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MicroRNA-145在急性髓系白血病患者中的表达及意义
目的：探讨MicroRNA‐145（miR‐145）在急性髓系白血病患者骨髓细胞中的表达情况，并分析其临床意义。方法收集急性髓系白血病患者骨髓标本70例，其中初治组46例、缓解组24例，非血液肿瘤性疾病14例作为对照组。通过实时荧光定量PCR方法检测miR‐145的相对表达水平。结果 miR‐145在初治急性髓系白血病骨髓中表达水平明显低于缓解组及对照组（P＜0．01）；其中9例经化疗后缓解的急性髓系白血病患者骨髓miR‐145表达水平较治疗前显著升高，差异有统计学意义（P＜0．05）；且miR‐145表达水平与初诊时原始细胞百分数及外周血白细胞数均无相关性（P＝0．456、0．394）。结论 miR‐145在急性髓系白血病患者表达下调，提示miR‐145的表达与白血病的发生、发展存在显著的关系。
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miR-145下调c-Myc基因抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖
目的:探讨人乳腺癌细胞MCF-7中miR-145是否通过调控c-Myc参与肿瘤细胞的生长.方法:化学合成miR-145-3p和miR-145-5p并分别转染MCF-7细胞;CCK-8法检测转染后24、48、72 h的细胞增殖情况;RT-PCR检测转染72 h后MCF-7细胞中c-Myc mRNA表达量的变化.结果:与阴性对照组和空白组相比,CCK-8结果显示5p组细胞增殖抑制显著(P<0.05),而3p组抑制效果不明显((P>0.05));RT-PCR结果显示,5p组和3p组细胞中c-Myc mRNA的表达量均下调,且5p组细胞的下调更显著(P<0.05).结论:乳腺组织中miR-145负调控c-Myc的表达,可能参与人乳腺癌的发生过程.
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卵巢癌患者血清肿瘤干细胞标志物CD133和miR-145的临床价值
目的 观察卵巢癌患者血清CD133和miR-145的表达及其对预后的影响.方法 选择2010年1月至2014年6月在同济大学医学院、上海市第八人民医院和抚顺中心医院手术的卵巢癌患者84例为卵巢癌组;良性肿瘤手术的患者30例为对照组.用qRT-PCP的方法测定血清CD133和miR-145相对表达量,分析CD133和miR-145表达量与年龄、肿瘤直径、病理类型、分化程度、CA125水平和是否转移分期的关系.结果 卵巢癌患者的血清CD133相对表达明显高于对照组(t=5.34,P<0.01),治疗后明显降低(t=8.25,P<0.01);而miR-145相对表达量明显低于对照组(t=5.06,P<0.01),治疗后明显升高(t=10.96,P<0.01).卵巢癌患者血清CD133和miR-145表达量与年龄、肿瘤直径和病理类型无明显的相关性(t/F值为0.03~0.93,均P>0.05),血清CD133和miR-145表达量与肿瘤分化程度、CA125水平、淋巴转移和FIGO分期呈明显的相关性(t/F值为2.01~28.96,均P<0.05).术后随访发现CD133高表达组的1年复发率为76.79%,明显高于低表达组的42.86%(χ2=8.06,P<0.05).miR-145高表达组的1年复发率为43.59%,明显低于低表达组的84.44%(χ2=13.67,P<0.05).结论 CD133在卵巢癌患者的血清呈高表达,而miR-145呈低表达,两者参与了卵巢癌的发生发展过程,两者联合检测对于诊断和评估预后具有重要的临床价值.
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miR-145在转染的HeLa细胞中的表达及其对CDK6的靶向抑制
目的 构建miR-145高效表达载体,研究其对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响.方法 人工合成miR-145基因序列,构建真核重组质粒pcDNATM6.2-GW-miR-145,并转染-HeLa细胞,将HeLa细胞分为转染miR-145组、空载体组和未经处理的HeLa细胞组.采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和Western blot法分别检测miR-145及其下游靶基因细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)在各组中的表达,采用MTT法检测miR-145对HeLa细胞增殖活性的影响.结果 经测序和qRT-PCR分析鉴定证明重组质粒pcDNATM6.2-GW-miR-145构建成功,qRT-PCR和Western blot结果显示转染miR-145组的HeLa细胞中CDK6的表达水平明显降低,MTT试验结果显示转染miR-145的HeLa细胞其增殖活性明显受到抑制(P＜0.05).结论 成功构建miR-145真核表达载体pcDNATM6.2-GW-miR-145,miR-145能够抑制宫颈癌HeLa细胞中CDK6的表达.
