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HBV转录后调节基序
乙型肝炎病毒(HBV)基因的表达调控是近年来HBV分子生物学研究的重点之一,对于了解HBV的致病机理、HBV与肝癌的关系以及对乙型肝炎和肝癌的预防和治疗均有重要的意义.HBV转录后调节基序就是新近发现的在转录后水平顺式调节HBV复制与表达的调控区域.
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植物Ⅲ型聚酮合酶研究进展
聚酮化合物是一大类结构各异并具有不同生物活性的天然产物,具有重要的药用价值.植物Ⅲ型聚酮合酶(polyketide synthases,PKSs)是植物中聚酮化合物生物合成的关键酶,主要通过催化初始酰基底物和二碳酰基单元的乙酰基发生一系列的缩合反应合成聚酮化合物骨架结构.该文简要概述了植物Ⅲ型聚酮合酶的催化机制、功能改造、表达调控及其分子进化等方面的研究进展.
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RNA病毒表达调控研究中的RNA结构分析技术
RNA病毒的多个生命过程如基因组复制、蛋白翻译等均需要特定RNA元件的调控,RNA结构是其发挥调控作用的分子基础,研究这些RNA元件结构及其在调控过程中的动态变化,将有助于深度解析相应过程的调控机制.RNA结构分析技术可以解析RNA元件的结构(二级结构和三级结构).目前,RNA结构体分析技术主要有以下几种:Rnase酶法、In-line probing技术、SHAPE技术(Selective 2'-hydroxyl acylation analyzed by primer extension)、核磁共振技术、RNA结晶以及体内分析技术.本文将对RNA结构分析技术的发展历程、具体技术原理和操作细节、未来发展进行叙述,为相关科研工作提供技术参考.
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FasL N-端编码序列对其表达的影响
目的探讨Fas配体(Fas ligand, FasL)胞内区氨基酸组成对膜型FasL蛋白表达的影响.方法 PCR技术扩增FasL胞内区产生不同缺失的cDNA,构建重组表达质粒;使用脂质体转染法将表达质粒导入靶细胞;RT-PCR分析FasL mRNA水平;荧光抗体染色、流式细胞仪和Western免疫印迹技术检测细胞中FasL蛋白的表达.结果 FasL N-端缺失第2~16氨基酸残基后,FasL蛋白在细胞中的表达水平显著增加,但mRNA水平不变.结论 FasL N-端第2~16氨基酸残基对FasL蛋白表达水平具有自我调节作用.
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罗格列酮对裸小鼠移植瘤PPAR-γ表达的影响
目的 探讨罗格列酮(RGZ)对裸小鼠移植瘤过氧化物酶体增殖物激素受体(PPAR-γ)表达的影响.方法 采用不同浓度和剂量的RGZ对荷瘤裸小鼠进行灌胃干预3周后,RT-PCR实时荧光定量检测PPAR-γ的△Ct值和表达拷贝数,测量各组瘤体体积(TV)和重量(TW),计算相对肿瘤体积(RTV)和相对肿瘤增值率(T/C%).结果 胆管癌移植瘤随RGZ剂量增高PPAR-γ的表达升高,而相对肿瘤增值率T/C%减少;高剂量组与对照组比较差异显著(P<0.001).结论 在裸小鼠移植瘤内RGZ能呈剂量依赖性地上调PPAR-γ表达.
关键词: 过氧化物酶体增殖物激活受体-γ 罗格列酮 胆管癌 表达调控 -
G蛋白偶联受体激酶2活性和表达的调控及其在治疗恶性肿瘤中的作用
G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族,广泛分布于各种组织中,能够特异性的使活化的G蛋白偶联受体(GPCRs)发生磷酸化及脱敏,从而终止GPCRs介导的信号传导通路.GRK2不仅能够调节GPCRs和非GPCRs,其自身活性和表达也可受到多种因素的调节.GRK2具有多种不同的生理及病理作用,其涉及的许多信号通路与恶性肿瘤的发生发展密切相关.
关键词: G蛋白偶联受体 G蛋白偶联受体激酶2 活性调控 表达调控 恶性肿瘤 -
HDL转运的miR-223调控内皮细胞ICAM-1的表达
众所周知,血浆中高密度脂蛋白HDL的浓度与心血管疾病发生的风险负相关。对HDL心血管保护功能研究多的是它在胆固醇逆向转运中的作用。此外,HDL还有抑制多种细胞免疫炎症的作用,比如HDL可以抑制内皮细胞的激活和粘附分子的表达。HDL具有异质性,由若干结构和功能各异的颗粒亚群组成,成分复杂,包括脂蛋白、磷脂、小RNA(miR)等。这导致目前关于HDL心血管保护作用的机制了解不是很多。本文作者研究了HDL的各个组分对于内皮细胞基因表达谱和miR表达谱的影响,并重点研究了HDL转运的miR-223对内皮细胞ICAM-1表达调控的机制。他们的研究结果发表在2014年2月28日在线出版的《自然通讯》(Nature Communications)杂志上。
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大鼠实验性肺损伤肺组织核蛋白核因子-κB 活性的检测
核因子-κB(NF-κB)与基因启动子和(或)增强子中特定的κB序列结合,启动和调控众多参与炎症过程细胞因子和炎症介质的基因表达[1]。有关NF-κB活化及其表达调控在全身炎症反应综合征(SIRS)和远隔脏器靶器官的研究较少,为此,我们进行了以下研究。
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BCG-PSN通过抑制哮喘小鼠NF-κB影响BALF中细胞因子的水平
核因子NF-κB (Nuclear factor kappa B)是一个具有广泛生物学活性的核转录因子,可参与许多炎症的表达调控,是与支气管哮喘及气道炎症密切相关的因子之一.将28只6周龄BALB/c小鼠(山东大学医学院实验动物室)随机分为4组,每组7只.对照组:隔日腹腔内注射生理盐水(NS)0.03 ml, 第14天、28天、35天腹腔内注射1.5 mg Al(OH)3;BCG-PSN (卡介苗多糖核酸注射液,BCG-Polysaccharide nucleic acid)6周龄组:隔日腹部皮下注射BCG-PSN(商品名斯奇康1 ml/安瓿,长沙九芝堂公司产品)0.03 ml,在第14、28和35天腹腔内注射1.5 mg Al(OH)3;OVA(卵蛋白,aerosolization)组:隔日腹腔内注射NS 0.03 ml,建立哮喘模型;BCG-PSN 6周龄+OVA组:6周龄鼠,隔日腹部皮下注射BCG-PSN 0.03 ml,建立哮喘模型.
