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锰对小鼠黑质GSH合成相关酶γ-GCS和GSS的影响
目的 探讨锰对小鼠黑质GSH (glutathione)合成相关酶γ-GCS(γ-glutamylcysteine synthetase)和GSS(glutathione synthetase)的影响,为锰中毒机制的研究提供依据.方法 小鼠64只,雌雄各半,依体重随机分为4组,每组16只,第1组为对照组,第2～4组分别为低、中、高剂量染锰组.第1组腹腔注射0.9％氯化钠,第2～4组分别腹腔注射12.5、25、50 mg/kg MnC12,注射剂量为5 ml/kg,每天染毒1次,持续2周.后一次染毒24 h后,将小鼠用水合氯醛麻醉后快速处死,冰浴条件下分离脑组织并取黑质;HE染色和透射电镜观察黑质组织形态及超微结构,NeuN和GFAP荧光双染观察神经元和星形胶质细胞分布及数量变化,试剂盒检测黑质内GSH含量,Western blotting 法检测γ-GCS和GSS蛋白水平.结果 随着各组染锰浓度升高,黑质组织形态和超微结构损伤逐渐加剧;免疫荧光发现胶质细胞增多,神经元减少;黑质内GSH水平下降,中剂量染锰组下降了53.82％,高剂量染锰组下降了68.36％;γ-GCS和GSS蛋白表达水平下降,其中γ-GCS在中、高剂量染锰组分别下降了7.8％、28.9％,GSS在中、高剂量染锰组分别下降了12.94％、32.94％.结论 锰可通过干扰GSH合成相关酶γ-GCS和GSS的表达,影响GSH的合成,产生神经毒性.
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褪黑素对锰致小鼠运动障碍及纹状体损伤的影响
目的 探讨褪黑素对锰致小鼠运动障碍及纹状体损伤的影响.方法 小鼠84只,均分为6组,分别为对照组及低、中、高Mn组,褪黑素(MT)对照组和MT+高Mn组.第5、6组提前皮下注射给予5 mg/kg MT,2h后,第2～4和6组分别腹腔注射给予12.5、25、50和50 mg/kg MnCl2,连续2周.观察小鼠的自主活动情况,检测纹状体GSH-Px、SOD和γ-GCS的活力、表达及蛋白水平.结果 随着锰浓度的升高,自主活动和站立次数逐渐减少;纹状体γ-GCS、GSH-Px和SOD活力、蛋白表达水平逐渐下降,并呈剂量-效应关系.与高锰组比较,MT干预组自主运动和站立次数增加明显(P ＜0.05,P＜0.01);γ-GCS、GSH-Px和SOD活力、阳性表达及蛋白水平均显著升高.结论 本实验结果提示过量锰暴露可导致运动障碍及纹状体氧化损伤,褪黑素可能通过激活抗氧化酶GSH-Px、SOD和γ-GCS发挥对它的拮抗作用.
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微波消解-ICP-OES分析白骨壤果实中微量元素
目的:对白骨壤果实中微量元素进行测定分析.方法:采用微波消解-电感耦合等离子体发射光谱法(微波消解-ICP-OES法)测定白骨壤果实中Zn、Ni、Fe、Mg、Mn、Cr、Al、V、Cd、As、Cu、Pb、Ba、B共14种微量元素含量.使用电感耦合等离子体发射光谱仪,发射功率1.2 kW,等离子气流量15 L·min-1,辅助气流量1.5 L·min-1,雾化气压200 kPa,泵速15 r·min-1,进样延迟时间为30 s.结果:白骨壤果实中含有丰富的微量元素Mg、Al、Fe、Mn等,而Cd和As含量极低或未检出.精密度试验的RSD为0.8％ ～ 3.6％,加标回收率为96.2％ ～102.4％.结论:建立的微波消解-ICP-OES分析方法可测定白骨壤果实中多种微量元素,同时为测定其他药材中微量元素的测定提供参考和理论依据.
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微波消解-ICP-MS测定人血白蛋白中痕量元素
目的:建立微波消解电感耦合等离子体质谱测定人血白蛋白中痕量元素的方法.方法:人血白蛋白经过微波消解,并对电感耦合等离子体质谱仪器工作参数进行优化,采用标准模式和动能歧视模式同时对Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ag、Cd、Sb、Cs、Ba、Tl、Pb 14种元素进行检测,RF功率1.4 kW,载气流速1.07 mL·min-1,辅助气流速1.20 mL·min-1,同心雾化器,蠕动泵转速40 r·min-1.采用混合内标(74Ge、103Rh、115In、175Lu、209Bi)进行校正.结果:痕量元素的检测限为0.01～0.21 μg·L-1,方法精密度为0.1％～5.5％,准确度为81.9％～116.8％,回收率为96.0％ ～ 113.0％.用该方法对国家标准物质头发成分GBW07601(GSH-1)进行分析测定,各微量元素测定值在标准值的范围内.结论:本方法适用于人血白蛋白中痕量元素的测定.
