首页 > 文献资料
-
新生血管性青光眼患者血清及房水中血管内皮因子和色素上皮衍生因子水平的研究
新生血管性青光眼（nonvascular glaucoma ， NVG）是一种由缺血、缺氧共同作用导致的继发性青光眼，主要表现为虹膜表面及房角有新生血管［1］。NVG是糖尿病视网膜病变的主要并发症，近年发病率呈逐年增高趋势。目前NVG的发病机制尚未阐明，有学者认为多种细胞因子参与了血管生成细胞增殖的调控过程，打破了血管生成刺激因子及抑制因子的平衡，促进了新生血管的形成，终导致了N V G ［2］。色素上皮衍生因子（pig‐ment epithelium derived factor ，PEDF）是目前已经证实的血管生成抑制因子之一，可以抑制多种血管生成诱导剂［3］。血管内皮生长因子（vascular endo‐thelial growth factor ，VEGF）则是目前已知的强效血管生成促进因子，兼具增强血管通透性的作用［4］。生理状态下，PEDF 与 VEGF 保持动态平衡。本研究通过对NVG患者血清及房水中PEDF及VEGF的水平进行检测，以证实两者在NVG发生中的作用。
-
携带肝细胞生长因子基因的减毒沙门菌促血管形成的实验研究
目的：探讨携带肝细胞生长因子（HGF）基因的减毒沙门菌体外促血管形成的效应。方法构建携带 HGF基因真核表达载体的减毒沙门菌菌株（TPH），体外转染人脐静脉内皮细胞（HUVEC）后观察目的基因表达及其增殖活性；评价 TPH的细胞表达上清对鸡胚绒膜尿囊膜血管生成效应的刺激效应。结果构建的 TPH菌株在体外可有效转染 HUVEC并表达有活性的 HGF蛋白，6×105个 HUVEC细胞可表达160~190 ng的 HGF蛋白，和对照组相比，TPH转染组细胞表达上清可明显促进 HUVEC增殖，而且具有剂量-效应关系；TPH 转染组细胞表达上清也刺激鸡胚绒膜尿囊膜小血管生成，其血管数量（133.0±11.5）/cm2明显大于转染 TP的 HUVEC细胞上清组（83.3±5.5）/cm2和对照组（62.7±7.1）/cm2（P<0.05）。结论携带 HGF基因的减毒沙门菌可有效转染 HUVEC并促进细胞增殖，刺激小血管新生，可能在组织创面愈合中起重要作用，在胃溃疡治疗中有潜在的应用价值。
-
Jagged1基因沉默对人胰腺癌细胞SW1990和PANC1血管相关因子分泌及迁移能力的影响
目的 以RNA干扰技术靶向沉默人胰腺癌细胞株Jagged1基因,观察细胞VEGF、Angiopoietin2、bFGF、MMP9的分泌及细胞迁移能力的变化.方法 应用靶向Jagged1的siRNA、对照siRNA(c-siRNA)转染人胰腺癌细胞株SW1990和PANC1,实时PCR法和蛋白质印迹法检测细胞Jagged1 mRNA和蛋白的表达,ELISA法检测细胞培养上清中VEGF、angiopoietin2、bFGF、MMP9的分泌量,Transwell小室观察细胞的迁移能力.结果 SW1990和PANC1细胞均高表达Jagged1基因.15 nmol/L Jagged1 siRNA转染胰腺癌细胞72 h后,SW1990、PANC1细胞的Jagged1 mRNA表达被抑制,分别为c-siRNA组的(59.62 ±2.75)％和(76.96 ±6.16)％,Jagged1蛋白表达几乎完全被抑制.SW1990、PANC1细胞的VEGF分泌量均较c-siRNA组显著减少[(867.93±58.69) pg/ml比(1516.24±37.58)pg/ml,(951.13±120.49) pg/ml比(1413.68±33.56) pg/ml,P＜0.05],但angiopoietin2、bFGF、MMP9蛋白分泌无明显变化.另外,Jagged1 siRNA转染后,SW1990细胞VEGF mRNA表达水平为c-siRNA组的(52.26 ±4.85)％ (P＜ 0.05)；PANCI细胞为c-siRNA组的(59.75±4.91)％(P＜0.05).转染后的SW1990和PANC1细胞的穿膜细胞数分别为(65.25±5.56)、(57.50±8.58)个,较c-siRNA组的( 122.25±11.09)、(112.00±12.52)个显著减少(P＜0.05).结论 人胰腺癌细胞高表达Jagged1,沉默Jagged1基因可明显抑制人胰腺癌细胞VEGF的产生和分泌,并且可降低癌细胞的体外迁移能力.
-
硝酸异山梨酯对大鼠缺血心肌血管新生的影响
目的 观察硝酸异山梨酯对急性心肌梗死(AMI)大鼠缺血心肌组织形态、梗死面积及毛细血管新生的影响.方法 Wistar大鼠90只建立AMI模型后,随机分为5组,分别为正常组,假手术组,模型组,硝酸异山梨酯低剂量组(IDL组)和硝酸异山梨酯高剂量组(IDH组).每组18只.大鼠饲养7、14天后各随机处死9只,截取心肌组织,进行光镜、电镜观察,利用NBT染色法测定心肌梗死面积,应用免疫组织化学法测定Ⅷ因子,进而计算缺血心肌微血管密度(MVD),通过RT-PCR技术检测血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达情况.结果 光镜下观察,缺血区可见炎细胞浸润、心肌肿胀、梗死区纤维化.与模型组比较,IDL组和IDH组7、14天心肌梗死面积明显缩小.MVD明显增加(P＜0.05);正常组、假手术组VEGF mRNA、bFGF mRNA表达有所减少.而IDH组则有所增加.结论 硝酸异山梨酯可明显缩小AMI大鼠梗死面积,促进缺血心肌的毛细血管新生,对心肌缺血损伤具有保护作用.
-
参松养心胶囊促血管新生的实验研究
目的 观察参松养心胶囊对鸡胚绒毛尿囊膜(chick embryo chorioallantoic membrane,CAM)血管新生的影响,探讨该药促进血管新生的可能机制.方法 随机各取15只雄性Wistar大鼠分别制作常规血清和参松养心胶囊血清.建立CAM模型,将60枚存活鸡胚随机分为生理盐水组、空白血清组、血管内皮细胞生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)组和参松养心胶囊组,每组15枚.观察血管新生形态,计数各组CAM上载体周围血管数目,体外培养人脐静脉内皮细胞,应用MTT法测定各组吸光度(A)值.结果 与生理盐水组比较,VEGF组和参松养心胶囊组血管以载体为中心呈辐辏状生长,血管总数明显增多,有显著差异[(33.71±3.36)支和(34.51士3.34)支vs (22.11±2.05)支,P＜0.05].与生理盐水组和空白血清组比较,参松养心胶囊组A值明显增加,差异有统计学意义(1.23±0.21 vs 0.91±0.15和0.96±0.14,P＜0.05).结论 参松养心胶囊具有促进CAM血管新生作用,其机制可能与促进内皮细胞增殖有关.
-
微小RNA-126与心脑血管疾病的研究进展
大量研究表明,非编码RNA在心血管疾病中起到重要作用,在非编码RNA中,微小RNA(microRNA,miRNA)是具有代表性的分子,它是近22个核苷酸序列的RNA,通过不完全互补配对的原则与信使核糖核酸(mRNA)的3'端非翻译区特异性结合,从而使mRNA降解、抑制或者激活,调控体内大约1/3的基因表达.miRNA在生物体内细胞的生长、分化和凋亡过程中扮演着重要的角色,比如我们前期曾报道,miR-221与动脉粥样硬化、缺血性脑卒中等缺血性心脑血管病的发生和发展密切相关[1].因miR-126在心脑血管疾病中的特异性表达,近年来引起了人们的高度关注.
-
类表皮生长因子域7与动脉粥样硬化斑块内血管生成关系
目的 研究类表皮生长因子域7( Egfl7)在动脉粥样硬化斑块内的表达水平和小分子干扰RNA(siRNA)对内皮细胞株血管生长因子表达的影响. 方法 利用免疫组化和免疫荧光染色检测人髂动脉和小鼠无名动脉粥样硬化斑块内Egfl7的表达水平；并利用以Egfl7为靶标的siRNA,通过脂质体将siRNA转入人脐静脉内皮细胞株(HUVEC),以未转染siRNA细胞和转染无关siRNA细胞为对照,在干扰后0h,12 h,24 h,48 h,反转录聚合酶链反应(PT-PCR)检测Egfl7、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子A、B(PDGF-A、PDGF-B) mRNA水平的改变,免疫印迹法检测Egfl7、VEGF、PDGF、血管细胞黏附分子(VCAM)及细胞间黏附分子(ICAM)蛋白表达水平的变化.结果 人髂动脉和小鼠无名动脉粥样硬化斑块内Egfl7表达水平上调；HUVEC内Egfl7在siRNA干扰后0h、12 h、24 h、48 h时mRNA表达分别为(0.31±0.05)、(0.14±0.02)、(0.09±0.01)、(0.02±0.01),蛋白表达为(0.93±0.08)、(0.71±0.11)、(0.39±0.09)、(0.07±0.01).Egfl7、VEGF、PDGF-A、PDGF-B mRNA及其蛋白表达水平随干扰时间延长均下降或抑制,与siRNA干扰0h比较差异有统计学意义(均P＜0.05). 结论 动脉粥样硬化斑块内Egfl7表达水平提高；siRNA抑制HUVEC Egfl7表达水平的同时,其他血管生长因子和黏附分子表达水平亦下降.
-
人血管生成素相关蛋白2重组腺病毒体外转染对小鼠毛细血管内皮细胞分化的作用
目的研究血管生成素相关蛋白2重组腺病毒(Ad.ARP2)体外的转染效率、产物表达和其表达产物对血管内皮细胞分化的作用.方法体外培养扩增ICR小鼠心脏冠状动脉毛细血管内皮细胞(CMECs),通过免疫荧光染色评价人腺病毒转染CMECs的转染效率;应用Western blot和ELISA方法检测ARP2在细胞的内表达和分泌,并分别与对照组[空病毒载体(Ad.Null)组和PBS组]比较.观察种植在Matrigel凝胶上分别转染Ad.ARP2和Ad.Null的CMECs的生长状态. 结果腺病毒转染倍数为200时,转染效率为93.5%,且对细胞生长无影响.Ad.ARP2转染CMECs后有ARP2蛋白表达,ELISA检测第1、2、3、5、8 d的ARP2分泌量分别为76.0±1.7、490.1±9.5、389.6±2.5、240.1±1.1、73.4±1.3 pg/ml,而对照组未检测到有ARP2蛋白表达和分泌.含有ARP2的培养上清能促进血管内皮细胞分化. 结论腺病毒可以安全、有效地转染CMECs,其携带ARP2基因可获得高水平表达,并能促进血管内皮细胞分化.
-
胆囊癌血管生成的研究进展
胆囊癌是常见的胆道系统恶性肿瘤之一。肿瘤血管生成在胆囊癌的发病过程中发挥着重要的作用。肿瘤血管生成机制复杂，包括内皮细胞的激活和增殖，细胞外基质的降解及重塑，血管通透性的改变，新生血管的生成及重塑等[1]。肿瘤血管生成可以作为胆囊癌患者预后的评估指标[2]。抗血管生成治疗是抑制肿瘤生长的一种有效策略，目前已有多种抗血管生成剂诞生，并在肿瘤的防治中取得了可喜的成效。然而，对抗血管生成剂在胆囊癌血管生成中应用的临床研究较少，治疗效果尚无明确定论[3]。本文结合既往文献报道，探讨肿瘤血管生成和促血管生成因子在胆囊癌侵袭转移过程中的作用，并对血管生成抑制剂在胆囊癌治疗中的应用进行初步阐述。
-
血管生成因子VEGF、bFGF、endostatin在胰腺癌细胞中的表达
目的 探讨胰腺癌细胞血管生成因子表达水平与其恶性生物学行为的关系.方法 通过RT-PCR及ELISA检测胰腺癌细胞株SW1990、Capan-1、Aspc-1、MiaPaCa-2、Panc-1及PCT-3中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)和内皮素(endostatin)的表达水平,同时通过Boyden Chamber趋化小室及CCK-8法进行6株胰腺癌细胞株的侵袭性及增殖检测. 结果 VEGF在6株细胞中均有表达,但是表达量存在显著差异,以侵袭性强的Panc-1表达强.bFGF在6株细胞中均有表达,但是表达量存在显著差异,增殖及侵袭性较强的Panc-1和PCT-3中的表达水平高于其他细胞株.6株胰腺癌细胞endostatin表达差异显著,在侵袭性强的Panc-1中表达水平高,其他细胞株不表达或表达量很低.胰腺癌细胞株胞外的VEGF及endostatin表达显著高于细胞内,bFGF细胞内表达显著高于细胞外.结论 血管生成因子VEGF、bFGF和endostatin的表达水平可能与胰腺癌细胞增殖与侵袭密切相关.
-
血清血管生成因子在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义
目的:探讨血清血管形成相关因子在骨肉瘤组织中的表达,及其与临床病理和微血管密度(MVD)的关系.方法:免疫组化SP法检测80例骨肉瘤组织中VEGF、CD34和F Ⅷ-Rag等蛋白表达,并根据CD34和FⅧ-Rag免疫组化染色结果计数MVD.同时采用酶联免疫分析定量检测36例骨肉瘤患者血清中的血管生成因子:血管内皮生成因子(VEGF)、碱性成纤维因子(bFGF)、转化生长因子(TGF-β1)以及内皮抑制素(edostatin, ES)的表达.结果:1)术前血清VEGF(1 706 ng/dL)和ES(302.4 ng/dL)水平明显高于正常对照组,是VEGF的升高与肿瘤的微血高管密度、患者早期复发及其组织高表达密切相关;2)血清VEGF水平(1 706 ng/dL)和ES(302.4 ng/dL)水平呈正相关;3)术后VEGF(490.0 ng/dL)和ES(32.7 ng/dL)水平明显下降,VEGF复发组较未复发组高,但差异无统计学意义,而复发组的ES水平明显低于未复发组.结论:术前血清VEGF和术后ES水平能反映骨肉瘤血管生成特性,对骨肉瘤早期复发具有重要预测价值,可作为抗血管生成的重要靶标.
-
大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型血管生长素与胶质纤维酸性蛋白的共表达
目的 观察大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型血管生长素(ANG)表达水平的变化及其与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的共表达现象.方法 将成年雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、缺血2 h后再灌注1、3、7及14d组,每组6只大鼠.线栓法制作大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型.采用免疫荧光双标法结合激光共聚焦显微镜检测脑缺血-再灌注不同时间点ANG、GFAP的表达水平及其二者的共表达情况.结果 脑缺血-再灌注1、3、7 d脑缺血区ANG表达水平(ANG荧光强度)分别为56±21、73±22和76±21,对照组为35±17;GFAP表达水平(GFAP荧光强度)分别为94±32、115±35和74±31,对照组为62±22.缺血各时间点ANG及GFAP表达与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).激光共聚焦显微镜观察到部分ANG与GFAP共表达现象.结论 脑缺血可诱导缺血脑区ANG和GFAP的表达上调.
-
发状分裂相关增强子-1对血管形成相关因子作用的实验研究
目的研究发状分裂相关增强子-1(HESR-1)基因在血管形成和维持中的作用.方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),构建PcDNA3.1+HESR-1重组质粒、RNA干扰用pSIREN+HESR-1质粒.脂质体将这两个质粒分别转染到HUVEC,并以转染空白质粒体作为对照.在HUVEC内分别高表达HESR-1、下调HESR-1的表达,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测HUVEC内HESR-1不同表达状态时血管内皮生长因子第2受体(KDR)、激活素受体样激酶1(ALK-1)、血管生成因子1(Ang-1)表达的改变.结果在HUVEC内高表达HESR-1基因能下调KDR的表达,上调ALK-1、Ang-1的表达;当抑制HESR-1基因,KDR的表达上调,ALK-1、Ang-1的表达下调.结论 HESR-1基因可调控HUVEC中KDR、ALK-1、Ang-1的表达,在血管的形成和维持中发挥关键作用.
关键词： 转录因子 激活素受体 Ⅰ型 血管生成诱导剂 血管内皮生长因子受体2 -
血管新生的生物学:重要的分子机制
已经确定了许多血管新生的诱导物,包括血管内皮生长因子家族、血管生成素、转化生长因子、血小板衍生生长因子、肿瘤坏死因子-α、白介素和成纤维细胞生长因子家族.较好理解血管新生的生物学,可揭示治疗若干与这些复杂过程有关的疾病的新靶标.不同血管新生抑制剂可能的用途,目前正在临床加紧研究.本文对介导血管新生的重要分子机制作了总结.
-
rhTNF-α对成骨向分化前后的人脂肪基质细胞分泌血管生成相关生长因子的影响
目的:研究在重组人肿瘤坏死因子(recombinant human tumor necrosis factor alpha,rhTNF-α)刺激下人脂肪基质细胞(human adipose tissue-derived stromal cells,hADSCs)增殖的改变及成骨向分化前后血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor-2,FGF-2)和胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)分泌的变化.方法:采用吸脂术获得的第4代hADSCs,以终浓度为O、1、5、10、50、100μg/L的rhTNF-α刺激hADSCs,分别在48、72、96 h后行MTT法检测不同浓度rhTNF-α对hADSCs增殖的影响;并以该浓度梯度的rhTNF-α刺激hADSCs,24 h后收集卜清,以ELISA法检测VEGF、FGF-2和IGF-1的分泌情况;在成骨向诱导的第1、3、7、14天收集细胞上清,ELISA法检测上述3种生长因子分泌的变化,收集细胞卜清前24 h更换培养基,并在相应孔中加入rhTNF-α,使其终浓度为10μg/L.所有ELISA数据均以相应培养孔的细胞数进行校正.结果:rhTNF-α能促进hADSCs的增殖,其作用表现为一定的浓度和时间依赖.相比于对照组,48 h时,10μg/L rhTNF-α对增殖的促进作用并不明显,但96 h时则表现为促进作用(P<0.01),而100 μg/L rhTNF-α在48 h表现为抑制作用(P<0.01),96 h时则表现为明显的促进作用(P<0.01).相对于对照组,rhTNF-α可以显著促进hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1(P<0.01);hADSCs经成骨向诱导后,上述3种生长因子的分泌有增加的趋势;不同成骨向分化阶段的hADSCs用10μg/L rhTNF-α刺激后,在诱导第1天,rhTNF-α显著促进VEGF的分泌(P<0.01),但对FGF-2和IGF-1的分泌无显著性影响;在诱导第3天和第7天,rhTNF-α对VEGF(P<0.01)、FGF-2(P<0.05)和IGF-1(P<0.05)的分泌均有促进作用;但在第14天则抑制VEGF(P<0.01)、FGF-2(P<0.05)和IGF(P<0.05)的分泌.结论:一定浓度的rhTNF-α对hADSCs的增殖有促进作用;hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1具有rhTNF-α的浓度依赖;在不同成骨向分化阶段,rhTNF-α对hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1这3种生长因子的作用不同.
-
PIGF、sVEGFR-1和sEng对调节血管平衡与死胎发生的研究进展
目前很多领域已开展对血管生成因子与抗血管生成因子的研究,其在病理产科中的作用机制已成为研究热点,尤其在子痫前期妊娠妇女血浆中的研究较多,但对其在死胎中的作用尚少见报道.探讨死胎临床病因学与胎盘生长因子(PIGF)、可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR-1)、可溶性内皮因子(sEng)变化的意义,以及不同原因死胎母亲羊水及母体血清VEGFR-1、PIGF、和sEng浓度的变化,并探讨血管生成因子及抗血管生成因子变化与死胎发生的关系,为死胎的病因及发病机制研究开辟新思路.
关键词： 死胎 血管生成诱导剂 血管内皮生长因子受体1 病理学 -
环氧合酶-2与子宫内膜异位症相关性的研究进展
子宫内膜异位症是一种妇科常见病,至今其发病机制仍不清楚.近年研究发现,环氧合酶2(COX-2)在子宫内膜异位症的在位和异位内膜表达增高,与该病密切相关.COX-2可通过抑制细胞凋亡途径促进子宫内膜异位病灶的生长,主要是通过调节抗凋亡蛋白和促凋亡酶的表达来起作用;COX-2还可通过血管生成途径促进异位子宫内膜细胞增殖生长,这种作用是基于提高促血管生成因子的表达来实现的.就近年来COX-2与子宫内膜异位症相关性的研究进展作一综述.
关键词： 子宫内膜异位症 前列腺素内过氧化物合酶类 血管生成诱导剂 雌激素类 -
子宫内膜异位症发病机制的研究进展
子宫内膜异位症（EMs）是妇科中的疑难病，会引起患者痛经、慢性盆腔痛、月经异常以及不孕等临床症状。研究发现EMs的发病有明显的遗传背景，并且在激素及其受体、炎症免疫、侵袭黏附、血管生成等相关因素共同作用下，患者盆腔内形成异常微环境而发病。但由于EMs的发病机制复杂，其确切的发病机制仍不清楚。目前针对EMs发病相关的关键靶点进行治疗，能改善治疗效果，但无法根治该病。本文对EMs的内分泌、炎症免疫、遗传、血管生成和侵袭黏附等因素的发病机制的研究进展和针对关键靶点进行治疗的临床应用进行综述。
-
促血管生成因子在治疗缺血性心脏病中的应用
缺血性心脏病严重危害着人类的健康,目前使用的常规治疗方法仍无法修复坏死的心肌,达到满意的治疗效果.基因治疗尤其是促血管生成因子的治疗为此类疾病的治愈带来了希望.该文就促血管生成因子基因治疗缺血性心脏病的研究进展进行综述.
-
子宫内膜癌中ER、PR、MK、VEGF的表达及与病理特征的关系
目的 探讨子宫内膜癌中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、中期因子(MK)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用实时荧光定量PCR检测50例子宫内膜腺癌(研究组)和30例正常子宫内膜组织(对照组)中ER、PR、MK、VEGF mRNA的表达水平,结合患者的临床病理资料进行分析.结果 (1)子宫内膜癌组织中ER和PR mRNA表达量,较对照组低(P<0.05).MK和VEGF mRNA表达量明显高于对照组(P<0.05).(2)在子宫内膜癌组织中检测指标的表达水平与临床病理分期、组织学分级和肌层浸润深度有关系,随临床病理分期、组织学分级的升高和肌层浸润的加深,ER、PR的表达水平下降,而MK和VEGF表达水平明显升高,均有统计学意义(P<0.05).结论 ER、PR、MK和VEGF的检测有助于评估子宫内膜癌的生物学行为和预后,并指导该疾病的内分泌治疗.
