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标准抗结核化疗方案配合茜草素治疗耐多药肺结核疗效及安全性评价
目的 评估标准抗结核化疗方案配合茜草素治疗耐多药肺结核的疗效.方法 选择2016年12月—2017年11月期间收治的122例多重耐药结核患者为对象,随机分组,对照组标准抗结核化疗方案治疗,试验组加用茜草素治疗,比较两组临床疗效.结果 结果显示,试验组总有效率为90.16％,空洞总吸收率为65.57％,显著高于对照组80.32％、49.18％,差异有统计学意义(χ2=9.641,10.557,P<0.05).试验组药物不良反应发生率为14.75％,显著低于对照组24.59％(χ2=8.001,P<0.05).结论 标准抗结核化疗方案配合茜草素治疗耐多药肺结核的治疗效果好且安全性高.
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凉血活血胶囊中茜草素和芍药苷的含量测定
目的 建立RP-HPLC法测定凉血活血胶囊中茜草素、芍药苷的含量.方法 采用反相高效液相法.色谱条件:茜草素:Kromasil 100-5C18色谱柱;流动相:甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液(25:50:25),检测波长为250nm,流速1.0mL/min.芍药苷:Kmmasil 100-5C18色谱柱;流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液(14:86),检测波长为230nm,流速:1.0mL/min.结果 茜草素、芍药苷在上述色谱条件下,分离效果理想.茜草素在0.084～1.05μg范围内、芍药苷在0.28～7.0μg范围内线性关系良好.结论 方法简便、准确,重现性好,可作为凉血活血胶囊的含量测定方法.
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超声辅助离子液体-反相液相色谱法同时测定茜草中茜草素和大叶茜草素的含量
建立以4种离子液体为萃取剂,结合超声辅助萃取,利用高效液相色谱法来测定茜草中茜草素与大叶茜草素素含量的方法.采用Purospher star RP-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以B为甲醇、C为0.4％乙酸-水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.85 mL·min-1,紫外检测波长为250 nm,柱温为室温.结果显示,茜草素和大叶茜草素的佳萃取条件均为0.6 moL·L-1的[HMIM] PF6甲醇溶液作为萃取剂,1∶80(g·mL-1)作为佳固液比;茜草素进样量在0.01～0.04 μg呈良好的线性关系(r =0.999 9),平均回收率为97.12％;大叶茜草素进样量在0.41～1.35 μg呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为98.10％.该实验采取环境友好型试剂作为萃取剂,提高了萃取效率,避免了有机溶剂对环境的污染,减少了对人体的伤害,操作简单,重复性好,对中药活性成分提取研究方法的创新有重要参考意义.
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茜草素联合标准抗结核化疗方案治疗耐多药肺结核的临床疗效和安全性
目的：评估茜草素治疗耐多药肺结核（MDR－PTB）感染患者的临床疗效和不良反应。方法选择2013年6月至2015年6月杭州师范大学附属医院确诊的 MDR－PTB 患者200例，所有患者随机分为茜草素联合治疗组（观察组）和单纯抗结核治疗组（对照组），各100例。对照组采用标准抗结核化疗方案治疗，观察组在对照组治疗方案上联合茜草素治疗，两组疗程均为8个月。采用χ2检验比较两组患者（包括不同中医证候分型患者的观察组和对照组）的临床疗效、痰培养结核分枝杆菌转阴率、肺部空洞及病灶吸收情况和不良反应。结果观察组临床显效39例，有效51例，无效10例，总有效率为90％（90／100）；对照组临床显效22例，有效35例，无效43例，总有效率为57％（57／100），两组比较差异有统计学意义（χ2＝28．262，P ＜0．01）。热毒郁肺证患者和气滞血瘀证患者中，观察组临床疗效的总有效率均高于对照组（78．78％∶63．33％，χ2＝7．187，P ＜0．05；95．74％∶42．31％，χ2＝73．997，P ＜0．01），而气血不足证患者中两组临床疗效的总有效率比较差异无统计学意义（95．00％∶88．89％，χ2＝5．025，P ＞0．05）。治疗8个月后观察组痰菌转阴率（76％）稍高于对照组痰菌转阴率（55％），但两组比较差异无统计学意义（χ2＝2．190，P ＞0．05）。观察组空洞及病灶吸收率为91％，明显高于对照组（54％），两组比较差异有统计学意义（χ2＝38．294，P ＜0．01）。观察组不良反应发生率为27％，显著低于对照组（66％，χ2＝30．570，P ＜0．01）。结论茜草素联合抗结核化疗药物可提高 MDR－PTB 感染患者的临床疗效，减少化疗药物不良反应。
