浙江大学学报(医学版)杂志
Journal of Zhejiang University(Medical Sciences) 절강대학학보(의학판)
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透明质酸酶联合C2F6诱导兔眼玻璃体后脱离的实验研究
目的:研究透明质酸酶联合C2F6玻璃体腔注药诱导兔眼玻璃体后脱离(PVD)的效果及安全性.方法:15只兔(30只眼)随机分A、B、C 3组,每组5只,每兔一眼为实验眼,另一眼为对照眼.A、B两组实验眼玻璃体腔注射30IU透明质酸酶,C组实验眼玻璃体腔注入0.1 ml BSS溶液,注射后第7 d A组和C组加注C2F6 0.5 ml,对照眼均注射0.1 ml BSS溶液.注射后前10 d每天行临床裂隙灯、前置镜、检眼镜及B超和暗适应视网膜电图(ERG)检查,以后除每天常规临床检查外,每周复查B超及ERG,共观察8周.处死后眼球标本送光镜和扫描、透射电镜检查.结果:A组5只实验眼完全性玻璃体后脱离,B组3只实验眼不完全性玻璃体后脱离,C组实验眼和3组对照眼均无玻璃体后脱离发生.A、B、C组实验眼注药前后及与对照眼相比较,视网膜电图a、b波振幅和潜伏期均无显著改变(P>0.05).光镜、电镜检查未发现视网膜组织有毒性改变.结论:动物实验中临床观察结合B超、扫描电镜有助于准确判断玻璃体后脱离与否.透明质酸酶联合C2F6玻璃体腔注药可诱导兔眼完全性玻璃体后脱离的发生,但无眼内毒性.
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磷酸化STAT3和p53基因在表皮肿瘤的表达
目的:探讨stat3磷酸化(P-stat3)和p53基因表达在表皮肿瘤发生中的作用.方法:选择皮肤鳞状细胞癌(SCC)30例、基底细胞癌(BCC)、皮肤脂溢性角化(SK)和正常皮肤各20例,运用免疫组化方法,观察细胞中P-stat3和p53蛋白的表达.结果:①与正常皮肤和皮肤SK相比,P-stat3在皮肤SCC、BCC中呈明显的上调表达(P<0.001),皮肤SCC中 P-stat3的表达强度又明显地高于BCC(P<0.05);②P-stat3在皮肤SCC中的表达强度与肿瘤的分化程度有关(P<0.05),阳性表达率与肿瘤浸润的深度有关(P<0.05),与肿瘤的大小无关.③正常皮肤和皮肤SK无p53的表达,皮肤SCC和BCC中p53表达明显上调(P<0.001),且在皮肤SCC中P53的表达强度与肿瘤的分化程度有关(P<0.05),阳性表达率与肿瘤浸润的深度无关,与肿瘤是否位于暴露部位有关(P<0.05).④皮肤SCC中,P-stat3和p53的阳性表达强度具有正相关性,rs=0.641,P<0.05.结论:①P-stat3级联分子的表达异常可能在表皮肿瘤的发生中起重要作用.②stat3的过度活化可能与皮肤SCC的侵袭性生长潜能密切相关.③p53基因可能与stat3共同参与皮肤SCC的发病.
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HBx-siRNA快速筛选体系的建立和应用
目的:建立针对HBx的小干扰RNA(siRNA)快速筛选体系.方法:①构建HBx与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)N端融合表达质粒;②用一步PCR法,制备针对HBx mRNA的RNA多聚酶启动子-siRNA表达框(SEC);③将SEC转染HBx-EGFP瞬时表达的AD293细胞,通过荧光显微镜和流式细胞仪观察分析SEC对HBx-EGFP荧光表达的抑制效果,从而确定有效siRNA.结果:①成功构建HBx-EGFP融合表达质粒pHBx-EGFP,在瞬时表达细胞中,HBx-EGFP绿色荧光主要呈颗粒状,聚集在核膜与核膜外周或细胞浆;②共转染SEC能有效抑制HBx-EGFP的瞬时表达.与siHBx271相比,siHBx388是一高效siRNA位点,并且该位点与tRNAVal和H1启动子搭配更有效.结论:成功建立表达HBx的荧光蛋白报告体系,结合快速制备SEC的方法,可用于进行HBx有效siRNA及其适搭配启动子的快速筛选.
