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三种实时荧光RT-PCR试剂在检测甲型H1N1流感病毒中的应用
[目的]结合WHO公布的甲型H1N1流感病毒的检测引物和探针,探索合适的实时荧光RT-PCR试剂应用于国境口岸甲型H1N1流感病毒疑似标本的检测.[方法]通过对连续梯度稀释阳性对照品进行检测,从而分析AB AgPath-ID、Qiagen QuantiTect和Takara One Step PrimeScript 3种常用实时荧光RT-PcR试剂的灵敏度、信号强度、反应效率等因素.[结果]3种试剂的检测下限均为1:1000倍稀释阳性对照品;AB AgPath-ID、Qiagen QuantiTect和Takara One Step PrimeScript检测的线性斜率分别为-5.517、5.214和-4.600;信号强度上Qiagen QuantiTect相对于其他2种明显偏弱.[结论]为国境口岸输入性甲型H1N1流感病例的检测和监控提供了有力的技术保障.
关键词： 实时荧光RT-PCR 甲型H1N1流感病毒 灵敏度 斜率 阈值循环 -
超声图像熵特性的肌肉疲劳进程评估
肌肉疲劳是一种由运动引起的肌肉大随意收缩力减小的现象,处理不当,可能会产生严重的运动损伤.本研究利用自行设计的肌肉组织超声图像检测系统,以超声图像熵表征肌肉超声图像纹理灰度分布的空间特征,探讨肌肉组织疲劳过程中其超声图像熵的演变规律.采集10名受试者在不同负荷(20％ MVC、30％ MVC、40％MVC、50％ MVC)时肱二头肌的超声图像,分别就每一负荷下图像熵随时间的变化进行直线拟合,并对其斜率进行随机区组方差分析.结果表明,不同的受试者之间其肌肉疲劳图像熵随时间变化的斜率差异显著(P=0.000 0);同一受试者不同负荷的超声图像熵随疲劳时间变化斜率也存在显著差异(P =0.040 0).但是,同一受试者在不同负荷时超声图像熵随时间变化的拟合斜率的差异,远小于不同受试者在同一负荷水平拟合斜率值间的差异,提示个人的肌肉特性起到主要的作用.所进行的研究为肌肉疲劳进程的量化评估提供了依据.
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心肌细胞钙离子荧光强度数据的数值处理方法比较
为比较多种用于减少非周期生理信号序列中的随机误差的线性叠加法,分析心房肌细胞的钙离子荧光强度满足的分布函数,提取特征参数(斜率和时间常数),对6个豚鼠心房肌细胞,建立3种不同浓度的CGRP组和空白对照组,用共聚焦显微镜记录下24组心房肌细胞的钙离子荧光强度数据;对这些数据进行校准、叠加、非线性拟合和提取特征参数.叠加方法包括等权平均叠加、主分量叠加、奇异值分解和大似然叠加.选择Gamma分布函数作为拟合函数,使用小二乘法进行拟合,并从Gamma函数计算特征参数.结果:①给出4种叠加方法的加权系数,4种线性叠加法的加权系数比较接近,特别是主分量法、奇异值分解法和大似然法的加权系数几乎一样.对于主分量法,6个细胞的加权系数分别是0.162、0.171、0.167、0.162、0.170和0.168.②叠加后的荧光强度特征更加明显.③给出特征参数(斜率和时间常数).用主分量叠加法得到的3种不同浓度水平的CGRP组和空白对照组的斜率分别是1 277、1 326、2 039和818,时间常数分别是0.33、0.29、0.19和0.27.结果提示:对于只具有一个主要成分的实验数据,推荐使用主分量叠加法.这种方法比较简单,用它可以得到很好的叠加结果,拟合出很好的分布函数并提取出特征参数.
关键词： 线性叠加法 心房肌细胞的钙离子荧光强度 Gamma分布函数 斜率 时间常数 -
薄层扫描中峰宽和斜率对含量测定结果的影响
目的:观察薄层扫描法中不同峰宽和斜率值对扫描结果的影响.方法:依次改变峰宽和斜率值对斑点进行扫描,比较含量测定结果.结果:峰宽和斜率值对含量测定影响较大,佳峰宽-斜率组合为(1.30,0.75),此时方程r值为1.000,测得值为理论值的99.27%.结论:薄层扫描法参数中应注明峰宽和斜率值.
