达峰时间分别为1.0h、1.0h、2.0h;2号、6号、7号延长咳嗽潜伏期低起效剂量分别为24.83、1.02、2.12mg/kg,抑制咳嗽次数的低起效剂量分别为5.06、0.34、0.41mg/kg.结论:三种射干提取物均具有明显的止咳作用,并且起效剂量低、起效迅速、药效作用时间持久.
-
HPLC同时测定射干提取物中的射干苷和鸢尾黄素
目的 建立HPLC法测定射干提取物中射干苷和鸢尾黄素的含量.方法 采用Kromasil C18色谱柱(250 mm ×4.6nm,5μm),以水(磷酸调pH3)-甲醇(45∶55)为流动相,流速0.8 mL·min-1,柱温35℃,检测波长265 nm.结果 射干苷、鸢尾黄素得到有效分离,回归方程分别为:Y射于苷=1.953×105X+ 5.847×103(r=0.9999)；Y鸢尾黄素=2.504×105X+1.887×104(r =0.9999)；线性范围为0.2～10.0 μg·mL-1；平均回收率分别为101.01％±1.02％、99.49％±1.34％；RSD分别为1.01％、1.35％(n=6).结论 所建方法操作简便、准确,重复性好,可用于同时测定射干提取物中的射干苷和鸢尾黄素.