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系统性红斑狼疮患者血清HGF与MMP-9的检测及与疾病活动性的关系
目的:探讨血清肝细胞增殖因子(HGF)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的水平与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动程度的关系和意义.方法:采用双抗体夹心ELISA法检测SLE患者(36例)血清HGF及MMP-9水平.结果:①与正常人(30例)相比,患者血清HGF水平明显升高(P<0.001),而血清MMP-9水平明显降低(P<0.001);经糖皮质激素治疗后血清HGF浓度下降(P<0.05),血清MMP-9浓度升高(P<0.05);②活动期患者(24例)血清HGF水平高于非活动期(P<0.05),血清MMP-9水平低于非活动期(P<0.05);③血清HGF水平肾损组(16例)明显高于非肾损组(P<0.001),而血清MMP-9水平则低于非肾损组 (P<0.05);④血清HGF水平关节炎组(23例)明显高于非关节炎组(P<0.01),而血清MMP-9水平两组之间无显著性差异(P>0.05);⑤如果以血清HGF水平作为SLE的诊断指标,则ROC曲线下面积为0.707,灵敏度为66.7%;如果以血清MMP-9水平作为SLE的诊断指标,则ROC曲线下面积为0.984,灵敏度为97.2%;如果同时检测血清HGF水平及MMP-9水平,灵敏度为66.7%(24/36).结论:HGF及MMP-9可能参与SLE的发病机制,血清HGF及MMP-9水平可作为反映疾病活动程度、肾脏损害以及疾病进展与改善的指标,且血清MMP-9水平诊断准确性更高.
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乳牙期正常(牙合)儿童牙弓两侧的肌肉压力
目的:测量正常乳牙肌肉压力值,探讨牙弓两侧的肌动力平衡及其与颌面形态的关系.方法:利用建立的乳牙肌肉压力微机实时测量系统,测量30名正常乳牙儿童NHP的静息及吞咽状态时的肌肉压力并进行统计学分析.结果:静息状态时,肌肉压力在0~1.47 g/cm2之间,唇颊侧大于舌侧,男性大于女性,但无明显统计学差异.吞咽状态时,肌肉压力在9.60~20.13 g/cm2之间,舌侧明显大于唇侧,男性上前牙唇侧肌肉压力明显大于女性,其间差异有显著性.从静息状态到吞咽状态,唇、舌侧的肌肉压力均显著升高,舌侧尤为明显.结论:牙弓两侧的肌肉压力是一种动态的平衡,这种动态平衡是产生特定颌面形态的内在原因之一.
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高分子神经导管的理化特性对周围神经再生影响的研究
目的:评估高分子材料导管的降解时间和通透性对修复外周神经缺损的影响.方法:利用四种通透性和降解时间不同的聚酯-聚碳酸酯神经桥接导管,桥接SD大鼠右后肢坐骨神经大于10 mm缺损,并与未套管的神经缺损大鼠相对照.术后定期观察大鼠的肢体情况;在4、12、20周时,电生理测定再生神经支配的胫前肌收缩情况,大体及普通光镜水平下,观察各实验组和对照组神经再生和神经导管在体内的降解情况.结果:体内导管的降解时间:A型12周,B和C型约4周,D型约20周.A组再生神经纤维组织学优于其他实验组和对照组,平均秩次为53.17、38.83、26.60、49.17、20.23(P<0.005),导管周围炎症程度重于B、C组和对照组,但较D组为轻,平均秩次为45.87、36.27、34.83、51.63、21.4(P=0.001).再生神经支配胫前肌电刺激收缩阳性率依次为A组93.33%、 B组60%、C组20%、D组73.33%,差别有显著性意义(P<0.005).结论:具有较好通透性和适宜降解时间的高分子材料神经导管,能促进神经纤维的再生和功能修复.