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茜草素联合抗结核西药对耐多药结核分枝杆菌体外抗菌活性研究
目的：评价茜草素对耐多药结核分枝杆菌的体外抗菌活性作用。方法采用人型结核分枝杆菌标准菌株（H37RV）、耐多药结核菌株（MDR‐TB）分别接种于含有不同浓度茜草素单用、联合抗结核西药、对照组的结核菌培养基，观察结核分枝杆菌的生长情况，评价茜草素体外抑菌效果。结果模型组菌落生长情况正常，结核分枝杆菌（H37RV）培养终止期茜草素（80μg／ml）单用组、利福平（5 mg／ml）组未见菌落生长；茜草素（80μg／ml）单用组培养基恢复培养45 d可见结核菌生长；MDR‐TB培养30 d终止期茜草素（80μg／ml）单用组可见菌落生长；茜草素（80μg／ml）联合组未见菌落生长；茜草素（80μg／ml）联合组恢复培养45 d仍未见菌落生长。结论茜草素在体外对结核分枝杆菌标准菌株（H37RV）表现为抑杀作用，联合抗结核西药对MDR‐TB表现为协同作用，可作为治疗耐药株感染的候选药物进一步研究。
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鼻渊片提取工艺研究
目的 确定鼻渊片提取及干燥工艺参数.方法 以挥发油量、茜草素提取率为指标确定工艺.结果 茜草用70% 乙醇渗漉提取,渗漉液的量为药材量8 倍时,茜草素提取率可达83%.挥发油提取工艺是加10 倍水提取4h.结论 提取工艺能够充分提出有效成分,且工艺稳定.
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从茜草素的超分子印迹作用探讨中药归经体外研究方法
目的 基于超分子印迹模板自主识别理论,以茜草素为印迹模板功能单体进行猪不同组织的体外亲和色谱实验,验证茜草素归肝经机制,为创立中药归经体外研究方法奠定基础.方法 将猪的肝、肺、舌、腹部肌肉、腿部肌肉等组织作固定相制成色谱柱,以PBS为流动相,进行归肝经的茜草素与归脾经的白砂糖(阴性对照)体外亲和色谱实验,采用HPLC测定各洗脱液中茜草素的量,UV法测定阴性对照组各洗脱液中葡萄糖的量,采用总量统计矩分析法获得各亲和色谱参数,获得色谱方程.结果 茜草素在肝、肺、舌、腹部肌肉、腿部肌肉的色谱参数为C0: 0.2509～4.813mg/mL;AUC: 2.509～48.13 mg;VR:20.42～30.77mL:σ2: 282.6～532.7mL2;H: 14.13～26.63mL;n:1.212～1.777;S:0.7590～1.000.肝脏对茜草素的吸附性强,腹部肌肉、腿部肌肉、肺、舌对茜草素的吸附作用依次减弱.阴性对照组中,肝脏对葡萄糖的吸附性并非强.结论 猪的肝器官对茜草素的吸附大,两者存在超分子印迹模板亲合作用,这与茜草归肝经理论相吻合,由此可建立中药归经的体外初步研究方法.
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HPLC法测定蒙药乌兰三味汤散剂中茜草素含量
目的:建立本品含量测定方法.方法:色谱柱C18(200×4.6mm,5μm)；流动相甲醇-水-四氢呋喃(155∶45∶1.5),检测波长250nm;流速1mL·min -1.结果:茜草素在0.008～0.44μg之间成线性关系(r=0.999),回收率为102.6％；不同批次乌兰三味汤散剂中茜草素平均含量为0.82mg·g-1.结论:采用本法测定茜草素含量,操作简便,准确可靠,可用于该药品的质量控制指标.
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茜草素联合标准抗结核化疗方案对耐多药肺结核患者免疫功能的影响
目的 探讨茜草素联合标准抗结核化疗方案对耐多药肺结核患者免疫功能的影响.方法 将200例耐多药肺结核患者随机分为单纯抗结核化疗组(对照组)和茜草素联合抗结核化疗组(观察组),每组各100例.对照组采用中国全球基金耐多药结核病项目标准方案治疗,观察组在对照组基础上联合茜草素治疗.另将医院健康体检人员30例设为正常组.分析二组患者治疗前和治疗8个月后免疫功能变化.结果 与正常组比较,治疗前两组IgA、IgE含量和CD19+表达升高(P<0.05),补体C3、C4含量和CD3+、CD4+、CD8+表达降低(P<0.05).治疗后观察组IgA、IgE含量下降,C3和C4水平增高(P>0.05);CD3+、CD4+、CD8+表达增高,CD19+表达下降(P>0.05);对照组IgA、IgE含量仍增高,C3和C4水平仍降低(P<0.05);CD3+、CD4+和CD8+表达仍降低,CD19+表达仍增高(P<0.05).结论 茜草素联合标准抗结核化疗方案可改善患者免疫功能,具临床应用价值.
