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食品微生物病原菌研究
一、肠炎弧菌生理特性肠炎弧菌又称为副溶血性弧菌,其生物学分类属于细菌界、变形菌门、变形菌纲、弧菌目、弧菌科、弧菌属.其为一种革兰氏阴性兼性厌氣性菌,菌体呈笔直的短杆状,而非典型弧菌的弯曲状,长度约1.4-2.6m,宽度约0.5-0.8m,菌体除极鞭毛外还有许多细的侧鞭毛,不会形成芽孢,具有美膜,是常见的引起食物中毒之致病菌.
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金黄色葡萄球菌两种保存方法的比较
用超低温保存法与传统法进行比较,寻找更适合金黄色葡萄球菌保存的方法,达到长期保存存活率高和保留细菌生物学特性的目的.金黄色葡萄球菌是一种革兰氏染色阳性球形细菌,其直径0.4-1.2um,大小不一,平均直径约为0.8um.显微镜下排成葡萄串状,无芽孢、鞭毛、荚膜,在陈旧培养物中,衰老的菌体常转为革兰氏阴性.
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食品中大肠杆菌检测方法
大肠杆菌是人和许多动物肠道中数量多且主要的一种细菌,能运动,周身鞭毛,无芽孢,主要生活在大肠中,能发酵多种糖类产气、产酸,是人和动物肠道之中的正常栖居菌。大肠杆菌其代谢活动还能对蛋白质分解产物的微生物生长予以抑制,从而减少其对人体的危害。
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小鼠精原细胞体外分化为精子细胞的研究
目的 探讨在辅以外源生殖激素混合培养的小鼠睾丸细胞中,精原细胞向精子细胞的转化.方法 采用7~8 d龄小鼠睾丸组织,以组合酶消化法制备睾丸细胞,在含重组卵泡刺激素(r-FSH)和睾酮的培养基中进行体外培养;定期观察细胞的生长和形态变化;用分子生物学和流式细胞技术对生长各阶段细胞进行分析.结果 培养5 d即可观察到形态与大小类似于圆形精子细胞,7 d后可见带有鞭毛与变形的精子细胞;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果显示,培养前细胞的睾丸特异蛋白激酶(TESK1)与鱼精蛋白2(Prm2)mRNA表达阴性,培养9与17 d细胞TESK1与Prm2 mRNA表达均阳性;DNA倍体分析显示,培养5 d细胞有单倍体峰出现,并随培养天数增加而增加.结论 在体外混合培养的小鼠睾丸细胞中加入外源生殖激素可以使精原细胞转化为精子细胞.
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霍乱弧菌噬菌体VP4受体成分的分析
侵袭细菌的噬菌体可以被该菌株的细胞壁提取物所抑制,既细菌的提取物与噬菌体颗粒混合培育后,如果噬菌体与有受体活性的细菌提取物发生不可逆作用,就不能再感染细菌.本项研究选育鞭毛发育良好的霍乱弧菌菌株,利用有鞭毛的细菌在含有0.1%石炭酸琼脂培养基上培养可以失去鞭毛的特性,选育鞭毛发育不良的菌株.提取上述两种菌株的脂多糖和外膜蛋白,并分别与噬菌体VP4钝化作用.通过噬斑计数测定,比较钝化作用的差异,分析VP4的受体成分.
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口腔幽门螺杆菌感染的研究
幽门螺杆菌(helicobacter pylori简称Hp)是一种营养要求高,微需氧的革兰氏阴性细菌.研究表明Hp是慢性活动性胃炎和胃十二指肠溃疡的主要病因,是人类胃癌的第一类致癌因子.Hp的致病因素包括鞭毛、尿素酶、粘附蛋白和毒素等.近来,口腔中Hp的存在逐渐引起人们的重视.
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幽门螺杆菌鞭毛研究概述
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori Hp)感染是慢性胃炎、消化性溃疡甚至胃癌的主要致病因素.Hp致病机制中动力起着关键定植作用,鞭毛作为细菌动力器官及致病因素应该被重视.Hp鞭毛的形态学、分子生物学、免疫学的研究从一定程度上初步揭示了鞭毛在致病机制中的定植作用,但Hp鞭毛蛋白及基因是否和疾病严重性或类型有相关性还不明确.本文就近年来这方面研究作一简要概述.
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水中幽门螺杆菌的球形变异及其致病力
幽门螺杆菌(Hp)的传播主要是经口-口和粪-口途径〔1〕。由于球形Hp对环境抵抗力强,在水中可存活较长时间,推测球形Hp可能是感染传播中的重要环节。然而,Hp在水中发生形态变异后,是否仍有致病力?迄今未见报道。本研究将Hp置于水中使之发生球形变,进而检测该球形Hp的鞭毛、尿素酶活性、对上皮细胞的粘附性以及决定后两种毒力的基因,以探讨水中球形Hp是否存在与定居机体有关的毒力及感染机体的可能性。
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固体培养和液体培养对铜绿假单胞菌双鞭毛影响的比较
铜绿假单胞菌属于单端双鞭毛菌,而不是单端单鞭毛菌,这一发现是将菌种接种在哥伦比亚羊血琼脂平板上培养得出的[1].本文研究证实铜绿假单胞菌液体培养双鞭毛细胞数与单鞭毛细胞数的比值高于固体培养.