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ELISA方法研究多糖与人干扰素-γ相互作用
目的:建立一种体外研究多糖与干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)相互作用的ELISA方法.方法:在硼氰氢化钠作用下合成肝素-牛血清白蛋白复合物(Heparin-BSA Complex,HBC),Sepharose 4B凝胶过滤系统分离纯化HBC,并用SDS-PAGE鉴定.将HBC(相当于0.5 μg蛋白含量)包被在酶标板上,ELISA方法检测HBC与IFN-γ的相互作用,并探讨游离肝素、低分子量肝素、硫酸软骨素A、硫酸软骨素C和透明质酸,以及卡拉胶等多糖对这种结合的影响.结果:IFN-γ与HBC的结合呈IFN-γ剂量依赖性,2 ng左右达到饱和.游离肝素和低分子量肝素以及其他多糖均不同程度地抑制了IFN-γ与HBC的结合,肝素和低分子肝素的IC50分别为2.4 μg/ml和18.6 μg/ml.结论:IFN-γ与肝素、卡拉胶高亲和力结合,而与硫酸软骨素A、硫酸软骨素C、透明质酸结合力极弱.ELISA是一个简单、灵敏的研究细胞因子与多糖相互作用的方法.
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钙对出生前后低水平铅暴露大鼠学习记忆的影响
目的:观察钙对出生前后低水平铅暴露大鼠学习记忆的影响,探讨低铅暴露早期干预的有效手段.方法:将成年Wistar孕大鼠随机分为正常组、染铅对照组和染铅加钙组,自母鼠孕15 d至幼鼠7 w龄各组喂以相应饲料和饮水.实验大鼠4 w龄时进行跳台试验,6 w龄时进行Y迷宫试验,7 w龄时检测全血铅、血清钙含量以及大脑、海马重量.结果:实验大鼠血铅含量染铅对照组高,染铅加钙组次之,正常组低,血清钙含量正常组与染铅加钙组均高于染铅对照组;学习记忆成绩染铅加钙组好于染铅对照组,但低于正常组;实验未发现低铅染毒对实验大鼠大脑、海马重量的影响.结论:低铅暴露尚不足以引起机体器官组织重量的改变,但生理功能已明显受到伤害,增加钙补充可明显改善铅暴露大鼠的学习和记忆能力,同时降低血铅含量.
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大鼠延髓后区对心血管功能的调节
目的:探讨大鼠延髓后区对心血管活动的调节作用.方法:①对脲酯和戊巴比妥钠麻醉的SD大鼠,分别在延髓后区(AP)给予不同频率(10~80 Hz)电刺激,观察大鼠平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)和心率(heart rate,HR)的变化,并加以比较.②脲酯麻醉的SD大鼠AP微量注射不同浓度(0.1~0.5 mol/L)的谷氨酸钠(L-Glutamate,L-Glu),并记录MAP和HR的变化.结果:①频率为10 Hz、20 Hz、40 Hz时,电刺激AP引起MAP和HR下降(P<0.001),频率为60 Hz、80 Hz时电刺激AP引起MAP的升高(P<0.05),但HR仍下降(P<0.001).②当L-Glu浓度为0.1 mol/L时,在AP微量注射后MAP和HR无明显变化(P>0.05),浓度为0.15 mol/L时,MAP和HR均下降(P<0.05),而浓度为0.2 mol/L、0.5 mol/L时MAP升高(P<0.001)、HR下降(P<0.05).结论:大鼠AP给予电刺激或化学刺均可引起MAP和HR变化,效应与电刺激频率或谷氨酸浓度有关.
