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非结核分枝杆菌病的实验室诊断技术进展
目前,非结核分枝杆菌(NTM)病的发病率在全球逐年提高,NTM与结核分枝杆菌均可引起肺部以及其他部位病变,而且临床症状相似,鉴别诊断困难,所以分枝杆菌菌种鉴定对于疾病的诊断、治疗及预后意义重大.传统生化鉴定方法费力耗时,不能很好地满足临床需要.近年来,以免疫层析技术为基础的MPB64抗原胶体金法、以色谱技术为基础的气相及高效液相色谱法、以基因探针、限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCRRFLP)及PCR-基因测序方法为代表的分子生物学技术等各种新技术的引入,为NTM的菌种鉴定提供了更为科学的方法.作者就上述3种技术为基础开展的菌种鉴定方法,综合国内外近年来的文献,介绍了各种方法的原理、应用情况、性能指标等,同时对方法的优点及局限性进行初步评价.相信随着新技术不断完善,能够逐步形成快速可靠、成本低廉的标准化NTM菌种鉴定体系.
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接触烟草烟雾对结核分枝杆菌感染和结核病发病的影响
烟制品是指将烟草植物的叶子干燥后制成的可用于咀嚼、含食或吸食其烟雾的产品,主要包括机制卷烟、自卷烟、湿烟、雪茄、水烟和丁香烟等.烟草烟雾是指将烟制品点燃时释放出来的气雾,包括主动吸烟时吸入的和被动接触他人吸烟释放到空气中的气雾.
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鸟-胞内分枝杆菌复合群肺病的诊断和治疗进展
近年来,非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)病的发病率在许多国家均有升高的趋势.鸟-胞内分枝杆菌复合群(Mycobacterium avium-intracellulare complex,MAC)属于非结核分枝杆菌,易引发MAC肺病.但由于该病的临床表现和影像学缺乏特异性,往往容易造成漏诊、误诊,同时在治疗上也面临疗程长、易反复、易耐药等问题.作者对MAC肺病的诊断及包括大环内酯类在内的一线治疗药物的研究进展进行综述,初步评价大环内酯类药物用于MAC肺病治疗的价值.
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海分枝杆菌感染活化星形胶质细胞对VEGFA表达的研究
目的 研究分枝杆菌感染巨噬细胞后的条件培养基活化星形胶质细胞表达血管内皮生长因子A(VEGFA)作用及其可能的机制.方法 用海分枝杆菌感染小鼠腹腔巨噬细胞后的条件培养基感染星形胶质细胞,采用qRT-PCR及ELISA检测VEGFA mRNA和VEGFA蛋白的表达情况,采用Western blot检测低氧诱导因子(hypoxia induciblefactor,HIF-1α)的表达,ELISA检测加入HIF-1α抑制剂后VEGFA的表达.结果 海分枝杆菌感染巨噬细胞后的条件培养基能活化星形胶质细胞,并在感染后12 h～24 h诱导HIF-1α明显表达,同时随着感染时间的延长,VEGFA表达逐渐增多,24 h达到峰值.使用HIF-1α的抑制剂不能完全阻断VEGFA的合成.结论 HIF-1α可能参与分枝杆菌感染后星形胶质细胞表达VEGFA,且还可能有其他转录因子参与这一过程.
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应用荧光定量聚合酶链反应对疑似结核组织的DNA分析
目的 探讨应用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)对疑似结核组织中结核分枝杆菌检测的可行性.方法 利用荧光qPCR对四川大学华西医院2011至2012年间1000例连续疑似结核组织中特异性结核分枝杆菌复合物IS6110 DNA片段进行扩增.齐-尼抗酸染色作为对照.扩增片段测序后与比对结核分枝杆菌基因序列比对验证其一致性.结果 1000例疑似结核组织中抗酸染色阳性513例,检出率为51.3％；荧光qPCR阳性546例,检出率54.6％.抗酸染色与荧光qPCR的符合率为73.1％.抗酸染色与荧光qPCR同时检测,可提高检出率14.4％.综合抗酸染色和qPCR分析结果,检出结核分枝杆菌外的抗酸染色阳性菌感染病例7例,其中包括3例麻风分枝杆菌感染,4例非结核分枝杆菌感染.结论 荧光qPCR对石蜡组织结核分枝杆菌检测敏感性略高于齐-尼抗酸特殊染色.同时应用两项检查可以提高检出率,并且可排除非结核分枝杆菌感染的漏诊.
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非结核分枝杆菌合并多重耐药菌感染1例分析
对非结核分枝杆菌合并多重耐药菌感染1例分析如下.1 病历摘男,70岁,伤残.2型糖尿病4 a,因褥疮臀部皮肤坏死0.5a,加重15d入院.入院时T38.7℃,右侧臀部皮肤重度溃烂,面积约13 cm×11 cm,深至坐骨缔节筋膜,伤口弥漫脓性分泌物及黑色腐烂坏死组织,并散发阵阵恶臭.在外院经抗炎,降血糖,调节饮食及局部清创换药,3周后效果不佳.入我院查血常规WBC 12.8×109/L,中性粒细胞78.2％,清创后取深部分泌物接种血平板及麦康凯平板,24 h生长两种菌落,经鉴定为大肠埃希菌(ESBLS)和表皮葡萄球菌(MRSA),分别做药物敏感试验;
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全身播散性非结核分枝杆菌感染1例报告并文献复习
目的 探讨非结核分枝杆菌引起全身播散性感染的临床及病理特点,以提高诊断率及对该病的认识.方法 报道全身播散性非结核分枝杆菌感染1例,并复习相关文献进行分析.结果 患者全身多系统组织活检(包括淋巴结、肝、骨髓、肺、胸膜组织)形态学相似,均表现为肉芽肿性炎,特殊染色可见少量抗酸杆菌,符合非结核分枝杆菌的特点.结论 非结核分枝杆菌引起全身播散性感染罕见,确诊主要依靠病理学及微生物学检查,临床与病理均需与结核、麻风及某些淋巴瘤相鉴别,治疗以化疗为主,预后较差.
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结核分枝杆菌感染与难治性不完全性脊髓炎的初步研究
目的 本研究旨在应用抗结核分枝杆菌治疗(ATT)的方法,探索激素治疗无效的脊髓炎的可治性以及探讨ITM 与分枝杆菌感染的关系.方法 本研究是一项前瞻性研究,2003 年1 月至2009 年6 月对67 例难治性脊髓炎患者进行了抗结核分枝杆菌诊断性治疗,排除已知的病因,观察至少1 年.患者接受抗结核诊断性治疗,治疗前后采用美国脊髓损伤协会(ASIA)标准(2000 年修订)评价脊髓神经功能,Barthel 指数(BI)评分评价脊髓损伤患者日常活动能力;Hauser 步行指数(AI)评价患者的行走能力.脊髓磁共振检查对治疗前后的异常信号进行跟踪随访.结果 67 例患者中16 例因治疗无效和药物不良反应退出本研究.完成临床观察51 例,49 例好转,ASIA 运动、感觉功能评分、BI 和AI 评分较治疗前均有较明显改善(P ＜0.01).脊髓磁共振异常信号逐步减少.结论 本研究显示抗结核治疗对大部分难治性不完全性脊髓炎有效,显示分枝杆菌感染可能是一些难治性脊髓炎重要的和被忽视的病因.
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鸟胞内分枝杆菌复合群肺病患者23例临床分析
目的 分析鸟胞内分枝杆菌复合群(MAC)肺病的临床表现和治疗的不良反应.方法 回顾性分析2010~2012年首都医科大学附属北京胸科医院新诊断的23例MAC肺病的临床表现以及9例接受治疗病例的短期疗效.结果 14例男性MAC肺病表现为上叶空洞型,9例女性MAC肺病表现为结节支气管扩张型.MAC肺病的主要影像特点是多发微结节(10/23)、多发支气管扩张(9/23)、树芽征(8/23)、空洞(15/23)、肺实变(5/23)、结节(8/23)和肺体积缩小(8/23).5例含利福布汀方案治疗的患者,3个月后症状改善3例,影像好转2例,痰抗酸杆菌阴转2例,4例含利福平方案治疗的患者,3个月后症状改善3例,影像好转2例,痰抗酸杆菌阴转1例.结论 MAC肺病的主要临床表现形式是上叶空洞型和结节支气管扩张型,前者主要见于男性患者,后者主要见于女性患者.含利福平或利福布汀的治疗方案对患者具有一定疗效.
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播散性放线菌病合并结核分枝杆菌感染一例
播散性放线菌病临床上不常见,同时合并结核分枝杆菌感染的更为罕见[1-2].现报道1例继发于流产术后年轻女性播散性放线菌病合并结核分枝杆菌感染的病例,经过积极的脓液引流、抗放线菌联合四联(异烟肼+利福平+乙胺丁醇+吡嗪酰胺)抗结核治疗痊愈.
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非结核分枝杆菌肺病患者预后观察
目的 观察非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)肺病患者的预后.方法 对2006-2012年收治的67例NTM肺病患者,经治疗6个月后观察治疗效果,再进行1年和2年以上追踪随访.48例经1年以上随访,29例经2年以上随访,观察NTM培养、痰涂片情况.结果 67例患者经6个月治疗后,45例(67.2%)临床症状改善或消失,36例(53.7%)肺部病灶有吸收,28例(41.8%)NTM培养阴性;治疗前涂片阳性的45例患者有34例阴转,在1年和2年以上的随访中,NTM培养、痰涂片的阴转率分别为43.8%(21/48)、66.7%(22/33)和41.4%(12/29)、76.5%(13/17),两者差异有统计学意义(χ2值分别为4.124和5.319,P值分别为0.042和0.021).结论 NTM肺病患者经治疗对临床症状改善、肺部病灶吸收、痰涂片阴转疗效尚可,但NTM培养阴转预后较差.
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快速生长分枝杆菌肺病21例的疗效分析
目的 探讨以克拉霉素和阿米卡星为主要药物的治疗方案对致病性快速生长分枝杆菌(RGM)肺病的疗效.方法 回顾性分析2008年1月至2011年10月在广州市胸科医院就诊的21例RGM肺病患者的临床疗效.治疗药物以阿奇霉素0.5 g/d或克拉霉素0.5～1.0 g/d、阿米卡星0.4～0.6g/d为主,并根据患者的用药史及药敏试验结果制定个体化治疗方案.观察患者治疗6个月的症状改善、影像学和痰菌变化及不良反应.结果 21例RGM肺病患者对阿米卡星和克拉霉素耐药例数分别为9例和5例,少于其他抗结核药物.病灶范围＞3个肺野17例,咳嗽、咳痰21例,痰中带血18例,胸闷、气促15例,发热15例.治疗2周时,21例体温恢复正常,气促症状改善,12例咳嗽、咳痰症状减轻,16例痰中带血症状减轻；治疗6个月时,21例中病灶吸收12例,空洞缩小9例,痰菌转阴8例.对克拉霉素敏感的16例中有11例痰涂片阴性,对阿米卡星敏感的12例中有11例痰涂片阴性.常见不良反应为胃肠道反应、血液系统和肝功能损害等.结论 RGM肺病患者对阿米卡星和克拉霉素的耐药率较低,但以阿米卡星和克拉霉素为主的个体化治疗方案临床疗效并不满意,应寻找新的敏感药物组合成有效的治疗方案.
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呼吸道快速生长分枝杆菌的检出率及与肺部疾病的相关性
目的 研究呼吸道快速生长分枝杆菌(RGM)的检出率及与肺部疾病的相关性.方法 分析首都医科大学附属北京胸科医院呼吸道分泌物中分离的228株非结核分枝杆菌菌种的鉴定结果,初步判断为非结核分枝杆菌的所有菌株使用基因测序方法鉴定至种水平.结合临床资料,参照RGM肺病诊断标准,判断RGM与疾病的临床相关性.计数资料采用x2检验或Fisher精确检验,计量资料采用￡检验,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 非结核分枝杆菌临床分离株中脓肿分枝杆菌和偶发分枝杆菌分别占28.9％(66株)和8.8％(20株),未发现龟分枝杆菌.从具有完整临床资料的32例患者中分离出66株脓肿分枝杆菌,其中包括确诊脓肿分枝杆菌肺病28例,可能脓肿分枝杆菌肺病4例.一次分离出偶发分枝杆菌8例,判断为不符合RGM肺病.确诊脓肿分枝杆菌肺病的患者,分枝杆菌生长指示管法阳性率高于改良罗氏培养法(23/24和18/28).结论 快速生长分枝杆菌是常见的非结核分枝杆菌,呼吸道标本分离出脓肿分枝杆菌往往与RGM肺病相关,分离出的偶发分枝杆菌多不符合RGM肺病.
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马赛分枝杆菌肺病一例并文献复习
目的 分析马赛分枝杆菌肺病的临床特征,探讨其鉴别诊断方法.方法 分析患者的临床表现及实验室检测结果,对其临床分离菌株进行细菌学检查和分子生物学鉴定,采用PCR扩增rpoB和hsp65基因片段和双向DNA测序,并与美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库比对进行菌种鉴定.结果 患者女,72岁,体质瘦弱,因反复出现呼吸道症状而入院,既往多次治疗无效.该病例的临床分离菌株经细菌学检查和分子生物学鉴定确定为马赛分枝杆菌,rpoB和hsp65基因片段测序结果与NCBI数据库马赛分枝杆菌相应片段的同源性分别为100%和99%,结合临床表现确诊为马赛分枝杆菌肺病.药敏试验结果显示该菌株对多种药物耐药,根据药敏试验结果和患者的身体条件确定治疗方案,采用静脉滴注头孢西丁和口服阿米卡星治疗有效.结论 马赛分枝杆菌肺病多发于免疫功能低下人群,其临床和影像学表现与结核病相似,通过实验室细菌学检测和菌种鉴定,可以对二者进行鉴别.
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脓肿分枝杆菌群肺病16例临床表现及文献复习
目的 分析脓肿分枝杆菌群肺病的临床表现和对含头孢西丁治疗方案的疗效.方法 回顾性分析北京胸科医院新诊断的脓肿分枝杆菌群肺病16例的临床表现,以及全疗程克拉霉素和莫西沙星口服治疗,前12周增加头孢西丁和阿米卡星静脉滴注的强化治疗方案的疗效.结果 16例脓肿分枝杆菌群肺病患者中有14例为结节支气管扩张型,1例为上叶空洞型,1例为未分类型；影像学特点表现为多发微结节(14/16)、支气管扩张(14/16)、树芽征(13/16)、空洞(5/16)、肺实变(5/16)、结节(5/16)和肺体积缩小(3/16).5例采用含头孢西丁的强化治疗方案3个月,其中2例症状和影像学表现改善,痰分枝杆菌培养转阴；2例症状和影像学表现改善,但痰分枝杆菌未转阴；1例的症状、影像学表现和痰分枝杆菌培养均未改善,经后续的巩固治疗也未见改善.结论 脓肿分枝杆菌群肺病主要表现为结节支气管扩张型,以多发微结节、树芽征和支气管扩张为主要影像学表现,含头孢西丁的抗生素联合治疗方案对患者有一定疗效.
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脓肿分枝杆菌肺病误诊为肺结核35例临床分析
脓肿分枝杆菌属于快速生长分枝杆菌，曾作为龟分枝杆菌的亚种，随着分子生物学方法用于分枝杆菌菌型鉴定，它被作为独立的菌种存在，除可导致肺病外，还可导致淋巴结、皮肤软组织、骨关节和全身播散性病变，目前尚不清楚其发病率，但其所致的肺病预后极差［1］。脓肿分枝杆菌肺病的症状、病理特点和影像学表现与肺结核相似，但其对抗结核药物具有天然耐药，众多临床研究和病例报道均证实两者的鉴别十分困难，极易造成误诊误治。为提高该病的诊断水平，积累治疗经验，我们对杭州市红十字会医院结核科2010年1月至2015年1月收治被误诊为肺结核的35例脓肿分枝杆菌肺病患者进行临床分析。
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非结核分枝杆菌71株药敏试验结果分析
非结核分枝杆菌(Nontuberculous Mycobacteria, NTM)是指除结核分枝杆菌复合群和麻风分枝杆菌外的一大类分枝杆菌.目前已发现 NTM种类超过150 种,致病性菌种有 50 余种.近年来,NTM感染呈快速增多趋势,已成为威胁人类健康的重要公共卫生问题[1 ].
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非结核分枝杆菌感染流行病学与医院感染防控
非结核分枝杆菌（Non－tuberculous mycobacteria， NTM）广泛存在于环境中，长期被视为污染菌或定植菌。近年来，越来越多的资料显示 NTM 可导致人类疾病，并可引起医院感染与暴发。该文对 NTM 的流行病学及医院感染防控作个阐述。
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Th17细胞在HIV合并结核分枝杆菌感染免疫中的作用研究进展
Th17细胞是新发现的CD4+ T淋巴细胞亚群,因能够特异性地产生白细胞介素17(Interleukin 17,IL-17),遂得名Th17.其发现源于对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,CIA)和实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)这两种自身免疫性疾病的研究.将CIA、EAE小鼠IFN-γ或IL-12基因敲除后,小鼠自身免疫性炎症并未好转反而加重.进一步研究发现,EAE模型小鼠的中枢神经系统存在可产生IL-17的CD4+ T细胞的浸润,将此类细胞转移到健康小鼠体内可导致严重的EAE,进行抗IL-17治疗后可在一定程度上缓解小鼠的自身免疫性炎性反应[1].除IL-17外,Th17细胞还可分泌IL-21和IL-22,通过这些促炎性因子而在抗胞外菌、真菌等感染中发挥作用.通过上述促炎性因子,Th17还可促使IL-6、粒-巨噬细胞集落刺激因子、炎症趋化因子(CXCL1、CXCL2、CXCL5和CXCL8)以及金属蛋白酶类的分泌.近年研究发现,Th17在HIV和结核分枝杆菌的感染免疫中都发挥重要作用,而HIV合并结核分枝杆菌感染是艾滋病防治工作中面临的主要挑战之一,现将Th17在HIV和结核分枝杆菌感染免疫中的作用综述如下.
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注射美容致非结核分枝杆菌感染的治疗
目的 通过清创手术联合药物治疗注射美容致非结核分枝杆菌感染,探讨皮肤软组织非结核分枝杆菌感染的治疗方案.方法 2012年5月至2016年9月,解放军总医院第一附属医院烧伤整形科收治14例注射美容发生皮肤感染在外院长期治疗不愈患者,经手术清创、负压封闭引流,分泌物细菌培养、PCR诊断非结核分枝杆菌,根据药敏结果进行药物治疗.结果 14例患者通过住院规范治疗2～4个月创面愈合出院,出院继续药物治疗12个月,患者均痊愈.随访1～5年,无复发.12例患者面部外观基本正常,遗留轻微瘢痕,2例患者面部手术区皮肤组织凹凸不平,后期组织移植、微等离子束及药物治疗,基本恢复容貌.结论 对注射美容等侵入性操作导致非结核分枝杆菌感染患者,采取合理手术清创联合药物治疗的综合方案治疗非结核分枝杆菌感染能减少继发性损伤.
