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铁强化酱油中NaFeEDTA含量的分光光度检验方法研究
目的 研究强化酱油中NaFeEDTA含量检验方法. 方法 在酸性(pH≤0.5)条件下,NaFeEDTA中的铁完全解离成游离的Fe3+,以TritonX-100作增溶剂,在胶束条件下,Fe3+与显色剂硫氰酸钾反应生成红色配合物,在大吸收波长λmax=490 nm处测定. 结果 酱油中NaFeEDTA浓度在20～200 μg/10 ml范围与吸光度之间呈线性关系,相关系数为0.9999,检出限为2 μg.样品测定以氯胺T做校正空白,扣除还原物质和背景颜色及样品本底中游离Fe3+的干扰,回收率为93.9%～106.5%,相对标准偏差(RSD)为0.5%～3.7%. 结论 该方法简捷、快速、经济、准确,实测结果与卫生部推荐方法相一致.
关键词： NaFeEDTA 分光光度法 TritonX-100 铁强化酱油 硫氰酸钾 -
用DMSO和TritonX-100做加速剂测定血清胆红素的研究
目的配制一种总胆红素和直接胆红素测定的双试剂法试剂盒.方法用二甲亚砜(DMSO)和Triton X-100做加速剂配制成双试剂法胆红素试剂,对其工作方法学进行评价,并与钒酸氧化法和咖啡因法胆红素试剂盒实验对照.结果该法批内精密度:总胆红素(T.Bil)1.5%～1.82%,直接胆红素(D.Bil) 1.15%～1.42%;批间精密度:T.Bil 1.5%～1.82%,D.Bil 1.15%～1.42%.平均回收率:T.Bil 100.8%,D.Bil 97.7%.与钒酸氧化法和咖啡因法的相关系数:T.Bil分别为0.998 2和0.991 7,D.Bil分别为0.993 l和0.990 2,差异均无显著性.结论该法试剂配制简便,精密度、回收率和线性范围均可满足测定要求,与钒酸氧化法和咖啡因法相关良好,适于普及推广.
关键词： DMSO TritonX-100 胆红素 -
脱细胞骨基质的立体构筑及TritonX-100残留量测定
目的 制备骨组织工程的新型天然支架材料.方法 取兔双侧胫骨,修整成片状,使用含3%TritonX-100及蛋白酶抑制剂的Tris-HCL的缓冲液洗脱掉骨片中的细胞成份.取脱钙后骨片行HE染色及阿利新蓝染色并用免疫组化方法检测骨片中纤维连接蛋白及层黏连蛋白;Mallory-Heidenhain染色测量骨陷窝形态;对骨片进行扫描电镜及透射电镜观察;使用反相高效液相色谱检测TritonX-100残留量.结果 HE、阿利新蓝染色见脱细胞骨基质胶原纤维排列规则,骨陷窝空虚;骨陷窝形态测量表明脱细胞骨基质的骨陷窝数量与正常骨的骨陷窝数量没有差异;免疫组织化学染色及免疫透射电镜均见纤维连接蛋白与层黏连蛋白存在于脱细胞骨基质和正常骨的骨陷窝周边;TfitonX-100残留量测定表明脱细胞骨基质低检出极限为0.5μ/UmL.结论 脱细胞骨基质保持了骨的正常立体构筑,是一种新型的生物衍生材料,具有广阔的应用前景.
关键词： 脱细胞骨基质 TritonX-100 骨组织工程 -
免疫荧光技术中不同固定剂对RhoA蛋白定位的影响
目的: 观察免疫荧光技术中不同固定剂对SGC7901细胞中RhoA蛋白定位的影响,找出适合观察RhoA蛋白细胞内定位的固定方法. 方法: 采用免疫荧光的方法观察在使用不同固定剂(2%多聚甲醛,4%甲醛,甲醇,丙酮,10%三氯醋酸)及0.3%TritonX-100穿孔的条件下,RhoA蛋白在SGC7901细胞中的定位.结果: 用2%多聚甲醛固定,不用0.3%TritonX-100时,染色显示胞质内可见少量RhoA蛋白散在分布,核内则有RhoA蛋白浓聚;用0.3%TritonX-100后,质内只能见极少量阳性染色,核内蛋白染色变得清晰.甲醛固定后染色显示RhoA蛋白主要在核内分布,使用TritonX-100后染色更为清楚.甲醇和丙酮固定后染色显示RhoA蛋白主要在胞质内分布,核内基本未见阳性分布,加TritonX-100后核内染色增强,胞质染色减弱.另外,使用10%三氯醋酸固定未加TritonX-100时染色较淡,胞质胞核都可见,加TritonX-100后核内可见蛋白浓聚,胞质染色减少.结论: 用免疫荧光法观察RhoA定位时,固定剂的不同以及是否加TritonX-100对观察RhoA蛋白细胞内定位具有较大的影响.