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实时定量PCR检测BCR-ABL(P210)转录本水平室内长期质控体系的建立及应用
目的 制备BCR-ABL(P210)实时定量PCR(RQ-PCR)检测的室内质控物,建立RQ-PCR检测BCR-ABL(P210)转录本水平的室内质控方法.方法 取K562细胞和HL-60细胞,制备RQ-PCR检测BCR-ABL(P210)转录本水平的高、低浓度质控物,2013年8月至2015年10月用RQ-PCR法与临床标本同步检测BCR-ABL (P210) 184次,按试剂批号(批号20130303、20131212、20140411和20150327分别简称为R1、R2、R3、R4)统计分析标准曲线斜率、截距及相关系数,并按试剂批号和质控物批号(批号20130725、20140611分别简称为Q1、Q2)统计分析高、低浓度质控物检测结果,对斜率、截距及质控物检测结果采取Levey-Jennings质控图结合Westgard多规则质控方法进行质控判断.结果 ①标准曲线斜率、截距:R1检测53次,斜率、截距均未失控;R2检测37次,斜率失控6次,且第2～8次在x-s限值下侧,第12～37次在-i值上侧,截距失控9次,且第1～8次在-x+s限值上侧,第12～37次出现在-x值下侧;R3检测80次和R4检测14次,斜率、截距均未失控.②质控物结果:Q1批号质控物,R1检测49次未失控,R2检测23次失控1次;Q2批号质控物,R2检测14次、R3检测72次及R4检测14次均未失控.结论 利用K562细胞和HL-60细胞制备定量检测BCR-ABL(P210)转录本水平的高、低浓度室内质控物,制备方便,检测结果可靠、稳定,使用质控物检测结果结合标准曲线斜率、截距进行室内质控,可更有效地保证临床检测结果的准确性和稳定性.
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利用标准曲线斜率与截距对HBV DNA荧光定量PCR实施质量监控
目前普遍采用TaqMan外标技术对HBV DNA进行荧光定量,其结果受模板浓度及扩增反应体系的批间差异影响.本文应用HBV DNA荧光定量PCR试剂标准曲线的斜率与截距对其实施质量监控,取得了满意的结果.
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窦性心率震荡对急性脑梗死患者预后的影响
目的 探讨窦性心率震荡对急性脑梗死患者死亡的预测价值.方法 回顾性分析急性脑梗死患者98例与对照组30例、急性脑梗死存活组75例与死亡组23例的24h动态心电图,比较各组间HRT的TO和TS. 结果 (1)与对照组TO、TS(-6.1±3.7%、13.1±5.6 ms/R-R间期)比较,急性脑梗死组TO高(-3.2%±6.3%)、TS低(6.1±6.0 ms/R-R间期),差异均有显著性意义(P＜0.05、＜0.01).(2)与急性脑梗死存活组TO、TS(-5.2±5.7%、7.0±2.1 ms/R-R间期)比较,死亡组TO值高(-2.2±4.3%)、TS低(5.4±4.0 ms/R-R间期),差异均有显著性意义(P＜0.05).结论 HRT与急性脑梗死患者的死亡及预后有关,可作为急性脑梗死患者预后的预测因子.
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急性冠状动脉综合征患者窦性心率震荡的临床意义
目的 探讨急性冠状动脉综合征患者窦性心率震荡(HRT)现象的临床意义.方法 分析比较34例急性冠状动脉综合征患者(冠脉组)与48例非器质性心脏病患者(对照组)的窦性心率震荡的起始值(TO)和震荡斜率(TS).结果 冠脉组TO(0.32±4.67)、TS(13.24±15.25)与年龄、性别均无相关性(P均＞0.05),TS与左心室射血分数(58.4%.±13.9%)有高度相关性(P＜0.01).对照组TO(-2.19±4.51)与年龄、性别均无相关性(P＞0.05),TS(13.65±13.34)与年龄有高度相关性(P＜0.01).冠脉组TO、TS及TO+TS异常率较高,与对照组差异有非常显著性意义(P＜0.01).结论 急性冠状动脉综合征患者窦性心率震荡现象减弱或消失,这一检测对急性冠状动脉综合征高危患者具有预测价值.