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前列腺素E1在心内直视术中对再灌注心肌的影响
目的:探讨前列腺素E1(PGE1)在风湿性心脏病二尖瓣置换术中对细胞因子IL-6,IL-8,IL-10的影响及对缺血再灌注心肌的保护作用和机制.方法:收治30例单纯风湿性心脏病二尖瓣膜病变且需在体外循环下行二尖瓣置换术的患者,随机分为PGE1组(经静脉内滴注Lipo-PGE1 0.04 pg.kg-1.min-1,从手术开始直到结束,n=15)和对照组(未应用PGE1,n=15).通过测定围手术期5个时间点血清细胞因子(IL-6、IL-8、IL-10)和CK-MB及心肌肌钙蛋白T(cTn-T)的水平,研究细胞因子(IL-6、IL-8、IL-10)和CK-MB及cTn-T的变化情况与PGE1对细胞因子和再灌注心肌的影响.结果:两组患者的血清IL-6、IL-8、CK-MB和cTn-T水平在升主动脉开放后均有明显升高,尤其在主动脉开放后2 h,但对照组明显高于PGE1组P<0.05;血清IL-10水平也明显升高,但两组比较无明显差别,P>0.05.IL-6、IL-8水平和CK-MB水平相关(r2=0.40,r2=0.38;P>0.05).IL-6、IL-8水平和cTn-T水平相关(r2=0.56,r2=0.14;P>0.05).结论:在风湿性心脏病二尖瓣置换术中,PGE1通过抑制IL-6、IL-8的释放,下调促炎因子/抗炎因子间的平衡,减轻心肌的再灌注损伤.
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Nelfinavir损害鼠胰岛素瘤INS-1细胞内IRS-2信号传导
目的:探讨HIV-1蛋白酶抑制剂nelfinavir对胰岛β细胞内胰岛素信号传导蛋白磷酸化的影响.方法:体外观察鼠胰岛素瘤INS-1细胞经nelfinavir治疗48 h后,用100 nmol/L胰岛素刺激2 min,细胞裂解产物中的胰岛素信号传导蛋白磷酸化采用免疫沉淀和Western印迹方法测定.用台盼蓝染色细胞计数和MTT衰减试验,评估nelfinavir对INS-1细胞活力的影响.结果:nelfinavir降低胰岛素刺激的胰岛素受体底物IRS-2和Akt-Thr308磷酸化,并呈剂量依赖关系.nelfinavir浓度为10 μmol/L时,分别降低IRS-2和Akt-Thr308磷酸化达52%和55%,在这个浓度下nelfinavir没有细胞毒性作用.结论:nelfinavir治疗可以损害胰岛β细胞内IRS-2介导的信号传导.
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精神发育迟滞荧光原位杂交染色体亚端粒的研究
目的:探讨染色体亚端粒重排在特发性精神发育迟滞(mental retardation MR)的病因学意义及发生率.方法:对46例诊断不明的MR患儿进行荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization FISH) 染色体亚端粒分析.研究对象入选标准:①MR伴以下条件2项或以上:头面部异常特征,手足、生殖器或内脏器官先天异常发现,宫内生长发育迟缓史,生后异常生长发育,阳性家族史;②>450显带分辨水平染色体分析结果正常;③排除临床可识别的遗传或环境致病因素.选用ToTelVysionTM DNA探针进行染色体亚端粒FISH分析,发现缺失或易位者,需由另一亚端粒特异性探针证实诊断,并用同一探针对父母样本进行FISH分析.结果:检测到2q和6q末端微小缺失各1例,本组样本中-重度MR亚端粒缺失的发生率为7.6%(1/13),轻度MR的发生率为3.0%(1/33),其中1例亚端粒微小缺失遗传自其有相同改变的父亲.结论:研究结果支持染色体亚端粒异常为MR的重要病因,FISH分析为发现隐藏亚端粒缺失的有力工具.建议对临床怀疑有染色体异常的MR,在常规分析的基础上进一步作亚端粒FISH分析.
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应用小切口方法根治直肠癌
目的:比较小切口方法和传统的直切口方法行直肠癌根治术的预后.方法:从2001年4月至2002年12月对78例直肠癌患者用小切口方法行直肠癌根治术.切口从髂前上嵴与耻骨联合的连线上方2 cm处作一7~10 cm的切口.同一时期有86例按传统的直切口方法行直肠癌根治术,并将其作为对照组.结果:78例患者通过小切口全部成功地行直肠癌根治术;两组患者的一般情况、手术类型、肿瘤的组织类型无显著差别(P>0.05),然而,小切口组的切口长度明显比传统组短(9.38 vs 17.32),小切口组的手术时间、所需止痛药时间、术后第一次排气时间和开始进流质时间,以及术后住院时间均显著性比对照组要短(P<0.05).平均随访25.4个月,未发现肿瘤复发.结论:小切口方法可作为直肠癌根治术的较好选择.