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miR-145在非小细胞肺癌中的表达
目的:检测非小细胞肺癌患者癌血清和组织中miR-145的表达量与临床病理参数的关系,探讨其作为非小细胞肺癌分子标志物的可能性.方法:采用实时荧光定量PCR检测非小细胞肺癌及健康血清,以及非小细胞肺癌组织和对应癌旁组织中miR-145的表达量,分析miR-145的表达与非小细胞肺癌临床病理参数的关系.采用ROC曲线分析miR-145对非小细胞肺癌的诊断价值.结果:miR-145在癌组织中的表达量明显低于癌旁组织(P<0.05);miR-145在患者血清中的表达显著低于对照组(P<0.05).miR-145的ROC曲线下面积(AUC)为0.875,灵敏度为88.5%,特异度为84.8%.结论:非小细胞肺癌患者癌组织和血清miR-145低表达,miR-145有望作为NSCLC早期的诊断指标.
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血清miR-141和miR-145联合检测非小细胞肺癌
目的:探讨miR-141、miR-145作为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)生物标志物的诊断价值.方法:采用实时荧光定量PCR技术检测80例正常人和80例非小细胞肺癌患者血清中miR-141、miR-145的表达量,分析miR-141、miR-145的表达与非小细胞肺癌临床病理参数的关系,并绘制ROC曲线分析其诊断非小细胞肺癌的价值.结果:非小细胞肺癌患者miR-141、miR-145表达与对照组比较有统计学差异(P＜0.05),二者联合的诊断效能分别为:灵敏度92％ (95％ CI:0.86 ～0.96),特异度83％,(95％CI:0.73～0.88),阳性预测值(PPV) 86％,阴性预测值(NPV) 92％.结论:血清中miR-141、miR-145测定的诊断性能较高,可以作为非小细胞肺癌的潜在的诊断标志物.
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miR-145在浆液性卵巢癌中的表达及对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响
目的:检测miR-145在浆液性卵巢癌组织及卵巢癌SKOV3细胞中的表达情况,探讨其对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响及其可能的分子机制.方法:利用实时定量PCR技术检测43组浆液性卵巢癌患者癌及癌旁组织中miR-145的表达情况;利用实时定量PCR技术检测正常卵巢浆液腺细胞及SKOV3细胞中miR-145的表达情况;合成miR-145的模拟物miR-145 agomir,将该模拟物及对照分别转染入SKOV3细胞中,应用MTT法检测细胞增殖情况,明确miR-145对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响.结果:实时定量PCR结果显示,与癌旁组织相比,miR-145在浆液性卵巢癌患者癌组织中表达含量降低;与正常细胞相比,miR-145在SKOV3细胞中表达含量降低;MTT结果表明转染了miR-145 angomir的SKOV3细胞增殖受到明显的 抑制.结论:miR-145在浆液性卵巢癌组织及SKOV3细胞中均表达含量降低,miR-145可以抑制卵巢癌细胞增殖,miR-145与卵巢癌患者预后密切相关,其含量增高提示好的预后,有望成为新的生物学标志物用于卵巢癌早期诊断及判断预后.
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实时荧光定量PCR检测结直肠癌与癌旁正常组织中miR－145的表达
目的：比较结直肠癌组织与正常癌旁组织中microRNA－145（miR－145）的表达变化。方法：收集30例手术切除的结直肠癌组织和远离癌组织的正常结直肠黏膜组织。提取总RNA，microRNA的引物反转录后，用miR－145特异性引物做荧光定量PCR反应。结果：荧光定量PCR显示结直肠癌组织miR－145的表达量明显降低，癌组织中的表达量为正常癌旁组织的0．353倍，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：结直肠癌组织中miR－145的表达低于正常组织，在结直肠癌中发挥抑癌基因的作用。
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上调MiR-145的表达对口腔癌细胞CAL27生物学特性的影响
目的 探讨MiR-145表达升高对口腔鳞状细胞癌细胞CAL27生物学特性的影响.方法 通过实时定量PCR检测MiR-145在正常口腔黏膜细胞hNOK和口腔癌细胞CAL27的表达水平.通过MiR-145对CAL27的细胞转染,CAL27集落形成实验、细胞周期与凋亡实验,观察CAL27细胞生物学特性的改变.结果 与正常口腔黏膜细胞hNOK相比,口腔癌细胞CAL27中的MiR-145表达呈下调状态.通过恢复口腔癌细胞中MiR-145的表达显著抑制了CAL27细胞集落的形成,并诱导G1期阻滞和细胞凋亡.结论 MiR-145可发挥口腔细胞癌的抑制功能,抑制口腔癌细胞CAL27细胞增殖特性,诱导其凋亡过程.在其诊断与治疗应用中,恢复MiR-145表达可能是一种合理的方法.