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茜草素激活Wistar大鼠肾叶间动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道
目的：研究茜草素对大电导钙激活钾通道( large con-ductance calcium activated potassium channels,BKCa )的调节作用。方法在快速分离的Wistar大鼠肾叶间动脉平滑肌细胞上,应用膜片钳技术研究茜草素对BKCa介导的外向电流的调节情况。结果 BKCa特异性抑制剂伊比利亚毒素(ibTX)抑制茜草素的增强作用(P<0．01)；去除细胞外液中的钙离子,L-钙通道抑制剂尼莫地平( nimodipine)、钙离子螯合剂BAPTA-AM和ryanodine均能抑制茜草素对肾叶间动脉平滑肌细胞外向电流的增强作用( P<0．05)。结论茜草素通过激活L-钙通道,促进钙离子由细胞膜外进入胞质,内流的钙离子进一步激活ryanodine受体,引起胞质中钙离子浓度快速升高,激活平滑肌细胞膜BKCa通道。
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茜草素抗结核分枝杆菌作用的实验研究
目的：：研究茜草素对结核分枝杆菌( Mycobaeterium tuberculosis, MTB)抑菌作用,为进一步开发中药新药奠定基础。方法：用敏感或耐一种或以上结核药的结核菌株,用对倍稀释法制备成不同浓度的含茜草素的药物培养基,终测定药物的低抑菌浓度(MIC)及低杀菌浓度(MBC)。结果：茜草素对全敏菌株的MIC是160μg/mL, MBC是320μg/mL,对耐药菌株的MIC是160或320μg/mL,MBC是320或640μg/mL。结论：茜草素对结核分枝杆菌有一定的抑菌活性,其中对全敏菌株可能有更好的抑菌效果。
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茜草素介导BKCa通道beta亚基功能舒张肾叶间动脉降低SHR收缩压
目的 研究茜草素对自发性高血压大鼠(SHR)肾叶间动脉平滑肌细胞BKCa通道功能和表达的变化.方法 应用尾动脉测压仪、压力机动图技术、膜片钳技术和Western Blot技术分别观察茜草素干预前后SHR收缩压,肾叶间动脉血管直径,BKCa通道电流和beta亚基表达的变化.结果 (1)茜草素干预后,SHR收缩压较干预前降低(P＜ 0.01);(2) ibTX抑制茜草素对SHR肾叶间动脉血管段的舒张作用(P＜0.01);(3)茜草素增强SHR肾叶间动脉平滑肌细胞BKCa通道介导的电流(P＜0.05);(4)茜草素干预第21天,BKCa通道beta亚基表达上调(P＜0.01).结论 茜草素通过调节BKCa通道beta亚基功能,引起平滑肌细胞超极化,肾叶间动脉舒张和SHR收缩压降低.
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茜草素增强Wistar大鼠平滑肌细胞BKCa介导的外向电流舒张肾叶间动脉
目的:研究茜草素对Wistar大鼠肾叶间动脉及其平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(Large Conductance Calcium Activated Potassium Channels;BKCa)的影响.方法:压力型小动脉测量仪用于观察给予茜草素前后肾叶间动脉血管直径的变化;全细胞膜片钳技术用于研究茜草素对离体的Wistar大鼠肾叶间动脉平滑肌细胞BKCa介导的外向电流的调节作用.结果:(1)茜草素(10-7～3×10-5 mol/L)舒张肾叶间动脉(P＜0.01);(2)茜草素(104～3×10-5 mol/L)增强Wistar大鼠肾叶间动脉平滑肌细胞外向电流(60 mV)呈浓度依赖性(P＜0.05);(3)在0 mV～60 mV,茜草素(10-5mol/L)增强Wistar大鼠肾叶间动脉平滑肌细胞外向电流呈电压依赖性(P＜0.05);(4) TEA(10-4 mol/L)阻断茜草素(10-5 mol/L)增强的肾叶间动脉平滑肌细胞外向电流(60 mV) (P＜0.01);(5) 10-7mol/L的BKCa阻断剂伊比利亚毒素(ibTX)阻断茜草素(10-5 mol/L)对肾叶间动脉平滑肌细胞外向电流(60 mV)的增强作用(P＜0.01).结论:茜草素通过激活更多BKCa开放促进钾离子外流,引起Wistar大鼠肾叶间动脉平滑肌细胞超极化,舒张肾叶间动脉血管.
