首页 > 文献资料
-
应用非变性毛细管电泳检测乙肝病毒基因型B和基因型C
目的 建立非变性毛细管电泳分离乙肝病毒特异性巢式PCR产物方法,用于乙肝病毒B基因型和C基因型判断.方法 建立线性聚丙烯-聚乙二胺-TBE非变性毛细管电泳方法,分离母婴阻断失败患儿血清中乙肝病毒基因型特异性巢式PCR的扩增产物,采用表观分子量鉴定B、C基因型特异性和非特异性扩增产物.结果 毛细管电泳条件为30.2cm×50μm毛细管,分离缓冲液为2％(w/v)线性聚丙烯酰胺+0.4％(w/v)聚乙二醇+lxTBE缓冲液(pH8.3).在9kV电压下12分钟内可分离DNA分子量梯度标准品(50 bp至300 bp)及PCR扩增产物,表观分子量与电泳迁移时间的曲线适合度大于0.9999.B型扩增产物表观分子量范围为282bp至285bp,非特异性扩增产物为276bp至280bp.C型为ll9bp至120bp,当前扩增条件下不产生非特异性扩增产物.结论 非变性毛细管电泳能够方便和准确地判断非特异性的B型扩增产物.
-
乙型肝炎病毒基因型和基因变异与重型肝炎有关吗
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是一个遗传容量很小的DNA病毒.尽管如此,HBV的高复制活性以及复制过程中的逆转录机制都使HBV比其他DNA病毒更容易发生变异.在漫长的进化过程中,HBV形成了相对稳定的野毒株,在全球不同地区表现为不同的基因型.随着分子生物学的进步,乙肝病毒基因型和变异对肝炎患者临床结局的影响也有较多的研究报道.这些研究为阐明HBV的致病机制进行了有益的探索,同时也为我们的临床实践提供了许多参考数据.HBV相关的重型肝炎是临床实践实践过程中遇到的病程凶险、死亡率高的疾病.本文主要就HBV基因型和基因变异与乙型肝炎重型化研究的进展进行探讨.
-
提高乙型肝炎病毒HBsAg阳性母亲所生新生儿HBIG及乙肝疫苗接种应答水平的研究
目的 了解广州市乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性母亲所生新生儿乙肝免疫球蛋白(HBIG)及疫苗接种的应答水平及乙肝病毒变异情况.方法 从广州市黄埔区、荔湾区、从化市、番禺区、天河区、越秀区6个区助产医院中,选取HBsAg阳性产妇及其所分娩的接种乙肝免疫球蛋白及疫苗的新生儿,出生后接种HBIG及乙肝疫苗(3针),检测HBsAg、抗乙型肝炎表面抗原抗体(抗-HBs)及乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA).结果 共调查新生儿11 831名,HBsAg筛查率为100.00％,其中HBsAg阳性10名,抗-HBs阳性11 239名,HBsAg携带率0.08％(10/11 831);对HBsAg阴性但乙肝HBV DNA阳性者进行S基因测序,流行的乙肝病毒基因型有2种,其中B基因型70.00％、C基因型30.00％,不同毒株间核苷酸同源性为93.15％ ～99.91％;抗-HBs无(弱)应答者采取复种免疫后,抗-HBs阳转率达90.00％ ～ 92.00％,GMT(几何平均滴度)在260.02～304.37 mIU/ml间.结论 广州市HBsAg阳性母亲所生新生儿HBIG及疫苗接种效果明显;S基因序列和各参考株高度同源,未发现其他基因型及有生物学意义的变异;对无(弱)应答者采取复种免疫,抗-HBs阳转率显著提高.
-
儿童慢性乙肝肝组织病理与相关标志物的研究
目的 分析乙肝病毒核内共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)、肝纤维化血清标志物、乙肝病毒基因型与肝脏纤维化和炎症活动度的相关性,以了解其在乙肝诊断中的价值,指导治疗和预后.方法 2008年4月至2011年8月于甘肃省人民医院儿科和兰州大学第一医院感染科门诊就诊和住院的乙肝及HBV携带患儿为慢性乙肝组和HBV携带组,选择同期健康查体儿童为对照组.检测慢性乙肝组、HBV携带组和对照组血清HA、LN、PCⅢ和CⅣ.依据病情严重程度,慢性乙肝组进一步分为轻度、中度和重度亚组;慢性乙肝组和HBV携带组检测血清HBV cccDNA和HBV基因型;分析HBV cccDNA、肝纤维化血清标志物、HBV基因型与肝脏纤维化和炎症活动度的相关性.结果 46例患儿进入分析,男34例,女12例,年龄1～16岁,平均年龄(11.8±3.7)岁.HBV携带组20例,慢性乙肝组26例(轻度13例、中度8例、重度5例),对照组20例.①随乙肝临床分度加重,血清HA、LN、PCⅢ和CⅣ呈升高趋势,以重度乙肝亚组上升为明显;②随肝组织纤维化程度与炎症活动度的增加,血清HA、LN、PCⅢ和CⅣ呈升高趋势;③血清HBV cccDNA阳性组与阴性组在肝组织炎症活动度
关键词： HBV cccDNA 肝纤维化指标 乙肝病毒基因型 肝组织病理 -
乙肝病毒基因分型与慢性乙型肝炎患者临床和病理的相关性研究
目的:了解本地区慢性乙型肝炎(CHB)患者乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布的特点,探讨基因型与临床及病理之间的关系.方法:采用荧光定量PCR方法检测120例CHB患者的HBV基因型,同时检测血清HBV DNA、HBV-M、肝功能等,并进行肝组织病理检查.结果:120例CHB患者B基因型43例,占35.83%,C基因型77例,占64.17%;在年龄、性别、肝功能及病情程度之间,B、C基因型差异均无显著性意义(P＞0.05);C基因型患者的HBV DNA水平、HBeAg阳性率均显著高于B基因型(P＜0.05),其肝组织炎症评分和纤维化评分也均明显高于B基因型(P＜0.05).结论:本地区CHB患者HBV基因型以C型为主,C型血清HBV DNA水平及HBeAg阳性率高于B型,C型引起的肝组织病变较B型严重.HBV基因分型对判断肝脏病变的严重程度和指导临床抗病毒治疗具有重要意义.
-
广东省潮州地区献血者乙肝感染血清学和分子生物学特征
目的 了解潮州市无偿献血者乙肝病毒(HBV)感染情况,分析其血清学和分子生物学特征. 方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)对2013年1月至2016年12月35 184例无偿献血者的血液进行HBsAg筛查.采用荧光定量PCR、PCR-反向斑点杂交法(PCR-RDB)分析部分HBsAg阳性样本的病毒载量、HBV基因型和耐药突变基因. 结果 35 184份样本共筛查出HBsAg阳性样本824份,阳性率为2.34％.男性献血者的阳性率(2.56％)明显高于女性(1.82％),两者之间的差异有统计学意义(x2=17.16,P＜0.01).在73份乙肝基因分型的结果中,B基因型占87.7％(64/73),C基因型占8.2％(6/73),B+C混合基因型占4.1％(3/73),未检出D基因型,不同HBV亚型DNA表达量无明显差异(P＞0.05).在73份样本中,仅检测出HBV拉米夫定耐药相关突变4例,未检出任何HBV阿德福韦耐药突变基因. 结论 潮州市献血者HBV感染阳性率呈平稳趋势.献血者中存在少量乙肝耐药基因突变,我们应予以重视和进一步研究.