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LTB-hpaA融合基因原核表达系统的构建及其产物免疫性鉴定
黏附素(HpaA)是幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)鞭毛鞘膜蛋白,几乎存在于所有的Hp菌株表面,序列高度保守,可作为基因工程疫苗的候选抗原.本文构建了ltB-hpaA融合基因原核表达系统pQE32-ltB-hpaA-E.coli M15,并用SDS-PAGE、Western blot和GM1-ELISA分别证实了LTB-HpaA重组蛋白(rLTB-hpaA)表达和免疫性.
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细菌鞭毛镀银染色法的创新
目的发明一种新的细菌鞭毛镀银染色方法. 方法染色媒染剂由A、B 2种溶液组成,A液是酸化的FeCl3溶液,B液是含有甲醛的丹宁酸溶液,A、B液混合后,微加热,染涂片50?s,洗净涂片后镀银染色.共有19属34种228株细菌,每株菌都进行固体培养和液体培养进行鞭毛染色,并采用West氏评分法对鞭毛染色质量进行评价. 结果鞭毛形态及其在菌体的位置极易观察.228株细菌获得良好的鞭毛染色质量,血琼脂平板培养平均每株菌获得4.7分,肉汤培养获得4.6分.与一些肠杆菌株不同,100株非发酵菌血琼脂平板培养鞭毛染色均获得5分,而99株肠杆菌肉汤培养鞭毛染色获得4分以上.一些弧菌科细菌鞭毛位置分布因这2种培养方法的不同而有差异.并发现1株非O1群霍乱弧菌有单侧毛和亚极端毛. 结论这种鞭毛染色方法操作简单、快速,试剂稳定,重复性好.由于可靠性好,可以作为常规方法.非发酵菌适合于固体培养进行鞭毛染色获得佳效果,液体培养对于一些肠杆菌鞭毛染色更为适合.
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无迁徙生长碳青霉烯耐药奇异变形杆菌耐药机制及分子分型研究
目的:探讨无迁徙生长碳青霉烯耐药奇异变形杆菌耐药机制及分子流行病学特点。方法收集2013年1月至2014年12月武警浙江总队杭州医院临床分离的无迁徙奇异变形杆菌,通过半固体培养及鞭毛染色试验观察菌株动力及鞭毛;采用脉冲场凝胶电泳( PFGE)分析菌株之间同源性;利用表型确证试验以及PCR扩增测序明确耐药基因型;运用S1-PFGE联合Southern印迹杂交及质粒电转化试验对碳青霉烯耐药基因进行定位,并分析耐药基因周围环境。结果共收集无迁徙生长奇异变形杆菌42株,对亚胺培南与美罗培南耐药率分别为57.1%和52.4%;其中碳青霉烯耐药的无迁徙生长奇异变形杆菌24株,PFGE结果提示分为3个克隆型且均携带blaKPC-2基因,菌株动力及鞭毛染色均为阴性;Southern印迹杂交表明blaKPC-2基因分别定位在约为26、55、139 kb不同大小质粒上;部分菌株在携带blaKPC-2基因的质粒上同时携带blaTEM-1、blaCTX-M-65、rmtB等多种耐药基因;携带blaKPC-2基因菌株周围结构显示,其上游含有插入元件ISKpn8,下游则由插入元件ISKpn6-like构成。结论无迁徙生长奇异变形杆菌具有较高碳青霉烯类抗生素的耐药率,产KPC-2型碳青霉烯酶是导致无迁徙奇异变形杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因。碳青霉烯耐药无迁徙生长奇异变形杆菌在我院呈克隆播散趋势,应引起临床高度重视。
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幽门螺杆菌感染与结肠息肉
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种一端有鞭毛的微需氧革兰氏阴性螺旋状细菌,1983年被澳大利亚学者Marshll和Warren发现,1994年被国际癌症研究中心列为Ⅰ类致癌因子.Hp是胃肠道感染常见的病源菌.Hp与上胃肠道疾病关系得到公认.结肠息肉是常见病,为癌前病变[1],Hp与结肠息肉关系近年来受到学者们重视.本文就Hp与结肠息肉关系作一阐述.
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细菌液体培养膜过滤法用于鞭毛染色的研究
目的改良细菌鞭毛肉汤培养基,并建立一种液体培养细菌鞭毛染色的新方法.方法配制新的肉汤培养基,并将该培养基配制成琼脂平板.使用过滤器过滤培养肉汤,取下滤膜制备菌悬液,制备涂片、鞭毛染色、应用离心法和琼脂平板对照比较评价膜过滤法染色效果,每张涂片不同染色部位观察100个细胞,计算鞭毛细胞所占的百分数.结果 22属39种411株细菌使用膜过滤法细胞鞭毛染色率平均 78%,离心法平均 69%,琼脂平板培养平均为71 %.结论该肉汤培养基适合于鞭毛发育适合细菌快速生长,能在培养早期进行鞭毛染色,使用肉汤培养基膜过滤法获得好染色结果比离心方法操作快速、可靠.
