蛋白磷酸酶2A催化亚基异构体过表达细胞株的构建和鉴定
摘要： 目的 克隆PP2Acα异构体(PP2Acα2)并分析该基因结构,构建PP2Acα2和PP2Acα载体并建立高表达细胞株.方法 诱导HL-60细胞表达PP2Acα2,克隆PP2Acα2和PP2Acα使用pCMV-Tag4A真核表达载体构建重组质粒.通过转染建立高表达细胞株,RT-PCR和蛋白免疫印迹实验检测其PP2Acα2、PP2Acα基因和蛋白水平,使用细胞计数法检测细胞株生长曲线和流式细胞仪检测细胞周期.蛋白免疫印迹实验检测免疫球蛋白结合蛋白1(IGBP1)在构建成功的细胞中的改变.结果 经过测序鉴定PP2Acα2和PP2Acα重组质粒构建成功,PP2Acα2为PP2Acα剪切异构体缺失第五外显子.RT-PCR和蛋白免疫印迹结果显示成功构建表达PP2Acα和PP2Acα2的HEK293细胞株.转染后的细胞生长曲线和细胞周期未发生明显改变.IGBP1在转染了PP2Acα2的HEK293细胞株中表达量分别是Vetor组和PP2Acα组的2.2倍和1.5倍.结论 成功克隆了PP2Acα2基因并构建了重组质粒,成功构建了高表达PP2Acα2细胞株.为阐明PP2Acα2的作用机制及其生物学效应提供了可靠的平台.
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新型齐螨素制剂遗传毒性的实验研究
齐螨素(又名阿维菌素伊维菌素等),是链霉菌产生的大环内酯类生物农药,这种高效广谱、低毒的天然产物,杀虫方式独特,且与其他类型杀螨剂(如有机磷及菊酯类农药)无交互抗性,对已产生抗性的有害螨类仍有效,开辟了农药生产与使用的新局面.目前在我国登记有80多种,原药占4.8%[1～3],阿维菌素类原药对人畜高毒,制剂为中、低毒.为保护环境和暴露人群,发展生物农药,我们以小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验、精子畸形试验以及鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验)对质量浓度为4.5%的齐螨素制剂进行了遗传毒性的研究.
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异丙肾上腺素的心肌毒性作用及对一氧化氮合酶的影响
异丙肾上腺素(Isoproterenol,ISO)是肾素能β-受体兴奋剂,有增加心脏收缩力和心率的作用,在治疗缓慢性心律失常尤其是房室传导阻滞、心脏骤停时是首选的抢救药物,也是抗哮喘药物之一.
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阿维菌素制剂的毒性作用
阿维菌素为抗生素类杀虫杀螨剂,因其副作用小,对环境兼容性好,我国许多农药生产厂家开始大规模生产.近年来,我们对国内一些厂家生产的阿维菌素制剂(包括其与某些化学农药混配剂)进行了急性毒性试验和致突变作用试验研究.
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除草剂百草枯引起胎鼠动脉管收缩的作用机制
百草枯(paraquat,PQ)是1962年由英国研发的一种作用迅速的除草剂.由于具有良好的除草效果,而广泛使用[1].
关键词： 百草枯 动脉管 前列腺素(PGE2) 消炎镇痛药 -
SD大鼠血象、脏体比正常值及相关性分析的探讨
自1994年来,大鼠30天喂养试验作为<食品安全性毒理学评价程序和方法>第二阶段毒性试验常规方法之一[1],应用日益广泛,但是,作为其中常规判断指标的血象、脏体比等指标却缺乏统一的正常值参考范围.目前,一些这方面的参考值均来自60～70年代日本、美国等的报导,例数较少,而且大鼠的年龄等均不符合我们的要求[2,3].这给结果的判定等带来许多不便.为此,我们进行了本实验,为制定统一标准提供科学依据.
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装潢居室混合物染毒小鼠某些遗传毒性指标的变化
新型建筑装饰材料在给人们带来美观方便的同时,也给生活带来了不利影响.目前,国内外对装潢后室内空气中挥发性化合物,如甲醛、混苯(苯、甲苯、二甲苯)及氨等的毒性研究较多,但关于其混合物的联合毒性作用研究的报道较少.
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茶多酚对顺铂所致肾损伤保护作用的实验研究
顺铂(DDP)已广泛应用于临床，并显示了较强的抗癌作用，但是顺铂也具有重金属类物质的毒性作用，其中主要的是对肾脏的毒性作用。在临床应用中，往往由于严重的肾功能损伤而限制了药物的使用。茶多酚(TP)是从茶叶中提取的一种酚类物质[1]，具有抗癌、防癌、增强机体免疫力、清除自由基、阻止脂质过氧化等功能。我们拟探讨TP对顺铂所致机体损伤的保护作用，以期为临床顺铂的毒性防护提供新思路。
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不同生姜提取物对小鼠精子畸形的影响
生姜为姜科植物姜的新鲜根茎,多年生草本宿根植物,属于药食两用的生物资源.生姜所含的成分复杂,目前已经发现的就有100多种,其中有姜精油、姜辣素、黄酮和姜酚等,还含有氨基酸、维生素及铁、铜、锰、锌、铬、镍、钴和锗等多种微量元素[1].
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高剂量硒对人外周血淋巴细胞的遗传毒性
硒(Se)是一种人体必需微量元素,1957年,由Schwarz等首次发现Se的营养作用.Se-Cys因其重要性被称作蛋白质的第21种氨基酸[1].食物中缺Se会引起一系列疾病,如癌症、心脏病、关节炎和免疫系统功能紊乱等.流行病学调查结果表明适量补Se有益于人体健康.但是由于Se具有有益和有害的双向性,其安全剂量范围较小,其有效剂量接近于中毒剂量,因此,有关Se对DNA损伤的保护作用及其剂量-效应关系值得深入研究.
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艾菊抽提物银胶菊内酯的细胞毒性及抗氧化性
艾菊是一种传统中草药,主治偏头痛,关节炎等多种疾病.