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miR-145对口腔癌细胞TCA8113生物学特性的影响
目的 探讨miR-145对口腔癌细胞增殖、迁移、侵袭生物学特性的影响.方法 运用脂质体介导的转染方法将miR-145转染入口腔癌细胞TCA8113,通过细胞增殖实验检测转染后口腔癌细胞TCA8113增殖生物学特性的改变,通过细胞迁移实验、细胞侵袭实验,检测口腔癌细胞TCA8113细胞迁移、侵袭生物学特性的变化.结果 miR-145转染组细胞增殖活性明显低于对照组(P<0.05),细胞迁移、侵袭活性明显低于对照组(P<0.05).结论 miR-145的表达参与口腔细胞癌的发生及发展过程,miR-145的高表达可对口腔癌细胞TCA8113发挥负性调控作用.
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miR-143和miR-145与肿瘤的研究进展
microRNA(miRNA)是一类长18～25个核苷酸的进化保守的内源性非编码单链RNA分子,它们基于与mRNA的序列互补,可以降解靶mRNA和抑制蛋白质翻译.大量研究显示,miRNA在细胞增殖、分化、发育和凋亡等方面起着重要的作用.其中miR-143和miR-145在多种肿瘤中表达降低,包括结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌、胃癌、肺癌、食管癌、宫颈癌、胰腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、骨肉瘤、脂肪肉瘤、尤文氏肉瘤和白血病等,通过与多个靶基因KRAS、c-Myc和ERK5等作用抑制细胞增殖、侵袭和转移,促进细胞凋亡,增加抗肿瘤药物的敏感性,发挥类似于抑癌基因的作用.由此,抗肿瘤药物联合应用miR-143和/或miR-145有望成为新的肿瘤化疗方案.
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miR-145和miR-497在宫颈癌SiHa细胞中的表达及对增殖的影响
目的 研究miR-145和miR-497在宫颈癌SiHa细胞的表达及对增殖的影响.方法 以宫颈癌SiHa细胞为研究对象,转染pre-miR-145和pre-miR-497,采用实时荧光定量PCR和MTT检测miR-145和miR-497在宫颈癌SiHa细胞中的表达及对增殖的影响.结果 采用实时荧光定量PCR检测miR-145和miR-497在宫颈癌SiHa细胞中的表达,结果显示,实验组中miR-145和miR-497的表达量显著高于blank组(P =0.001),MTT结果显示转染miR-145和miR-497的SiHa细胞其增殖活性明显受到抑制(P＜0.05).结论 miR-145和miR-497能够显著抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖.
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miR-145在甲状腺乳头状癌中的表达及功能研究
目的 探讨微小RNA (microRNA)-145 (miR-145)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达,并对miR-145在甲状腺癌(thyroid cancer,TC)细胞中的功能进行研究.方法 收集43例PTC组织和癌旁组织,RT-PCR检测癌组织和癌旁组织中miR-145表达量;采用miR-145类似物转染TPC-1细胞株上调miR-145表达,采用Brdu-ELISA法检测TPC-1细胞增殖,流式细胞仪检测TPC-1细胞凋亡和细胞周期.结果 RT-PCR检测结果显示,PTC组织中miR-145相对表达量0.369±0.082显著低于癌旁组织1.029±0.365,差异有统计学意义(t=3.129,P=0.000);大肿瘤直径≥1 cm患者miR-145相对表达量显著低于大肿瘤直径＜1 cm患者,多发性肿瘤患者的miR-145相对表达量显著低于单发性肿瘤患者,差异均具有统计学意义(P均＜0.05);转染miR-145类似物上调miR-145表达,结果发现与阴性对照相比,PTC细胞TPC-1增殖受到了明显的抑制,差异有统计学意义(P＜0.05);此外,上调miR-145表达可将PTC细胞TPC-1阻滞在G2/M期;PTC细胞TPC-1凋亡率显著增加(P＜0.05).结论 PTC组织中miR-145表达显著降低,且与临床病理特征有关,上调miR-145表达能抑制PTC细胞增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡,miR-145可能作为抑癌基因在PTC的发生和发展中扮演着重要的角色.