关键词： 固定剂 免疫荧光显微镜术 TritonX-100 RhoA -
基于铅离子-苯基荧光酮-TritonX-100体系的氡荧光猝灭检测新方法
目的 研究铅离子对苯基荧光酮-TritonX-100体系的荧光猝灭特性,建立基于子体铅的氡无辐射危害荧光猝灭检测新方法.方法 用0.2％ HAc溶液采集氡辐射的子体铅.在ris-HAc缓冲介质中,Pb2+与PF形成配位物,经非离子表面活性剂TritonX-100敏化,体系发生灵敏的荧光猝灭效应,△F与Pb2+浓度呈良好的线性关系,与氡的辐射强度之间具有良好的数学定量关系.据此,建立氡的荧光猝灭检测新方法.结果 Pb2浓度为1.44 ng/ml～300 ng/ml时,铅离子-苯基荧光酮-TritonX-100体系△F与ρ之间呈现良好的线性关系,标准曲线的回归方程为△F=8.78ρ+82.02,相关系数(r) =0.999 1,检出限为0.43 ng/ml.氡辐射强度[D,×103(Bq·h)/m3]为8.76、17.90、56.49、66.38时,氡样品测定溶液的△F值与D值之间呈现良好的线性关系,回归方程为△F=10.37D+ 365.25,r=0.990 6.结论 本方法灵敏、准确,操作简单,在无辐射危害的条件下可检测放射性气体氡.
关键词： 氡 铅 苯基荧光酮 荧光猝灭 TritonX-100 -
成年小鼠嗅觉功能与嗅上皮中成熟嗅觉神经元数量的实验研究
目的 探讨成年BALB/C小鼠维持嗅觉功能所需嗅上皮中成熟嗅神经元的数量,研究小鼠嗅上皮中嗅神经元数量与小鼠嗅觉功能的相关性.方法 用0.7％的Triton X-100灌注8～10周大小的BALB/C小鼠鼻腔以诱导小鼠嗅觉障碍,分别于灌鼻后第3,7,21,49,56天行觅食实验检测小鼠觅食行为的改变,并联合免疫荧光染色(IFC)的方法,检测小鼠嗅上皮(OE)中成熟嗅神经元(ORNs)的数量与其嗅觉功能的相关性.结果 小鼠经Triton X-100灌注鼻腔后第3、7天,其觅食时间明显延长(F=32.04,P＜0.001),Bonferrom法两两比较示第3,7天觅食时间均长于对照组及造模后第21、49、56天组,P＜0.001差异有统计学意义.嗅上皮中成熟嗅神经元(ORNs)的数量亦于第3、7天为低(F=223.97,P＜0.001),觅食时间与嗅上皮成熟ORNs的数量呈负相关(r=-0.757,P＜0.001).小鼠嗅觉障碍于造模后第21天左右开始恢复,此时嗅上皮中OMP(+)细胞占28.66％.结论 小鼠嗅觉功能与其嗅上皮中成熟ORNs数量具有明显的相关性;当成年BALB/C小鼠嗅上皮中成熟ORNs数量恢复至对照组的28.66％时即可使小鼠嗅觉功能得以恢复.
关键词： 嗅觉障碍 嗅觉标记蛋白 OMP 嗅觉 TritonX-100 -
去细胞猪主动脉瓣的制备
目的 完全去除猪主动脉瓣的细胞,制备成去细胞猪瓣支架.方法 采用胰酶+TritonX-100制备去细胞猪瓣支架,标本进行形态、组织结构观察,并进行DNA含量和力学强度测定.以新鲜猪瓣为对照将去细胞瓣叶家兔皮下坪藏4周后分别取材,光镜进行检查.结果 采用胰酶+TritonX.100法能完全脱除猪主动脉瓣膜细胞,去细胞后瓣膜可溶性蛋白明显丢失[(0.24±0.04)%vs(0.48±0.12)%],瓣叶含水量增加[(92.2±1.5)%vs(89.2±1.6)%](P<0.01),但去细胞猪瓣仍保持了良好纤维支架结构,热皱缩温度[(67.9±1.0)℃vs(68.8±0.8)℃]和断裂强度[(489.3±19.0)g/mm2vs(540.7±19.5)g/mm2]未见显著变化(P>0.01).埋藏于兔皮下的去细胞猪主动脉瓣有轻微组织反应,可见少量中性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润,炎性反应明显轻于新鲜猪瓣组.结论 成功制备去细胞猪瓣支架,并保持良好的纤维支架结构和机械强度,抗原性轻微.