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唾液酸化糖原分子和nm23-H1基因的表达与乳腺癌转移和预后的关系
目的:明确不同类型唾液酸化糖原分子,Sialyl Lewis A(SleA)、Slalyl Lewis X(SleX)的异常表达与乳腺癌转移和预后的关系,评价SleX和nm23-H1基因表达的综合分析对乳腺癌预后判断的价值.方法:采用免疫组织化学染色的方法,检测102例乳腺癌组织内SleA、SleX和nm23-H1的表达,分析与乳腺癌转移和预后的关系.结果:102例乳腺癌中SleA和SleX阳性率分别为24.5%(25/102)和59.8%(61/102),nm23-H1低表达率为37.3%(38/102).SleA的表达与多项临床病理资料、淋巴结转移和预后之间无显著相关性.SleX、nm23-H1基因的表达也与多项临床病理资料无显著相关性,但与淋巴结转移相关.生存曲线分析显示,SleX阴性表达者的无瘤生存率明显高于SleX阳性表达者,P<0.05;nm23-H1非低表达者的无瘤生存率明显高于nm23-H1低表达者,P<0.01.综合分析nm23-H1表达和SleX表达与预后的关系显示,SleX阳性表达合并nm23-H1低表达的患者预后差.多因素分析结果显示,原发肿瘤大小、淋巴结转移情况、联合nm23-H1和SleX表达,为重要的独立判断预后的指标.结论:以SleX为代表的Ⅱ类糖原分子在乳腺癌中具有主要表达相关性,其表达与乳腺癌转移和预后不良相关;综合分析nm23-H1表达和SleX表达能更准确地判断乳腺癌的预后.
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毛囊细胞移植诱导裸鼠毛囊样结构形成的研究
目的:观察毛囊细胞移植诱导裸鼠毛发再生和毛囊重建情况.方法:采用细胞培养技术和裸鼠移植技术,将培养的毛囊毛乳头细胞、真皮鞘细胞和头皮真皮成纤维细胞按比例与毛囊上皮细胞混合,移植到裸鼠皮下,观察毛囊形成情况.结果:在毛囊毛乳头细胞与毛囊上皮细胞混合后移植到裸鼠皮下后可见毛囊样结构形成,而毛囊真皮鞘细胞和头皮成纤维细胞与毛囊上皮细胞混合则不能诱导裸鼠毛囊样结构形成.结论:低传代培养的毛乳头细胞与毛囊上皮细胞混合后在体内可诱导毛囊样结构形成.
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毛囊球部细胞体外在胶原/壳聚糖多孔支架上形成皮肤样结构的研究
目的:观察毛囊球部细胞种植到胶原/壳聚糖多孔支架上皮肤重建情况.方法:采用细胞培养技术和细胞支架种植技术,将培养的毛囊球部细胞种植到胶原/壳聚糖多孔支架上,HE染色观察皮肤样结构形成情况,并作免疫组织化学鉴定,以证明细胞的来源属性.结果:毛囊球部细胞种植到胶原/壳聚糖多孔支架上可见皮肤样结构形成,表皮部分细胞分化良好,排列复层整齐,有角化现象,高分子与低分子角蛋白表达阳性.结论:低传代培养的毛囊球部细胞在体外胶原/壳聚糖多孔支架上可诱导皮肤样结构形成.
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培养毛乳头细胞bFGF、ET-1、SCF的表达及其生物学特性
目的:观察不同传代培养人毛乳头细胞的bFGF、ET-1、SCF表达变化情况及对其诱导毛囊再生能力的影响.方法:采用细胞培养、免疫组织化学和原位杂交技术,对不同传代培养的毛乳头细胞的bFGF、ET-1、SCF的表达变化情况进行观察,同时观察其对诱导毛囊再生能力的影响.结果:低传代培养毛乳头细胞ET-1、SCF表达较强,传代>6代后ET-1和SCF转为阴性;并发现毛乳头细胞表达ET-1和SCF越强,其诱导毛囊再生能力也越高.结论:毛乳头细胞诱导毛囊再生的能力与其表达ET-1和SCF的强度相关.
