卫生研究杂志
Journal of Hygiene Research 위생구
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国疾病预防控制中心
- 影响因子: 0.76
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1000-8020
- 国内刊号: 11-2158/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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胆固醇酯转运蛋白基因多态性与肥胖及对膳食干预的影响
目的探讨胆固醇酯转运蛋白(CETP)基因多态性与肥胖的关系及其对肥胖膳食干预的影响.方法从血凝块中提取DNA,用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)检测上海340名成年人的CETP基因TaqIB位点多态性;对研究对象进行体格检查并测定血脂;对其中的肥胖人群进行膳食干预,分析CETP基因多态性对干预效果的影响.结果(1)B1B1、B1B2和B2B2三种基因型的频率分别为35.6%、47.9%和16.5%,符合Hardy-Weinberg定律;B1等位基因为优势等位基因;肥胖组人群和正常组的基因型构成差异无显著性,控制相关影响因素后结果相同.(2)三种基因型的高密度脂蛋白(HDL)水平差异有显著性,B2B2型的HDL水平高.控制环境影响因素后这种相关性仍然存在.(3)B1B2型膳食干预后HDL水平明显升高,这与其他基因型显著不同;控制基线HDL水平和性别因素后基因型对HDL水平改变没有影响.结论CETP-Taq IB位点B2B2基因型具有较高的血清HDL水平,成年肥胖人中此位点多态性无特殊性;基线HDL水平影响不同基因型的HDL对膳食干预的反应.
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早产儿母亲血浆铜和胎膜胶原含量初步分析
目的对早产儿母亲血浆铜和胎膜胶原含量进行初步研究,探索二者的联系,为研究早产的发生机制提供重要线索.方法分别收集早产和足月新生儿及其母亲的一般情况、ICP-OES检测两组母血和脐血血浆铜含量.首次对胎膜胶原采用天狼红染色,图像分析比较两组胎膜厚度和Ⅰ型、Ⅲ型胶原的含量.结果胎膜早破在早产儿母亲和足月儿母亲的发生率分别为40.00%和9.09%.早产儿母亲孕前体重、早产儿身长、出生体重明显低于足月儿母亲和足月儿(P<0.05).早产儿脐血血浆铜显著低于足月儿(P<0.05).足月儿母亲非破裂处胎膜厚度显著大于早产儿母亲(P<0.05),而且也显著大于其自身破裂处胎膜厚度(P<0.05).早产儿母亲非破裂处胎膜的Ⅰ型、Ⅲ型胶原含量显著低于足月儿母亲(P<0.05).结论早产儿母亲血浆铜和胎膜胶原含量都低于足月儿母亲.
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亚甲基四氢叶酸还原酶基因单体型与焦炉作业工人染色体损伤易感性的关系
目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与焦炉作业工人染色体损伤易感性的关系.方法选取140名焦炉工和66名医护人员作为研究对象,采用胞质分裂阻滞微核实验评价个体染色体损伤水平,测定尿中1-羟基芘浓度反映多环芳烃暴露内剂量,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCRRFLP)方法分析MTHFR基因两个单核苷酸多态性(SNP)位点(C677T、A1298C),利用PHASE2.1软件经Bayesian法计算单体型.校正年龄、性别和尿1-羟基芘水平,用协方差分析比较MTHFR不同基因型或单体型之间外周血淋巴细胞微核率的差异.结果研究对象中MTHFR C677T和A1298C两个变异等位基因频率分别为0.56和0.16,其分布均符合Hardy-Weinberg平衡.本研究中MTHFR基因这两个SNPs存在连锁不平衡关系(D'=0.99),研究对象中有四种单体型677T-1298A、677C-1298A、677C-1298C和677T-1298C,其频率分别为0.555、0.279、0.163和0.003.在焦炉工组,非677C-1298A/677C-1298A单体型对的微核率高于677C-1298A/677C-1298A,差异有显著性(1.00±0.67 vs 0.60±0.41,P=0.04),其中677T-1298A/677T-1298A单体型对微核率高于677C-1298/A/677C-1298A,差异有显著性(1.08±0.71 vs 0.60±0.41,P=0.04).在焦炉工组和对照组中,未发现上述两个SNPs与微核率之间显著关联.结论MTHFR基因单体型可能是影响焦炉工染色体损伤的遗传易感性因素之一.
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华北地区二十三种中药材中重金属及有害元素基线调查及参考限量标准建立
目的了解中国华北地区中药材重金属及有害元素的基线水平,制定适合国情并与国际接轨的参考限量标准.方法采用本实验室建立的植物药材中重金属及有害元素检测方法,完成了华北地区23种254份植物性中药材中铅、镉、汞和砷的测定.结果各类植物药材中铅、镉、汞和砷的含量分别为(1.78±1.98)、(0.17±0.24)、(0.04±0.06)和(0.72±0.69)mg/kg.在制定植物性中药材中重金属铅、镉、汞和砷的限量标准的过程中要充分考虑到人体经口摄入的各种食物、饮料及水等可食的物质中这些有害物质的摄入量.目前,中国人每人每日重金属和有害元素经口摄入总量(膳食和中药材相加)分别为:铅102.9μg;镉21.4μg;汞5.7μg;无机砷81.0μg.分别占各自的每天允许摄入量值为:铅45.7%;镉34.0%;汞5.7%;砷60.5%.建议植物性中药材铅、镉、汞和砷限量标准为:铅5.0mg/kg;镉0.3mg/kg;汞0.2mg/kg;砷2.0mg/kg.结论中药材铅、镉、汞和砷基线水平的调查是成功的,在此摄入水平,这些有害元素对人体是安全的.
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基因组学技术初步分析甲基汞神经毒性功能基因
目的探讨甲基汞神经毒性差异表达基因功能.方法利用基因芯片筛选大鼠暴露体重剂量为0.5mg/kg的氯化甲基汞后脑中的差异表达基因,并利用基因组学技术分析其功能.结果基因表达谱中差异表达基因共有303条,其中上调基因为170条,下调基因为133条.发生显著性改变的功能基因主要涉及到:①免疫应答及解毒作用;②遗传信息传递与表达;③细胞信号传导;④神经传导;⑤细胞增殖与分化;⑥细胞凋亡;⑦其它未知功能等7组.在暴露组样本中,脑中有关细胞信号传导和神经传导功能基因发生了特别显著的差异表达.结论甲基汞通过对信号传导过程的影响,发挥其神经毒性的作用.
