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2-APB对顺铂诱导人卵巢癌SKOV3细胞内质网应激途径凋亡的影响

李松岩；于洋；刘师兵；徐路；谢奇；徐冶

关键词： SKOV3 顺铂钙凋亡

摘要： 目的观察2-APB对顺铂诱导人卵巢癌SKOV3细胞内质网应激途径凋亡的影响.方法体外培养SKOV3细胞,分别加入3.5、7和14μg/ml顺铂作用12和24 h后,用MTT法检测顺铂对SKOV3细胞的抑制率,应用激光共聚焦显微镜观察细胞质内钙离子浓度变化;将SKOV3细胞随机分为空白对照组、顺铂组、2-APB组和顺铂+2-APB组,分别处理24 h后,用倒置相差显微镜观察顺铂对SKOV3细胞形态的影响,用激光共聚焦显微镜观察细胞质内钙离子浓度变化;分别处理12 h后,采用Western blot检测Caspase-3、CHOP和GRP78蛋白表达.结果 MTT结果显示,3.5、7和14 μg/ml顺铂作用SKOV3细胞12和24h,SKOV3细胞存活率明显降低,作用12和24 h的IC50分别为(14.7 ±0.1)μg/ml和(6.6±0.1)μg/ml.激光共聚焦显微镜检测发现,随顺铂浓度及作用时间的增加,SKOV3细胞质游离钙离子浓度逐渐增加.顺铂与2-APB联合作用后,经倒置相差显微镜观察,与顺铂组比较,顺铂+2-APB组细胞密度明显增多.MTT结果显示,与顺铂组比较,顺铂+ 2-APB组细胞存活率由56.8％±0.9％上升至74.4％±1.0％,激光共聚焦显微镜检测发现,游离钙荧光点数由(58.4+0.2) ×103个降低至(23.8±0.3) ×103个,差异有统计学意义(P＜0.01).Western blot结果表明,与顺铂组比较,顺铂+ 2-APB组的Caspase-3、CHOP和GRP78蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论细胞内钙离子参与调控顺铂诱导的SKOV3细胞凋亡.

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