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QTcd/HR斜率评价食管心房调搏负荷试验对冠心病的诊断价值
目的研究经食管心房调搏负荷试验(TEAPT)中,心率调整QTd指标对冠心病的诊断价值.方法50例研究对象在作冠状动脉造影术前后一周内进行TEAPT,记录试验前、每级起搏末的常规12导联心电图.测定每一时点心电图的QTd、QTcd值,计算QTcd/HR斜率(SQTcd),并比较各项指标间及与ST段压低标准间的诊断效能.结果冠心病(CAD)组(n=27)的负荷峰值QTd(QTdp)、峰值QTcd(QTcdp)、SQTcd值均显著大于冠脉无显著狭窄(NCAD,n=23)组(t≥5.18,P＜0.001),此3个QTd有关参数在NCAD组的95%上限值分别为60ms、95ms、0.74ms/bpm.以它们为界限值,此3个参数诊断冠心病的特异性均显著大于ST压低标准(P＜0.05),SQTcd的敏感性和准确性显著高于QTcdp 及ST压低标准(P＜0.05-0.01).结论TEAPT可行、安全、无创,SQTcd是TEAPT诊断CAD的准确新指标.
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空间能力与心理旋转变量的关系研究
目的通过控制个体言语智力水平变量验证心理旋转角度与空间能力的关系,探讨空间能力与线性函数截距与斜率的关系.方法对95名健康男性大学生进行认知分化成套测验以及以字母R为刺激的心理旋转测验.结果控制言语能力随着旋转角度的增加,无论是正像还是镜像刺激、旋转方向是顺时针还是逆时针,反应时延长.这种变化是一种线性函数关系.斜率和截距与空间能力的相关均未达到显著水平,从相关系数上比较而言,与截距的相关要小于与斜率的相关.结论在控制言语能力的基础上,旋转角度与反应时之间存在明显的线性函数关系,但函数斜率和截距与空间能力无明显相关.
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离子选择电极法测F-计算器回归的计算
氟化物的测定有比色法、离子选择电极法及离子色谱法.离子选择电极法测水中F-是国际国内的标准检验方法[1～3].其原理是在一定条件下,电极氟化镧晶体膜上的膜电位与氟离子活度(或浓度)成线性关系.因此,测量电动势即可得离子活度(或浓度).对于少量样品可用标准加入法,而对于大批量样品宜用标准曲线法.
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动态压力-容量曲线在新生儿机械通气中的临床意义
目的 探讨动态压力-容量曲线(动态P-V曲线)在新生儿机械通气中的变化特点,为临床呼吸机的合理使用和病情判断提供借鉴.方法 利用Stephanie呼吸机自动绘制动态P-V曲线,计算25例患儿在机械通气后1,24,48,72 h及撤机前曲线斜率,并同时记录每分钟通气量(MV)、平均气道压(Pmean)、吸入氧浓度(FiO_2);观察异常通气(人机对抗、气道部分及完全梗阻、气道漏气、气管导管脱出气道)时动态P-V曲线形态特点.结果 随着肺部病变的改善,曲线斜率、MV逐渐增高,动态P-V曲线向纵轴移动,Pmean、FiO_2逐渐降低.机械通气1,24,48,72 h及撤机前曲线斜率分别为(0.76±0.53),(0.81 4±0.55),(1.05±0.48),(1.10±0.42),(1.13±0.37)mL/cmH_2O,机械通气48,72 h及撤机前斜率与1 h比较,差异有显著性(P<0.05或P<0.01).异常通气时动态P-V曲线形态均有异常改变.结论 机械通气时动态P-V曲线斜率逐渐增大、曲线向纵轴移动的趋势反映了肺部病变的改善,其形态变化对于判断异常通气有重要作用,有助于减少机械通气并发症.