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大肠杆菌O157胶体金免疫层析快速筛查方法的建立
目的建立一种大肠杆菌O157的胶体金免疫层析快速筛查方法.方法利用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心法检测大肠杆菌O157,对该法进行敏感性、特异性和食品样品的适用性分析.结果该法能在15分钟内完成检测,检测不同的肠杆菌科细菌(非O157型大肠杆菌、沙门菌、志贺菌、变形杆菌、柠檬酸杆菌、肠杆菌、沙雷菌、耶尔森菌)、葡萄球菌、李斯特菌、气单胞菌、弧菌等共24种30株常见细菌,未发现有交叉反应,显示该法特异性良好.检测大肠杆菌O157的低检出浓度为1×105cfu/ml.方法适用于奶粉、面粉、淀粉、咖啡粉、饼干、蛋糕、果冻、燕窝和果汁等食品样品的检测.结论新建立的大肠杆菌O157胶体金免疫层析试验简便、快速,特异性和灵敏度较好,适用于现场样品的快速筛查.
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有机氯农药非职业暴露与乳腺癌患病风险的病例-对照研究
目的研究有机氯农药二氯二苯三氯乙烷(DDT)和六氯环乙烷(HCH)类雌激素污染物在非职业暴露人群的内暴露水平及与乳腺癌患病风险的关系.方法采用成组病例对照研究方法,调查90名乳腺癌新确诊患者和136名社区健康女性对照.采用问卷调查表收集病例及对照的乳腺癌相关危险因素信息.采用气相色谱-电子捕获(GC-ECD)方法检测血清中有机氯农药残留物水平.运用logistic回归模型分析8种有机氯农药残留物的血清水平与乳腺癌患病风险的相对危险度(OR).结果病例和对照血清中均能检出p,p'-DDT、p,p'-DDE、o,p'-DDT、p,p'-DDD以及α、β、γ、δ-HCHs有机氯农药残留物,其中β-HCH、p,p'-DDE及p,p'-DDT的总检出率为91.2%、92.1%和91.2%;各物质检出水平在乳腺癌组和对照组间差异无显著性(P>0.05);控制了混杂因素后,p,p'-DDT、p,p'-DDD及δ-HCH暴露与总乳腺癌患病呈正相关(OR>2,P<0.05).分层分析中绝经前女性的p,p'-DDT、p,p'-DDD、β-HCH血清水平与乳腺癌呈正相关,调整OR分别为3.59、5.70和3.06(P<0.05).结论有机氯农药残留物(DDTs和HCHs)可能增加妇女,尤其在绝经前妇女患乳腺癌的风险.
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还原型谷胱甘肽对六价铬诱导的L-02肝细胞毒性的保护作用
目的探讨还原型谷胱甘肽(GSH)对六价铬[Cr(Ⅵ)]诱导的L-02肝细胞毒性的影响.方法分别设Cr(Ⅵ)、GSH单独作用组、联合作用组和空白对照组,采用MTF法检测细胞生存率的变化.结果在2、4、8、16、32和64μmol/L Cr(Ⅵ)处理浓度,Cr(Ⅵ)对L-02肝细胞具有明显细胞毒性,细胞存活率与Cr(Ⅵ)处理浓度呈负相关(r=-0.910).仅浓度为20μmol/L的GSH对Cr(Ⅵ)诱导的细胞毒性具有拮抗作用,Cr(Ⅵ)+GSH联合组的生存率与Cr(Ⅵ)不同浓度单独处理组比较差异均具有显著性(P<0.05).结论适宜浓度的GSH可能对Cr(Ⅵ)诱导的L-02肝细胞毒性具有保护作用.
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抗微囊藻毒素单克隆抗体胶体金标记物的制备及鉴定
目的制备抗微囊藻毒素(MC-LR)单克隆抗体胶体金标记物,并利用光谱分析来探讨结合物的合成机理.方法用杂交瘤技术生产并纯化的抗MC-LR的单克隆抗体,利用胶体金标记技术合成20nm粒径的胶体金与抗MC-LR单克隆抗体的结合物,通过光谱分析对偶联物中单克隆抗体的构象进行分析,ELISA法检测偶联物中抗体的免疫性.结果抗MC-LR单克隆抗体的效价达108,IC50抑制浓度为3ng/ml,为IgG2a亚型,分子量为1.5×105,与MC-LW、MC-LF无明显交叉反应.胶体金与抗体偶联物的颗粒圆整,光谱分析结果显示抗体蛋白的特征官能团没有发生明显变化,与胶体金粒子作用后结构略加紧密.ELISA结果显示偶联物仍然保持免疫原性.结论抗MC-LR单克隆抗体胶体金标记偶联物中抗体蛋白结构和抗原决定簇的位点没有改变,仍具有免疫原性,偶联物的稳定性良好.
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苯乙烯对大鼠不同脑区多巴胺递质含量及单胺氧化酶活性的影响
目的观察苯乙烯在不同染毒期限和染毒剂量下对大鼠神经系统多巴胺递质含量及单胺氧化酶活性的影响.方法大鼠随机分为5组,每组12只动物,雌雄各半.苯乙烯急性染毒剂量为600mg/kg,亚急性染毒剂量为150~600mg/kg,恢复组在苯乙烯染毒后正常饲养3周,L-dopa组在苯乙烯染毒同时腹腔注射600mg/kg bw的L-dopa.方法监测动物尿中苯乙烯代谢物苯乙醇酸(MA)和苯乙醛酸(PGA)的含量作为苯乙烯染毒的内剂量,测定苯乙烯染毒大鼠不同脑区多巴胺(DA)含量及参与多巴胺代谢的单胺氧化酶(MAO)活性的变化.结果尿中的PGA和MA含量与染毒剂量均呈正相关,由于存在一定的环境本底,MA比PGA在作为苯乙烯染毒内剂量的指标上更有代表性.视网膜、垂体和纹状体中的DA含量在苯乙烯染毒下显著降低,垂体中的MAO活性增加,而纹状体和视网膜中的MAO活性减小.结论苯乙烯可以通过多巴胺通路产生对机体的神经损伤.
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双酚A对原代培养胎鼠脑多巴胺神经元的氧化损伤作用研究
目的探讨双酚A对原代培养的胎鼠脑多巴胺神经元的毒性作用及损伤机制.方法孕14~15天SD胎鼠中脑多巴胺神经元在无血清条件下分别培养4或7天后,分别加入1、10、25、50、100μmol/L双酚A,于24h和48h后检测细胞内活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA);流式细胞术检测细胞凋亡;酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化用于鉴定和计数多巴胺神经元比例的变化.结果与对照组相比,各处理组均可导致细胞内活性氧升高,双酚A≥50μmol/L时,可无选择地使细胞内活性1氧明显升高,同时使SOD、GSH水平明显降低,MDA水平明显升高;双酚A浓度≥50μmol/L时可使凋亡细胞数显著增加.酪氨酸羟化酶阳性细胞数在25μmol/L以上时随双酚A浓度增加其比例显著降低.结论双酚A可通过氧化损伤导致体外培养的多巴胺神经元凋亡.
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管理人员职业紧张常模及转换表研制
目的中高层管理人员、一般管理人员职业紧张常模、应用表、分级标准研究.方法采用职业紧张量表(OSI-R),对中高层管理人员263例、一般管理人员569例,共计832例常模样本进行研究.结果首先,采用OSI-R量表分别研制了中高层管理人员、一般管理人员职业紧张常模;其次,在常模的基础上,分别研制了常模样本粗分转换为T分表.职业紧张程度分级:职业任务和紧张反应问卷中,T分≥70分者,为高度职业紧张、紧张反应;T分在60分至69分范围内者,为中度职业紧张、紧张反应;T分在40分至59分范围内者,为适度职业紧张和紧张反应;处于正常范围.T分低于40分者,为相对缺乏职业紧张和紧张反应.在应对资源问卷中,T分低于30分者,表明高度缺乏应对资源;T分在30分至39分范围内者,表明中度缺乏应对资源;T分在40分至59分范围之间者,具有适度的应对资源,属于正常范围;T分≥60分者,表明有很强的应对资源.结论将职业紧张的模式结合中高层管理人员、一般管理人员职业紧张常模及应用表,分别针对不同个体主要紧张源、紧张反应、应对资源,采取有针对性的干预(组织、个体)措施,以降低中高层管理人员、一般管理人员职业紧张程度,保护和促进工作能力是职业卫生领域面临的重要任务之一.
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出生前后甲基汞暴露对幼鼠海马和小脑结构的影响
目的评价出生前后低水平甲基汞暴露对幼鼠海马和小脑结构的影响.方法将SD孕鼠随机分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组.Ⅰ组为对照组,自由饮用蒸馏水;Ⅱ、Ⅲ组自孕7天至哺乳期末饮水中分别加入0.1和1mg/(kg·d)甲基汞.观察各组幼鼠早期生理发育指标,21天时取其海马和小脑组织观察结构变化情况.结果各组幼鼠无明显形态和早期生理发育指标的异常改变,21日龄时汞暴露组幼鼠体重低于对照组.光镜下Ⅲ组海马和小脑有个别神经细胞固缩改变,海马结构排列紊乱,Ⅱ组无明显病理改变.免疫组化方法分析阳性表达率,海马NF:Ⅲ组和Ⅱ组低于Ⅰ组(F=7.94,P<0.01);海马GFAP:Ⅲ组和Ⅱ组高于Ⅰ组(F=10.10,P<0.01);小脑NF:Ⅲ组小于Ⅰ组和Ⅱ组(F=6.85,P<0.05);小脑GFAP:Ⅲ组大于Ⅰ组和Ⅱ组(F=4.98,P<0.05).电镜下观察到Ⅱ组和Ⅲ组均有超微结构改变,如神经元核不规则、胞体固缩、线粒体变性、突起溶解等.结论出生前后低水平甲基汞暴露影响了小脑和海马的超微结构和神经细胞表达.
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复配式粗杂粮的营养成分特征及其对人体血糖生成的影响
目的评价复配式粗杂粮的营养成分及其血糖生成指数(GI),探讨其营养成分与生物功效的关系.方法按国家标准方法分别测定复配式粗杂粮及对照食物一般营养素含量.取含有50g碳水化物的复配式粗杂粮制成馒头,50g葡萄糖为对照物,10名志愿者测空腹血糖后,服用2种食品,测定3h内不同时间的血糖水平,依照Wolver方法计算食物的GI值.结果复配式粗杂粮每100g中含不溶性膳食纤维(粗纤维)13.7g、维生素B10.40mg、蛋白质13.5g、灰分2.0g、维生素B2 0.16mg、钙54mg、铁7.1mg、锌3.00mg.其餐后血糖绝对增加值和血糖反应曲线下增值面积显著低于葡萄糖(P<0.05),GI值为52.6.结论复配式粗杂粮中较高含量的蛋白质、矿物质、粗纤维和维生素B1、B2,特别是比较低的GI是复合式营养干预取得较好效果的重要原因.
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中国非吸烟女性肺癌危险因素的病例-对照研究
目的探讨中国非吸烟女性患肺癌的危险因素.方法应用1:2配对的病例对照方法,收集2001年9月~2004年2月在北京、上海和成都指定医院经病理诊断确诊的非吸烟女性新发肺癌住院病例157例,按照性别、年龄(±2岁)、不吸烟等配对因素选取医院对照和人群对照.利用统一调查表对调查对象进行面对面问卷调查,收集病例和对照有关危险因素的暴露史等情况.通过单因素分析和多因素条件Logistic回归分析筛选肺癌的主要危险因素.结果单因素分析发现28个暴露因素与非吸烟女性肺癌发生有关.多因素分析发现,被动吸烟指数≥50人年(OR=1.77,95%CI为1.07~2.92)、经常吃动物内脏(OR=1.85,95%CI为1.06~3.22)、职业接触粉尘(OR=2.47,95%CI为1.21~5.03)和工作场所通风不良(OR=4.02,95%CI为1.74~9.29)为非吸烟女性肺癌发生的危险因素;常吃蔬菜(OR=0.26,95%CI为0.12~0.59)、经常服用维生素(OR=0.53,95%CI为0.30~0.93)、结婚后家庭人均月收入≥500元(OR=0.50,95%CI为0.28~0.91)和初次生育年龄在24~30岁之间(OR=0.53,95%CI为0.32~0.90)为非吸烟女性肺癌发生的保护因素.趋势性检验发现,被动吸烟与非吸烟女性发生肺癌的相对危险度之间存在一定剂量反应关系.结论被动吸烟、职业接触粉尘、经常吃动物内脏和工作场所通风不良会增加非吸烟女性患肺癌的危险性.常吃蔬菜和经常服用维生素等因素可以降低非吸烟女性发生肺癌的危险性.
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川芎嗪对染矽尘大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响
目的观察川芎嗪对染矽尘大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响.方法将大鼠随机分为对照组、染矽尘组、川芎嗪组,采用一次性气管内注入矽尘法建立矽肺动物模型,川芎嗪组每日腹腔注射川芎嗪注射液50mg/kg.染尘后按不同时间点取大鼠肺组织制作石蜡切片,采用天狼猩红染色结合偏振光显微镜观察Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,Image Pro Plus图像分析系统进行定量分析.结果染矽尘后第3天,Ⅲ型胶原开始增生,染矽尘后第7天,Ⅰ型胶原开始增生,直至染矽尘后第28天,这两种胶原进行性增加.与对照组相比,各时间点染矽尘组大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原面积百分比均有不同程度增加,而川芎嗪组Ⅰ型胶原面积百分比在第7、14、28天,Ⅲ型胶原面积百分比在第28天时明显低于染矽尘组.结论矽尘可以诱导大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原合成增加,两型胶原出现增生的时相有所不同;川芎嗪可以抑制矽尘诱导的Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成.
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不同加工条件下转基因大米潮霉素标记基因(hpt)稳定性研究
目的从DNA稳定性的角度,探讨转基因大米潮霉素标记基因hpt向食品或消化道微生物转移发生水平转移的可能性.方法利用针对hpt不同大小片段的PCR扩增体系,对hpt在转基因大米加工食品中的稳定性进行研究.结果建立的PCR体系能稳定扩增出hpt236bp-910bp不同大小的5个片段.利用这一PCR体系对s86转基因大米不同加工食品的检测显示,加工米饭、粥大于500bp的片段已降解,爆米花和锅巴大于236bp的hpt片段已降解.对照M86大米加工米饭和粥仅能扩出植物叶绿体基因rbcl片段,爆米花、锅巴及空白对照所有扩增均为阴性.结论hpt在转基因大米加工食品中均已不同程度的发生了降解,不同加工方式对hpt片段降解影响显著,在加工后hpt以较大或完整片段向食品或消化道微生物转移的可能性减小.
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DNA损伤修复能力与慢性苯中毒关系研究
目的探讨DNA修复能力与慢性苯中毒的关系.方法以γ射线作为诱变剂造成淋巴细胞DNA损伤,应用彗星试验和外周血淋巴细胞胞质分裂阻滞微核检测法,评价63名慢性苯中毒工人和45名同期接苯但无苯中毒表现的同工种对照工人外周血淋巴细胞DNA链断裂和染色体损伤微核形成的修复能力.结果苯中毒组的彗星尾长差[(4.64±1.57)μm]显著高于对照组[(3.77±1.30)μm](P=0.0029).3AB指数与对照组无显著性差异.彗星尾长差>3.81 μm的研究对象发生慢性苯中毒的相对危险性显著增高(OR=2.490,95%CI:1.068~5.806,P=0.0346),而且,慢性苯中毒危险性与彗星尾长差之间存在显著性的趋势关系(P=0.0024).3AB指数<0.20的研究对象发生慢性苯中毒的相对危险性与3AB指数≥0.20的研究对象无显著性差异.结论DNA链水平的修复能力与慢性苯中毒的发生关系密切,修复能力越差,发生慢性苯中毒的危险性越高.本研究未证明染色体水平的修复能力与慢性苯中毒的联系.
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商丘市医务人员工作场所暴力与工作能力的相关分析
目的探讨医务人员遭受工作场所暴力和工作能力之间的关系,为预防工作场所暴力的发生、提高工作能力提供依据.方法采用工作场所暴力量表(WVS)和工作能力指数量表(WAI)对河南省商丘市507名医务人员遭受工作场所暴力的情况和工作能力进行了调查,并用自制表格调查所有研究对象的一般情况.结果30~44岁年龄组医务人员工作场所暴力得分高于45岁及45岁以上年龄组,护士组工作场所暴力得分高于医生和医技人员组(P<O.05);文化程度为初中及以下者工作能力得分比其他文化程度者低(P<O.05);遭受工作场所暴力与工作能力呈负相关,相关系数为-0.250(P<O.01);多因素分析表明,在控制了其它因素后,遭受工作场所暴力是工作能力下降的危险因素,其OR值为8.44.结论遭受工作场所暴力对医务人员的工作能力有影响,应采取措施预防和控制工作场所暴力的发生.
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长春花碱和秋水酰胺诱导TK6和TK6-E6细胞TK基因突变比较研究
目的比较TK6和TK6-E6人类淋巴母细胞TK基因突变试验对2种纺锤体毒物--长春花碱(VBL)和秋水酰胺(CCM)检出情况的差异.方法用长春花碱和秋水酰胺处理TK6和TK6-E6细胞24小时,进行常规TK基因突变试验,检测细胞毒性及tk位点突变频率.结果随着长春花碱和秋水酰胺浓度的增加,TK6和TK6-E6细胞的相对存活率(RS%)和相对悬浮生长率(RSG%)均降低.相同剂量下,TK6-E6细胞的RS%和RSG%均比TK6高.长春花碱和秋水酰胺对TK6和TK6-E6细胞均有致突变性,TK6-E6细胞的诱发和自发突变频率高于TK6,而除了突变频率(MF)中CCM 5.0ng/ml组和SC%中CCM 0.625ng/ml组外,其它相同剂量下,TK6-E6的MF和慢生长集落百分比(SC%)均高于TK6细胞(P<0.05).结论两种细胞都可用于TK基因突变试验,但由于TK6-E6所用细胞量少,倍增时间较短,故建议使用TK6-E6细胞.
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酒精抑制脑星形胶质细胞胶原纤维酸性蛋白和S100蛋白的表达
目的研究酒精对脑星形胶质细胞GFAP和S100蛋白表达的影响.方法对体外分离培养的大鼠胚胎脑星形胶质细胞分别施以不同剂量酒精(2、5和20mmol/L),染毒7天后,以免疫细胞化学法观察酒精对星形胶质细胞GFAP和S100蛋白表达的影响.结果随酒精剂量增加,脑星形胶质细胞GFAP和S100蛋白表达强度下降,高剂量组细胞数量轻度减少.结论提示酒精能抑制星形胶质细胞GFAP和S100蛋白表达.酒精诱导的星形胶质细胞蛋白表达异常可能是酒精引起中枢神经系统发育异常的主要机制之一.
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六价铬诱导L-02肝细胞凋亡与线粒体功能损伤的关系研究
目的研究六价铬[Cr(Ⅵ)]对L-02肝细胞凋亡率和线粒体功能的影响,初步探讨二者之间的关系.方法选取0、2、4、8、16、32和64μmol/L Cr(vⅥ)溶液处理L-02肝细胞6h,采用流式细胞分析检测细胞凋亡率;荧光分光光度法检测线粒体膜通透性转运孔(PTP)的开放程度和线粒体膜电位(△ψ,m)的变化.结果2~64μmol/L Cr(Ⅵ)对L-02肝细胞具有细胞毒性,随着Cr(Ⅵ)浓度的增加L-02肝细胞凋亡率升高;线粒体PTP开放程度增加;线粒体膜电位(△ψm)降低,且与对照组比较差异均有显著性(P<0.05).结论Cr(Ⅵ)诱导L-02肝细胞凋亡与线粒体功能损伤有关.
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吹扫捕集气相色谱质谱法测定饮用水中挥发性有机物
目的建立吹扫捕集气相色谱质谱联用测定饮用水中挥发性有机物的分析方法.方法采用吹扫捕集富集水中挥发性有机物,解吸后用GC/MS测定,选用特征离子定量.结果在36分钟内60种VOCs有效分离,在0μg/L~12μg/L浓度范围内,51种目标化合物的相关系数大于0.995,方法检测限范围为0.021μg/L~0.70μg/L,样品加标回收率在90%~120%之间,响应因子的相对标准偏差小于30%.结论该方法灵敏度高、准确度好,适合于饮用水中挥发性有机物的分析测定.
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水中大肠菌群快速检测方法-酶底物法与多管发酵法的比较
目的比较酶底物法与多管发酵法用于水中大肠菌群的检测方法的优劣和结果的一致性.方法应用加标试验和实际水样检测的方式,比较酶底物法与传统的多管发酵法用于水中大肠菌群检测结果的一致性,以及假阳性率.结果酶底物法与多管发酵法用于水中大肠菌群检测结果具有一致性(P=0.059),假阳性率无统计学意义的差别(P=1.000).结论酶底物法可以用作评价水质微生物污染的标准方法.
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两种空气氟含量测定方法的对比分析
目的对2种先后用于地方性氟中毒病区空气氟监测的采样及测定方法进行比较,了解它们的差异和内在关系.方法在病区现场随机抽取22户,以2种方法使用2种采样器,同时、等距、等高、尽可能靠近、但又不致产生相互影响的位置采集空气样品34份,然后按各自方法进行实验室分析和对所得结果进行统计学分析.结果两方法间显著性检验P>0.05,相关系数r=0.7752,其显著性检验P<0.01;国标法(X)与手册法(Y)间的回归方程为:Y=1.1623X+0.0008,回归系数的显著性检验P<0.01.结论两种方法间不存在显著性差异;它们呈中度正相关关系;且有直线回归关系;空气中氟化物附着在不同粒度悬浮颗粒上的氟分布应不相同;国标法更适用于燃煤污染经多途径对人群造成综合危害的研究;而手册法则对空气氟经由呼吸道对人群造成危害的研究更为有效,手册法测定结果一般而言略高于国标法.
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茶色素对肾损伤诱发高血压性心肌肥大的预防作用及其机制研究
目的研究茶色素对肾损伤诱发高血压性心肌肥大的预防作用及其涉及内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和一氧化氮(NO)的机制.方法雄性SD大鼠通过部分肾切除造成高血压性心肌肥大模型,分别给予含0.10%和0.25%茶色素的水自由饮用,持续4周.同时设置模型对照组和假手术组.测定受试物给予前后大鼠的动脉收缩压和给予后大鼠心脏重量以及血清NO、一氧化氮合酶(NOS)、AngⅡ和ET浓度(RIA法).结果4周后,模型对照组大鼠心脏重量(1.71±0.23)g,心脏系数(0.42±0.06),左心室重量(1.19±0.22)g,左心室系数(0.29±0.06),AngⅡ浓度(748.91±154.80)pg/ml,ET浓度(175.66±49.55)pg/ml,NO浓度(21.1±7.0)μmol/L.经0.10%和0.25%茶色素处理的大鼠心脏重量分别为(1.54±0.13)g和(1.54±0.14)g,心脏系数分别为(0.38±0.04)和(0.39±0.04),左心室重量分别为(1.07±0.11)g和(1.09±0.11)g,AngⅡ浓度分别为(466.18±111.44)pg/ml和(537.55±61.09)pg/ml,ET浓度(88.92±27.20)pg/ml和(97.11±26.74)pg/ml,NO浓度为(24.2±11.9)μmol/L和(33.0±22.5)μmol/L,与模型对照组比较均有显著性差异(P<0.05).结论茶色素能预防部分肾切除所引起的心肌肥大,这种作用与茶色素对ET、AngⅡ以及NO的调节有关.
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离子色谱法测定煤中总硫
目的建立简便、快速煤中总硫的测定方法.方法以过氧化氢为吸收液,将热解气中的硫氧化物转化为SO2-4,选用抑制型电导检测器,DionexAS12A阴离子分析柱,以碳酸盐作为淋洗液,进样体积50μl.通过测定吸收液中SO2-4的浓度,计算出煤中总硫的含量.结果本方法与国家标准方法GB/T214-1996高温燃烧中和法进行了比较,其相对标准偏差小于2%.当硫酸根含量在0~15μg/ml范围时,具有良好的线性关系(r=0.9998),对国家煤标准参考物质GBW11104c和GBW11110d进行了测定,RSD分别为1.92%和0.47%.结论离子色谱法测定煤中总硫具有方便,准确,快捷的优点,可用于煤炭中总硫的测定.
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香烟烟雾的氧化应激效应及褪黑素的干预作用
目的通过体外实验了解香烟烟雾作用下细胞的氧化应激状况,并了解褪黑素对这种状况的影响.方法选择(200±20)g雄性Wistar大鼠,无菌采血并分离淋巴细胞.用pH值7.2的磷酸盐缓冲液(PBS)作为吸收液制备0.2支/毫升的水溶性香烟烟雾溶液(CSS),并以终浓度8×10-3支/毫升的香烟烟雾溶液作用于细胞.前期试验中用0.05和0.1mmol/L褪黑素预处理香烟烟雾作用的细胞,发现0.1mmol/L的褪黑素增加细胞活力的作用比0.05mmol/L强,因此作为后续试验的干预浓度.实验中以RPMI 1640为培养液,在37℃、体积分数5%CO2的条件下孵育细胞.实验设对照组、褪黑素作用组(MLT组)、香烟作用组(CSS组)、褪黑素与香烟共同作用组(MLT+CSS组).用0.1mmol/L MLT对MLT和MLT+CSS组细胞预处理2h后,在CSS和MLT+CSS组细胞中加入香烟烟雾溶液,再孵育2h.用Alamar Blue摄入法检测细胞活力,彗星试验检测DNA损伤,Nitrite法测定SOD活性,TBA荧光法测定脂质过氧化水平(LPO),考马斯亮蓝G250测定蛋白质水平以校正SOD及LPO值.结果CSS组彗星尾长以及LPO水平均高于对照组,SOD活性低于对照组,差异显著.与CSS组相比,MLT+CSS组细胞活力增加,DNA损伤减轻,SOD活性增强,LPO水平降低,差异显著.结论体外实验中,8×10-3支/毫升的香烟烟雾溶液处理细胞出现氧化应激反应.0.1mmol/L MLT能增强细胞活力,增加SOD活性,减轻脂质过氧化和DNA损伤,有效拮抗CSS的氧化损伤作用.
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十种生物性物质中六种矿物质的分析评价
应用原子吸收分光光度法(GB/T5009.13、14、90、92-2003),对10种生物性样品中的锰、铜、铁、锌、镁、钙6种矿物元素进行了重复测定,并同时测定2种标准参考物质来控制实验室分析的准确性.在结果的表达方式上,应用不确定度来评价生物样品中的矿物元素含量.结果给出了10种生物物质的6个矿物元素的含量分布,为其作为标准参考物质提供了基础数据.
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铅对大鼠成骨细胞Fas和Bcl-2基因表达的影响
目的研究铅对乳鼠成骨细胞凋亡相关基因表达的影响.方法分离并培养原代成骨细胞,加入不同浓度(0、1、10、100μmol/L)Pb(Ac)2,培养72h,用免疫组化染色法检测成骨细胞凋亡相关基因表达的情况.结果铅处理组成骨细胞Fas基因表达增加(r=0.78),而Bcl-2基因表达减少(r=-0.82).结论铅对成骨细胞的影响可能与Fas和Bcl-2基因表达改变有关.
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青岛城区餐饮单位食物中毒、卫生投诉事件相关因素的分析以及空间分布描述
目的研究分析影响食物中毒发生以及可能存在食物中毒隐患的餐饮卫生投诉事件的因素.方法对青岛市重点城区14家街道办事处餐饮单位2002~2004年食物中毒以及卫生投诉事件进行收集分析,并利用地理信息系统(GIS)研究其空间分布.使用NCSS Data统计软件对可能与餐饮单位食品卫生事件发生相关的因素进行统计学研究,并在ARCVIEW3.2a软件中将各个街道办事处有关信息标记到电子地图上,直观地反映3年间不同区域食品卫生事件的空间分布.结果气温、气湿以及日照时数是影响食物中毒发生的重要因素,餐饮单位卫生管理状况、收入情况以及卫生设施配备与餐饮投诉发生明显相关,餐饮单位平均客流量以及区域流动人口数与单位卫生管理合格率相关.结论应用GIS可较为方便、直观地对不同区域餐饮业食品卫生状况进行分析描述.
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中国居民膳食锌元素的摄入状况及变化趋势
目的描述2002年中国居民矿物质锌的摄入状况、食物来源、1992~2002年间的变化情况和收入水平对锌摄入量的影响.方法利用"1992全国营养调查"和"2002年中国居民营养与健康调查"中的膳食调查资料,应用SAS软件进行统计分析.结果中国居民平均锌摄入量为11.3mg,存在明显的城乡差异、性别差异和年龄差异.城市居民略高于农村居民(11.5mg和11.2mg).六类地区中一类农村锌摄入量高为11.7mg,三类农村低(10.6mg);男性锌摄入量高于女性;2~44岁随年龄增加锌摄入量呈逐渐增加的趋势,45岁后逐渐下降.和1992年相比,中国城市居民膳食锌摄入量明显下降.中国六类地区人群的锌摄入量均随收入水平增加呈明显的上升趋势.结论中国居民中普遍存在锌摄入不足的"潜在饥饿"问题,应该从调整膳食结构入手,增加锌的动物性食物来源.
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职业紧张与多发多种心血管疾病关系的研究
目的探讨职业紧张在多发多种心血管疾病发病的作用与特点.方法选择不同职业,工龄≥3年男性在职员工964名为研究对象,比较职业紧张对同时患高血压、冠心病组(称多发多种心血管疾病组,下同)与仅患高血压组或冠心病组以及对照组中的影响.结果(1)职业紧张是多发多种心血管疾病的危险因素,其职业紧张评分(x=216.53±30.41)以及危险性(RR=3.34)较仅患高血压(x=194.43±31.0、RR=1.56)或仅患冠心病(x=197.04±30.96、RR=2.34)高;(2)无论是多发多种心血管疾病组,还是仅患高血压组或冠心病组其发病率与职业紧张评分呈剂量反应关系,且前者增加的幅度高于后两者;(3)多发多种心血管疾病组与冠心病组,在调整年龄后,工龄>20年时,高、中度职业紧张暴露组发病率明显升高,工龄>30年,与低度职业紧张暴露组有显著性差异(P<0.01),而高血压组提早了10年.结论心血管疾病的发生与职业紧张间有密切联系且这种联系是在长期慢性职业紧张刺激下发生的.
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西北地区某炼油企业职工健康体检调查分析
目的了解职业危害物对人体的危害现状,以便采取防治措施.方法对炼油企业空气环境中危害物进行监测,按国家标准进行评价,并与1997年监测结果进行比较;对职工进行健康状况调查,并与无H2S、TSP和NMTH污染区域的职工作对比.结果环境空气中H2S、TSP、NMTH超过了国家标准,与1997年相比,除了TSP之外,H2S、NMTH的浓度均增高;炼油企业职工的神经系统、视觉系统、呼吸系统、心血管系统、耳鼻喉的疾病患病率(分别是18.72%、15.67%、29.33%、10.61%、45.35%)均显著高于对照组职工(分别是7.40%、9.48%、17.45%、5.88%、30.55%),差异均有高度显著性(P<0.001).结论该炼油企业3种职业危害物在空气中超标,员工的健康状况受到职业危害物的不同程度影响.
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中国南北方居民一年食物摄入量的变化趋势研究
目的了解中国南北方居民一年内食物摄入量的变化,比较南北方之间、城市与农村之间食物种类和摄入量的差异.方法采用24小时膳食回顾调查法对中国典型的北方农村和南方城乡合计约300名健康成年居民进行膳食调查,一年内共调查6次,每2个月一次,每次连续调查3天,共收集18天24小时膳食回顾信息.结果除蔬菜、水果和薯类外,南北方居民一年内不同季节食物摄入的种类季节性差异不大.南北方居民一年内不同季节食物摄入量存在显著差别,北方比南方、农村比城市季节性差异大.我国农村居民目前仍以植物性食物为主,尤其是北方农村居民.结论南北方居民食物摄入的种类季节性差异不大,但食物摄入量存在显著差别;农村地区若避开1月份(农闲)季节和7月份(农忙),其它月份进行的营养调查结果均可代表调查人群平常的膳食摄入情况;城市地区在一年的任何月份进行调查,对结果的影响都不大.
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手机辐射与健康
随着手机通信业的发展,手机辐射与健康的关系日益受到公众的广泛关注.关于手机产生的电磁场对肿瘤、学习记忆、主观症状、血脑屏障的影响情况,国外进行了大量研究.本文综述了国外对这一问题的研究进展,分析了手机辐射影响健康的作用机制.
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肠出血大肠埃希菌O157:H7与食品安全
肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)主要包括O157:H7和O26:H11,其中O157:H7是出血性肠炎的主要致病菌,自1982年由美国首次报道了肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7引起的出血性肠炎的爆发以来,EHEC的感染已经成为世界性问题[1].世界卫生组织已将O157:H7列为新的食源性疾病病原菌.尽管EHEC已被研究了近20年,但对由该菌引起的致命的溶血性尿毒综合症(HUS)和血小板减少性紫癜(TTP)仍没有有效的治疗方案.
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食品中丙烯酰胺的测定方法
2002年4月瑞典研究人员发现淀粉类食品在高温加工过程中产生大量丙烯酰胺.由于丙烯酰胺具有神经毒性、遗传毒性和致癌作用,这一发现引起了国际社会的高度重视,各国科学家分别对本国食品进行广泛分析,从而使食品中丙烯酰胺的测定方法取得了很大的进展.本文综述了食品中丙烯酰胺测定方法的进展,包括样品的提取、净化、衍生化、色谱方法及其和质谱联用技术的进展.
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丙烯酰胺的毒性研究
丙烯酰胺作为一种常见的化工原料,在工业中广泛应用,是职业环境中的一种污染物.近年来,科学家提出丙烯酰胺存在于高温加热的淀粉类食品中,成为非职业人群暴露的一个重要途径,引起了有关各方的关注.本文就丙烯酰胺可能引起的神经、生殖、胚胎发育毒性以及与肿瘤的关系做一综合报道.
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膳食植物成分对肝脏药物代谢酶的影响
一些蔬菜水果、植物化学物质等膳食成分可以对体内药物代谢酶产生影响,从而可能促进致癌物在体内的代谢而发挥化学防癌作用;或者影响药物在体内的代谢,导致药物过量毒性增加、降低其药理作用而产生不良影响.主要就植物性膳食成分与体内药物代谢酶之间的作用研究进行综述.
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广州市售贝类麻痹性贝毒和腹泻性贝毒污染状况分析
目的对广州市售双壳经济贝类麻痹性贝毒(PSP)和腹泻性贝毒(DSP)污染状况进行为期一年的抽样调查,了解其食用安全性.方法采用AOAC推荐的小鼠生物检测法进行PSP和DSP的毒力测定,采用HPLC进行PSP成分分析,根据FAO、日本和欧盟水产食品卫生要求及我国渔政渔港监督管理局制订的贝类安全食用标准对贝类水产品的食用安全性进行评价.结果在所调查的7种贝类中,有2种染有PSP,毒素含量在安全食用范围内,毒力大小随季节而变化,春冬两季含量相对较高;7种贝类中有6种共计36个样品染有DSP,有10个样品毒素含量超出安全食用标准,春冬两季染毒率较高.结论广州市售贝类PSP含量和检出率整体水平较低;DSP检出率稍高,毒素含量也较高,应引起有关部门的关注,加强DSP监测工作.
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13岁儿童肥胖发生相关因子与青春期发育相关激素分泌及其关系研究
目的分析儿童肥胖形成中肥胖发生调节因子及与青春期发育相关激素的变化,探讨这些激素在青春期儿童肥胖形成中的变化特点及其相互关系.方法以78例肥胖的13岁儿童和84例同岁正常对照儿童为研究对象,以放射免疫法测定血中食欲素(orexins)、瘦素(leptin)、胰岛素(insulin)及睾酮(T)、雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)等浓度,计算骨龄(BA).结果肥胖儿童血中leptin、insulin浓度显著高于对照组浓度(P<0.01);肥胖儿童血中OrexinA浓度显著低于对照组浓度(P<0.01);肥胖男生T浓度显著低于对照组,肥胖女生E2、LH浓度显著高于对照组(P<0.01);男女肥胖儿童骨龄明显大于对照组,且随着骨龄的增大血中leptin,LH含量明显增加;男女肥胖与正常儿童LH与FSH之间、leptin与insulin,C-肽,E2之间均存在正相关关系(P<0.01);对照组男生LH、FSH与E2存在正相关关系(r=0.373、0.314,P<0.05);leptin与T存在负相关关系(r=-0.423)P<0.01,与FSH存在正相关关系(r=0.308,P<0.05);对照组女生leptin、LH与E2均存在正相关性(r=0.585、0.647,P<0.01);男女肥胖组LH、FSH与T,E2之间均未发现相关关系,肥胖男生leptin与T呈负相关关系(r=-0.574,P<0.01).结论肥胖儿童相对与正常儿童血中leptin,orexina,insulin和T,E2,LH浓度发生了明显变化,肥胖儿童高浓度leptin水平可使体内T,E2,LH浓度水平发生变化,影响肥胖儿童的青春期发育.
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锌对Caco2细胞ZIP4 mRNA表达的影响
目的研究锌对Caco2细胞ZIP4 mRNA表达的影响及其规律.方法通过锌特异螯合剂TPEN建立低锌Caco2细胞模型,RT-PCR法获得ZIP4 cDNA片断,10μmol/L TPEN培养基诱导后,分别检测0、2、4、6、8和10h时点ZIP4 mRNA的表达,及0、2.5、5、7.5、10μmol/L TPEN培养基诱导6h,检测各浓度组ZIP4mRNA的表达.结果RT-PCR获得单一条带的片断,大小与设计一致,获得正确的ZIP4 cDNA片断,随着低锌时间的增加,ZIP4 mRNA表达也升高,6h达到峰值;随着TPEN浓度的升高,ZIP4 mRNA表达也随之升高.结论ZIP4mRNA表达受锌的调控,提示可能参与小肠对锌的吸收.
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高效液相色谱法测定化妆品中12种防腐剂
目的建立化妆品中防腐剂HPLC测定方法.方法样品经甲醇超声提取后,使用C18柱分离,HPLC-PDA检测.以甲醇为流动相A,0.02mol/l乙酸铵水溶液为流动相B,高纯水为流动相C梯度洗脱,流速为1ml/min,检测波长为280nm.结果在给定浓度范围内各防腐剂的峰面积与浓度具有良好的线性关系,除苯甲酸r=0.9950,山梨酸r=0.9981外,其它各防腐剂的r>0.9995.添加一定浓度的防腐剂标准品测定其平均回收率为81.4~132.5%,相对标准偏差为0.31~7.63%(n=6).结论本方法可同时测定12种防腐剂,分离效果好,干扰少,方法简便、快捷,准确度高,重现性好,可用于多种防腐剂的同时检测.
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不同种类农药染毒对小鼠跳台试验的影响
农药是常见的化学毒物.化学毒物对神经行为功能的影响已引起人们重视,但农药对神经行为功能的影响的报告较少.本研究选择丙溴磷、氰戊菊酯、灭多威作为有机磷类、拟除虫菊酯类、氨基甲酸酯类农药的代表药物,分别以不同剂量对小鼠进行染毒,并对小鼠进行染毒前后的跳台试验,以探讨这3种常见农药对小鼠学习记忆功能的影响.
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石墨炉原子吸收光谱法测定水源水、饮用水中痕量钛
钛在生活饮用水卫生规范的检验方法有催化示波极谱法、水杨基荧光酮分光光度法.催化示波极谱法需要配制一定的化学试剂,严格控制pH值,生成电活性配位化合物,于峰电位产生极谱峰,操作技术有一定的难度;水杨基荧光酮分光光度法操作较烦琐,灵敏度偏低.我国饮用水源水中有害物质限值钛为0.1mg/L.石墨炉原子吸收光谱法用于钛的检测时,不需前处理、方法简单,用进口热解涂层石墨管直接测定水样中痕量钛,钛的检出限为0.020mg/L.
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低pH值条件下叙利亚地鼠胚胎细胞体外转化试验的研究
叙利亚地鼠胚胎(Syrian hamster embryo,SHE)细胞体外转化系统是一种有效的体外检测化学物潜在致癌性的细胞转化系统[1],但是传统的SHE细胞转化试验在用于致癌物的常规筛选方面存在一定的困难.近年来,国外实验室采用低pH值条件下培养SHE细胞获得成功,使致癌物的检出率有所增加[2].本实验室采用低pH值条件下培养SHE细胞,以苯并(a)芘为受试物,探讨研究SHE细胞体外转化系统的建立.
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岛津公司独特的质谱数据库软件——Compound Composer同时筛查近600种有害化学品
在GCMS分析中,由于仪器间的差异和仪器状态的不同,样品的保留时间、响应值会有不同,所以绝大多数定量分析时必须通过分析标准样品,对目标化合物进行保留时间确认并制作相应的工作曲线.随着日本肯定列表制度的引入以及我国食品安全法规的不断完善,待检测残留农药及有害化学品的数量在不断增加,单一标准样品的获得以及配制、保存标准样品所花费的大量人力财力,使我们的检测部门越来越难以承受.
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婴幼儿配方粉生产企业食品安全保障体系概要
目前食品安全保障(HACCP)体系被公认是安全有效的食品安全保障体系,本文概要介绍HACCP体系在婴幼儿配合粉生产过程中的应用.
年 | 期数 |
2019 | 01 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |
1999 | 01 02 03 04 06 |