关键词： 猪 主动脉瓣 组织工程 胰蛋白酶 TritonX-100 -
TritonX-100诱导嗅觉障碍后小鼠嗅上皮结构和嗅觉功能的改及两者的相关性
[目的]用TritonX-100(TX)诱导一种嗅觉障碍模型,观察不同时点嗅上皮的组织学改变和小鼠嗅觉功能的变化,并对两者进行相关性分析.[方法]用0.7％的TX对8～ 10周的BALB/C小鼠灌鼻以诱导小鼠嗅觉障碍,分别于灌鼻后第3、7、21、49、56天行觅食实验,以觅食时间的长短评估小鼠嗅觉功能的改变；用免疫组织化学染色(IHC)的方法,检测小鼠嗅上皮(OE)中成熟嗅神经元(ORN)数量、嗅上皮厚度、嗅上皮细胞总数的变化；并对小鼠觅食时间的改变和嗅上皮中成熟嗅神经元数量的变化行相关性分析.[结果]TX诱导小鼠嗅觉障碍后,第3～7天时,小鼠嗅上皮中成熟ORN的数量急剧下降,嗅上皮的厚度变薄,细胞总数明显减少,小鼠觅食时间显著延长.第21天时,嗅上皮中成熟ORN开始增多,嗅上皮厚度开始恢复,嗅上皮中有大量新生细胞形成,以嗅觉标记蛋白(OMP)阴性细胞为主.此时小鼠嗅觉功能部分恢复,但觅食时间仍长于对照组.第49～56天时,小鼠嗅上皮中ORN数量、嗅上皮厚度、细胞总数及觅食时间恢复至正常水平.小鼠觅食时间与其嗅上皮中成熟ORN数量具有明显的相关性(r=-0.757,P＜0.001).[结论]联合运用行为学及组织化学的方法,可有效地评估小鼠嗅觉功能；用TX可成功诱导小鼠嗅觉障碍模型,该模型简便、稳定、可靠,具有可恢复的特点.
关键词： 嗅觉障碍 嗅觉标记蛋白(OMP) 疾病模型 嗅觉功能 TritonX-100 -
高温处置后人体组织DNA提取研究
目的:研究高温后人体组织DNA的提取方法对DNA-STR分型的影响.方法:用不同浓度TritonX-100处理高温后的人体组织样本,采用Chelex-100提取DNA的方法,经DNA-STR复合扩增,用ABI-3130序列分析仪电泳分离并运用Gene mapper ID V3.2基因分析软件对基因进行分型.结果:用1％ TritonX-100+Chelex-100处理样本后提取DNA,再经QIA quick PCR纯化后可检出全部基因座且基因座能较平衡地扩增.结论:该方法简便易行,实验效果好,是法科学领域中一种值得推荐的方法,尤其适合检案.
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原子力显微镜对不同方式处理的副流感病毒成像的研究
用原子力显微镜(atom force microscope,AFM)对不同处理条件下的副流感病毒(para influenza virus,PIV)进行成像研究,观察病毒的不同表面形貌和由表及里的超微结构.透射电镜(transmission electron micro-scope,TEM)提供的二维图像可以观察到病毒有圆形和带状的突起.用AFM对完整的病毒颗粒进行成像,从获得的三维图像中我们观察到呈球形的病毒颗粒表面圆形和带状突起的细部结构,两者相比较,AFM的三维图像能更真实地反映病毒的表面形貌和超微结构.用Tritonx-100处理病毒,可使病毒包膜部分或完全溶解,暴露病毒衣壳,通过图像我们观察到了PIV病毒逐步去除包膜后的不同表面形态结构和超微结构.用SDS处理病毒,能够释放出病毒RNA,用AFM进行成像观察,可见病毒的RNA结构.AFM是能够快速有效地对PIV病毒表面形貌和由表及里的超微结构进行研究的有效工具.
关键词： 原子力显微镜 副流感病毒 TritonX-100 SDS