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米诺环素对阿糖胞苷引起的离体毛囊损伤的保护作用
目的:观察米诺环素对阿糖胞苷(Ara-c)诱导的小鼠触须毛囊损伤的保护作用.方法:用离体器官培养的方法,在倒置显微镜下每日测量不同浓度米诺环素与不同浓度阿糖胞苷作用下毛囊生长长度,记录生长天数,并用MTT法测定米诺环素与阿糖胞苷对体外培养乳鼠毛囊球部细胞存活率的影响.结果:0.3×10-6 mol/L以上浓度的米诺环素能阻止阿糖胞苷对毛囊生长长度的抑制作用,延长化疗药物损伤后毛囊在体外的生长时间;米诺环素也能明显改善阿糖胞苷对体外培养乳鼠毛囊球部细胞存活率的抑制作用.结论:米诺环素在体外对阿糖胞苷诱导的毛囊损伤有保护作用,可能成为预防化疗后脱发的有效药物.
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骨形成蛋白在毛囊中表达意义的研究进展(综述)
骨形成蛋白(BMP)与毛囊的形成和毛干的分化有重要的联系.在毛囊的不同周期,骨形成蛋白及其受体的时空表达较为复杂,意义不同,尤其休止期毛囊高度表达骨形成蛋白的意义还不清楚.对毛囊发育不同周期骨形成蛋白分子及其受体的表达方式和意义作一综述.
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方丝弓矫治术治疗成人深覆合
目的:观察成人深覆合患者用常规方丝弓技术治疗后,牙和骨骼的变化.方法:选择18~30岁深覆合患者30例,治疗前后摄X线头颅定位侧位片和灌注石膏模型,测量并进行统计学分析.结果:上下前牙覆合明显减小(-3.55 mm,P<0.001),磨牙伸长并伴随下颌骨向后旋转(U6-SN:+1.33 mm,L6-MP:+0.87 mm,SN-MP:+1.57°,Y-axis:+1.35°,P<0.001).结论:常规方丝弓技术治疗成人深覆合,主要通过磨牙伸长、前牙唇倾来获得.
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经胸超声心动图在经心导管封堵小儿房间隔缺损中的应用
目的:探讨经胸超声心动图(TTE)在经心导管封堵小儿房间隔缺损(ASD)中的应用价值.方法:TTE多个切面测量46例ASD大直径,ASD部位及周围关系,术中TTE测量ASD球囊伸展径并与X线所测球囊伸展径比较,选择Amplatzer ASD封堵器的型号、引导封堵器的放置及疗效评价.结果:46例经心导管封堵的ASD中40例封堵成功,6例因术中严重心律失常、Amplatzer ASD封堵器意外脱落、ASD太大和左房长径不足以及ASD距下腔静脉太近而未能封堵成功.TTE测ASD大径(1.43±0.68)cm与X线所测球囊伸展径(1.66±0.82)cm高度相关,(r=0.89,P<0.01),TTE术中测球囊伸展径(1.78±0.85)cm与X线测球囊伸展径高度相关,(r=0.98,P<0.01).结论:TTE能很好显示小儿ASD大小、部位及其周围关系,方法简便,无痛苦,在经导管封堵小儿ASD中具有重要作用.
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皮肤毛囊研究进展
毛囊研究从19世纪初的毛发组织胚胎学一个小分支逐步发展成为现今一门日臻成熟的科学--毛囊生物学.该学科涉及的研究包括毛囊生长周期的调控、毛囊细胞生物学、毛囊模型研究、毛囊重建及组织工程研究等.随着生物工程技术和分子遗传学的迅猛发展,各相关学科对毛囊研究不断提出新的要求.它已不再仅仅局限于对毛囊及其模型进行体外生物学观察和研究,而是已经发展到对毛囊重建及皮肤组织工程等方面的研究领域.
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2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
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2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |