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邻苯二甲酸二乙基己酯和镉对大鼠睾丸巨噬细胞分泌IL-1β的影响
目的 研究邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)及镉(Cd)对大鼠睾丸巨噬细胞(TM)分泌细胞因子IL-1β的影响.方法 利用贴壁法提取大鼠睾丸巨噬细胞.以0.1％二甲基亚砜(DMSO)为对照组,用50 μg/ml脂多糖(LPS)作为激活剂,以l μmol/L、10 μmol/L、100 μmol/L的DEHP或CdCl2单独及各自半量联合处理,作用24 h后用ELISA法检测上清液中细胞因子IL-1β的含量;用CCK8法测定各浓度DEHP或CdCl2单独处理对细胞活性的影响.结果 LPS可明显促进巨噬细胞分泌细胞因子IL-1β;0.5μmol/L DEHP+0.5μmol/L Cd和5μmol/L DEHP+5 μmol/LCd联合染毒可显著抑制细胞分泌功能,但IL-1β分泌量仍明显高于对照组,并介于两单独作用组之间;50 μmol/LDEHP+50μmol/L Cd的联合处理可非常显著抑制细胞分泌功能,与对照组相比差异无统计学意义.随着剂量增加,DEHP或Cd单独作用都能抑制细胞分泌功能和细胞活性,但对两者抑制程度存在较大差异.结论 DEHP和Cd联合处理抑制大鼠TM分泌IL-1β表现出一定交互作用,对细胞活性的抑制可部分解释DEHP和Cd对细胞分泌功能的抑制效应.
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2015-2016年连云港市农村土壤重金属污染调查
目的 了解连云港市农村土壤中重金属污染现状.方法 2015-2016年,选取连云港市所辖赣榆区、东海县为监测县区,各选取40个村作为监测点,采集农村5～20 cm深处表层土壤,按《土壤总铬的测定火焰原子吸收分光光度法》(HJ491-2009)、《土壤质量铅、镉的测定石墨炉原子吸收分光光度法》(GB/T17141-1997)、《土壤质量铅、镉的测定KI-MIBK萃取火焰原子吸收分光光度法》(GB/T 17140-1997),进行镉(Cd)、铅(Pb)、铬(Cr)含量分析,依据《土壤环境质量标准》(GB15618-1995)进行评价.结果 2015-2016年,连云港土壤Pb、Cd、Cr平均含量分别为(22.4±7.8)、(0.048±0.028)、(43.8±17.9)mg/kg,相对标准偏差(RSD)为34.8％、58.3％、40.9％.各监测点Cd、Pb、Cr质量分数均未超过《土壤环境质量标准》中二级标准限量值和江苏省1990年背景值(P值均＜0.05).土壤中Pb、Cr、Cd达到环境质量一级标准的监测点分别占92.5％、97.5％、100.0％.2016年土壤Pb含量高于2015年,Cd含量低于2015年;东海县土壤Pb含量低于赣榆区,Cr含量高于赣榆区,差异均有统计学意义(P值均＜0.05).结论 连云港市农村土壤重金属环境质量指标总体安全,处于非污染状态.土壤的重金属含量存在一定的时间、地区差异.
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微波消解-ICP-OES分析白骨壤果实中微量元素
目的:对白骨壤果实中微量元素进行测定分析.方法:采用微波消解-电感耦合等离子体发射光谱法(微波消解-ICP-OES法)测定白骨壤果实中Zn、Ni、Fe、Mg、Mn、Cr、Al、V、Cd、As、Cu、Pb、Ba、B共14种微量元素含量.使用电感耦合等离子体发射光谱仪,发射功率1.2 kW,等离子气流量15 L·min-1,辅助气流量1.5 L·min-1,雾化气压200 kPa,泵速15 r·min-1,进样延迟时间为30 s.结果:白骨壤果实中含有丰富的微量元素Mg、Al、Fe、Mn等,而Cd和As含量极低或未检出.精密度试验的RSD为0.8％ ～ 3.6％,加标回收率为96.2％ ～102.4％.结论:建立的微波消解-ICP-OES分析方法可测定白骨壤果实中多种微量元素,同时为测定其他药材中微量元素的测定提供参考和理论依据.
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微波消解-原子荧光光谱法测定宫瘤消片中的砷、镉
目的:测定宫瘤消片中的砷、镉.方法:采用微波消解的制样方法,利用原子荧光光谱法测定了宫瘤消片中镉、砷微量元素的含量.结果:测得2种元素,标准曲线的r＞0.9992,回收率为91.5％～97.8％,RSD ＜5％.结论:本法快速、准确且灵敏度高,为宫瘤消片中重金属含量测定提供了较好的方法,结果满意.
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微波消解-ICP-MS测定人血白蛋白中痕量元素
目的:建立微波消解电感耦合等离子体质谱测定人血白蛋白中痕量元素的方法.方法:人血白蛋白经过微波消解,并对电感耦合等离子体质谱仪器工作参数进行优化,采用标准模式和动能歧视模式同时对Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ag、Cd、Sb、Cs、Ba、Tl、Pb 14种元素进行检测,RF功率1.4 kW,载气流速1.07 mL·min-1,辅助气流速1.20 mL·min-1,同心雾化器,蠕动泵转速40 r·min-1.采用混合内标(74Ge、103Rh、115In、175Lu、209Bi)进行校正.结果:痕量元素的检测限为0.01～0.21 μg·L-1,方法精密度为0.1％～5.5％,准确度为81.9％～116.8％,回收率为96.0％ ～ 113.0％.用该方法对国家标准物质头发成分GBW07601(GSH-1)进行分析测定,各微量元素测定值在标准值的范围内.结论:本方法适用于人血白蛋白中痕量元素的测定.
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大鼠妊娠期和哺乳期染镉对雄性仔鼠性腺发育的影响
目的:研究妊娠期和哺乳期染镉(Cd)对雄性子代性腺发育的影响及作用机制.方法:SD孕鼠16只随机分为4组:2个染cd组(A组、B组)、正常对照组(C组)和阳性对照组(D组),每组4只.A组和B组于妊娠第9日、第11日、第13日及产后隔日腹腔注射氯化镉(CdCl2),剂量分别为每次1.2 mg/kg、1.5 mg/kg;C组腹腔注射等量生理盐水;D组于妊娠9～17 d及产后隔日皮下注射己烯雌酚(DES)每次100μg/kg.出生后30 d,光学显微镜、电子显微镜观察仔鼠睾丸形态及组织学改变,免疫组织化学法检测睾丸细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)和雌激素受体α(ERα)的表达水平,放射免疫法测定血清睾酮、FSH、LH含量.结果:与C组比,B组睾丸质量和体积减小(P<0.05).A组、B组和D组睾丸生精上皮均发生不同程度的发育阻滞和超微结构损伤,血清T和LH含量均较C组显著下调(P<0.001),间质细胞中P450scc表达减弱(P<0.05).B组、D组的精原细胞和间质细胞中ERα表达较C组有所增强(P<0.05).结论:Cd能对胚胎期至青春期前雄性大鼠性腺发育过程产生干扰.
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氯化镉对大鼠睾丸波形蛋白表达的影响
目的:探讨氯化镉(CdCl2)对大鼠睾丸曲细精管和间质区波形蛋白表达的影响.方法:20只雄性SD大鼠随机分为对照组与3个实验组,每组5只动物.实验组分别每天腹腔注射CdCl20.2 mg/kg(低剂量组),0.4 mg/kg(中剂量组)和0.8 mg/kg(高剂量组),共14 d,对照组注射等量生理盐水.采用免疫组化法检测睾丸波形蛋白的表达和改变.结果:波形蛋白在睾丸曲细精管支持细胞胞浆呈阳性表达.随着Cd2+剂量增加,实验组阳性支持细胞率及波形蛋白表达量与对照组的比较均显著减少(P＜0.01),各实验组间比较也有显著性差异(P＜0.01).在中、高剂量组,波形蛋白向管腔伸展的辐射状部分变短,甚至消失.3个实验组的间质区波形蛋白表达均显著低于对照组(P＜0.01).结论:CdCl2染毒可导致大鼠睾丸支持细胞和间质区的波形蛋白表达量显著下降,且损伤呈剂量效应.
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体内冷冻的正常及镉处理小鼠睾丸内血清蛋白质的免疫组织化学研究
目的:了解正常和镉(Cd)处理小鼠睾丸内血清蛋白质渗透性的时相性变化,揭示支持细胞间紧密连接的屏障功能.方法:保持正常动力学的血循环下,运用活体内冷冻技术对曲细精管内白蛋白和IgG进行快速冷冻固定.冷冻固定的睾丸行冷冻置换后作石蜡包埋.5μm厚连续切片分别用于抗鼠血清白蛋白和IgG的免疫组化染色和H.E.染色.结果:正常曲细精管,白蛋白免疫反应产物主要定位于管周肌样细胞周围,以及间质细胞之间和毛细血管内,部分免疫反应产物呈拱型出现在曲细精管上皮基底室内,沿精原细胞表面分布.在依据生精细胞排列而区分的曲细精管上皮周期的不同发育时相,拱型免疫反应产物的数量不同.正常小鼠睾丸内IgG免疫反应的定位型式与白蛋白的免疫定位相似.Cd处理后24 h,部分曲细精管上皮内空泡形成和管腔增大,白蛋白和IgG免疫反应产物不仅出现在基底室,而且也见于近腔室的支持细胞和生精细胞之间.结论:运用活体内快速冷冻技术结合血清白蛋白和IgG的免疫组化方法,能清楚地揭示正常和Cd处理小鼠曲细精管内血清蛋白质的不同免疫染色型式,反映体内支持细胞间紧密连接结构的变化.