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从同一血液标本中检出两株不同颜色的少动鞘氨醇单胞菌
少动鞘氨醇单胞菌Sphingomonas paucimobilis,一端鞭毛,有或无动力.它可引起手术后感染、败血症、急性脑膜炎等疾病,我院在2005年3月从一例高热不退的小儿患者血液中分离出两株不同颜色的少动鞘氨醇单胞菌.在同一血液标本中检出两株不同颜色的少动鞘氨醇不动单胞菌比较少见[1].
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肺泡灌洗液内发现蠊缨滴虫一例
蠊缨滴虫寄生于白蚁、蟑螂肠道内,属于超鞭毛目,缨滴虫砸目,缨滴虫属的单细胞原虫,属于非人畜共患的动物寄生虫.
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幽门螺杆菌的生物学特性及其感染的胃粘膜病理学特点
幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)是在胃内生长的一种常见细菌,目前认为与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌、胃粘膜相关淋巴瘤等疾病均有关系.1 Hp的生物学特性幽门螺杆菌呈"S”形或弧形,革兰染色阴性.新鲜培养物湿涂片在相差显微镜下可见到典型形态和活泼的动力.电镜下菌体呈螺旋形弯曲,长1.5~5.0μm,宽0.3~1.0μm.表面光滑,末端钝圆,一端具有2~6条带鞘鞭毛,长度稍长于菌体,每一鞭毛基部与菌体细胞膜上直径约50nm的圆球状结构相连,内侧有一电子密度降低区域.
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精子鞭毛形态多发畸形患者行卵细胞质内单精子注射治疗的结局分析
目的 分析精子鞭毛形态多发畸形(MMAF)相关的重度弱精子症患者行卵细胞质内单精子注射(ICSI)助孕治疗的临床结局.方法 回顾性分析烟台毓璜顶医院生殖医学科自2011年1月至2016年12月收治的15例MMAF患者的临床数据,行低渗法选择"活"精子行ICSI治疗,匹配同一治疗时间30例因梗阻性无精子症(OA)行ICSI的患者.比较两组患者夫妇双方年龄、体质指数(BMI)、不育年限、获卵数、ICSI卵子数、受精率、卵裂率、可移植胚胎率、优质胚胎率、胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率、单胎率及双胎率差异.结果 15例MMAF患者经过27个ICSI周期,均实现临床妊娠,其中活产11例,自然流产2例,持续妊娠2例.MMAF组与OA对照组在男、女方年龄、BMI、获卵数、ICSI卵子数等基本情况差异无统计学意义(P>0.05),但在不育年限上的差异有统计学意义(P<0.001);MMAF组与OA对照组的ICSI受精率(92.0%比91.6%)、卵裂率(95.4%比96.5%)、优质胚胎率(56.5%比57.5%)、优质囊胚率(23/61比35/94)、胚胎种植率(20/48比35/75)、早期流产率(4/19比8/36)、临床妊娠率(15/27比28/50)、单胎率(10/13比20/25)和双胎率(3/13比5/25)差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 MMAF可能不影响ICSI治疗结局,但遗传缺陷也可以通过ICSI传递,是否选择胚胎植入前遗传学诊断(PGD)应在充分遗传咨询的情况下遵从患者夫妇意愿.
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阴道炎症患者的护理指导
1 滴虫阴道炎1.1 病因滴虫阴道炎是由阴道毛滴虫引起的常见的阴道炎.滴虫呈梨形,体积约为多核白细胞的2~3倍,其顶端有4根鞭毛,体侧有波动膜,后端尖并有轴柱凸出,无色透明如水滴.鞭毛随波动膜的波动而活动.适宜滴虫生长的温度为25~40℃、pH为5.2~6.6的潮湿环境.滴虫滋养体生活力较强,能在3~5℃生存21天,在46℃生存20~60分钟,在半干燥环境中约生存10小时.在pH为5.0以下或7.5以上的环境中则不生长.滴虫阴道炎病人的阴道pH一般在5.0~6.6,多数大于6.0.月经前后阴道p H发生变化,月经后接近中性,故隐藏在腺体及阴道皱襞中的滴虫于月经前后常得以繁殖,引起炎症的发作.其次,妊娠期、产后等阴道环境改变,适于滴虫生长繁殖而发生滴虫阴道炎.滴虫能消耗或吞噬阴道上皮细胞内的糖原,阻碍乳酸生成,以降低阴道酸度而有利于繁殖.滴虫不仅寄生于阴道,还侵入尿道或尿道旁腺,甚至膀胱、肾盂以及男方的包皮皱褶、尿道或前列腺中.
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流体环境中生物适应性的几种表征方式
在流体环境中生存的生物,会形成适应特定环境的外形结构、内部组织、运动模式以及自身物质运行的方式.通过具体例子从宏观和微观生物结构分析了这些特点.在试验分析中加入了定量分析的方法,能够更准确地描述,也能更清楚地看到隐藏在生物内部的这些规律.