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实时荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA室内质控累积数据的评价
目的 对实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA室内质控累积的数据进行评价.方法 用Taqman实时荧光定量PCR法检测2010年1～12月两个批号的质控血清HBV DNA,计算每次阳性质控结果的常用对数、标准曲线的斜率、截距和相关系数(r)及相关结果的均值(x)、标准差(s)和变异系数(CV).结果 本室2010年测定的室内质控物结果对数的累计数据x±2s范围为4.470～5.429,在参考范围内,符合要求.结论 本实验室采用Taqman实时荧光定量PCR法检测HBV DNA实验中,选用的质控方法和质控品稳定性良好,能可靠有效地为临床提供准确的结果.
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DH-505A电解质分析仪离子选择电极双参数校正分析
目的 以K+电极双参数校正为例探讨DH-505A离子选择电极电解质分析仪校正方法. 方法 测定A、B标准液K+电极的mV值和高、低定值质控物K+浓度,计算出K+电极实际测定斜率a和实际测定截距b,得出K+电极的直线方程y=ax+b.结果 K+电极实际测定斜率a为0.95,实际测定截距b为-0.21,直线方程为y=0.95x-0.21.结论 通过实验结果计算出各电极实际测定斜率a和实际测定截距b,校正各电极直线方程,确保测定的准确.
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基于"小波-幅值-斜率"的P波检测新方法
根据P波的四类基本形态的特点,将小波变换与P波在变换后的幅值和斜率参数结合起来,提出了一种基于"小波-幅值-斜率"的P波检测新方法:先应用小波变换初步搜索出满足阈值的模极大值对;然后根据P波对应的模极大值对的特点,结合幅值和斜率判据,剔除干扰,检测P波的峰点和形态;后区别单峰P波和双峰(及双向)P波,分别确定出P波的起点和终点.用该方法进行了随机采集的临床ECG数据和MIT/BIH数据的P波检测实验,和人工检测结果比较,实验统计结果显示正确检测率高于96%.
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大鼠视皮层场电位在发育过程中及LTP形成前后的变化
目的探讨视皮层发育过程中场电位的变化规律及长时程增强(LTP)形成前后场电位的变化规律. 方法应用视皮层脑片电生理技术,在大鼠视皮层脑片Ⅳ层刺激而在Ⅱ/Ⅲ层记录场电位,比较出生后第2、3、5周场电位的变化.在第3周龄的大鼠脑片中诱导LTP,场电位稳定后以一组强直刺激诱导LTP,并比较强直刺激前后场电位幅值、潜伏期以及斜率的变化.结果第3周诱导场电位的阈刺激强度较第2及第5周低.在第3周龄大鼠的实验中,强直刺激后斜率增大与幅值升高呈正相关,潜伏期的缩短与斜率和幅值变化率的差值呈正相关.结论发育过程中场电位的变化可反映皮层的发育.斜率综合了幅度及潜伏期的变化,是判定LTP的一个较好指标.
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乙型肝炎病毒DNA定量检测室内质控品的制备及应用研究
目的 自制乙型肝炎病毒DNA室内质控血清并探讨其在临床标本检验中的应用价值.方法 用检测后的患者标本自制阳性室内质控血清,用实时荧光定量PCR检测血清HBV-DNA,记录2013年1～5月质控结果、标准曲线的斜率、截距、相关系数和相关结果的均值(x)、标准差(s)及变异系数(cv);结果 自制质控物结果对数的累计数据x±2s范围为4.3～5.34,在该质控的参考值范围内;结论 本实验室采用Taqman实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA实验中,质控品稳定性良好,可联合运用多参数同时监测的质拉方法进行,能保证为临床提供有效可靠的准确结果.
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基于RNN的心电信号异常检测研究
本文提出了一种基于心电数据相邻数据点斜率的心电图异常检测方法.该方法首先对数据进行高斯滤波,然后计算相邻数据点的斜率,接着根据时序将各个斜率进行拼接得到一维数据串,后将数据串通过宽度为50的窗口以滑动的方式读取到RNN神经网络进行异常判定.本文通过实验分析后得到神经网络节点个数、遗忘率等各项参数与心电异常诊断准确率之间的联系,从而确定了神经网络三层结构以及各参数值.本文使用国际权威心电数据库四类共计1600条数据对神经网络进行训练,使用课题组采集的四类共计1491条心电数据进行算法验证.实验结果表明,本文提出的方法准确率可以达到97.0％ 的准确率,并且该方法具有良好的可靠性与适用性.