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TIGR/MYOC基因与青光眼
青光眼是世界第二大致盲眼病,它表现为眼压增高,视野缺损和视神经损害.近年来,分子生物学的飞速发展及人类基因组计划的提出和实施,促进了青光眼分子遗传学研究的发展,一些青光眼相关致病基因被相继定位在相应的染色体上,并进行基因的克隆、测序、表达调控及突变分析.
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桥粒胶糖蛋白在肿瘤中的研究进展
桥粒是细胞间连接的主要方式,对维持上皮组织的正常形态和功能具有重要意义。桥粒胶糖蛋白(DSC)为钙粘蛋白超家族成员之一,与桥粒芯糖蛋白(DSG)合称为桥粒钙粘素(DC),是组成桥粒的重要蛋白成分。人类桥粒钙粘素基因位于18号染色体长臂1区2带,表达 DSC1-3与 DSG1-4两组蛋白[1]。与传统的钙粘素相似,DC 具有完整的跨膜糖蛋白结构,其胞外部分包含氨基酸识别序列,以异二聚体的形式完成细胞间桥粒连接;而胞内区与胞浆内的附着板相连,进而连接细胞骨架的角蛋白成分。
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以Angiopoietin-1,2为靶点靶向治疗口腔鳞癌的研究进展
针对肿瘤新生血管的靶向治疗已成为恶性肿瘤新的治疗策略.但目前尚缺乏有效针对口腔鳞癌抗血管生成治疗的靶向因子.Angiopoietin(Ang)是近年来发现的一族可特异性作用于血管酪氨酸激酶受体系统(receptor tyrosine kinase,RTK)的分泌性蛋白分子,在生理和病理血管新生中起重要作用.研究表明Ang 家族中Ang-1,2 和血管新生关系为密切,二者的表达调控及活性调节研究已成为目前阐明肿瘤性血管生成、发育机制并进行肿瘤抗血管生成治疗的研究热点.本文就Ang-1,2 在实体瘤及其在口腔鳞癌中的研究进展进行综述.
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WWOX表达调控、功能及作用机制的研究进展
1996年,M.Aldaz 实验室在研究乳腺原位癌时发现近70%的原位癌于16q23.2~16q24.1区域发生杂合性缺失[1]。2000年Bednarek等首次成功克隆出此区域的基因,并将其命名为WWOX (WW domain-containing oxidoreductase,含WW结构域的氧化还原酶),又名FOR(fragile site FRA16D oxidoreductase,脆性位点FRA16D 氧化还原酶)[2]。该基因跨越1.11 Mb,包含9个外显子及8个内含子。由于剪切形式的不同可形成7种不同的异构体,常见的异构体形式是全长WWOX,其大小约1.2 kb,编码414个氨基酸形成的蛋白质,蛋白分子量为46.6 kD。
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血管紧张素转换酶-2及表达在高血压病及心肌肥厚中的作用研究
新近发现的肾素-血管紧张素-醛固酮系统( renin angiotensin aldosterone system,RAAS)中的新成员血管紧张素转换酶2(an-giotensin converting enzyme 2,ACE2)作为血管紧张素转换酶( an-giotensin converting enzyme ,ACE )的同源酶,其分子结构极其相近[1]。但其功能上,通过直接对抗ACE与血管紧张素Ⅱ( angio-tensinⅡ,AngⅡ)的作用(即与经典的RAS通路相拮抗)在心血管疾病发生、发展中起着重要调控作用。为此,本文就ACE2及其表达调控在高血压病及心肌重塑中的作用及机制进行综合分析,以便为心血管疾病防治研究提供线索。
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缺氧诱导因子与肝癌关系的研究进展
缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)是一种广泛存在于人及哺乳动物体内的转录因子,可以上调包括血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMPs)、糖酵解酶、促红细胞生成素(EPO)等百余种靶基因的表达,是细胞在缺氧应答反应中重要的调节因子之一,同时与肿瘤,尤其是实体瘤关系密切,可能是肿瘤发生、发展、化疗耐药和侵袭转移的关键因子。目前发现的缺氧诱导因子成员有HIF-1[1]、HIF-2[2]、HIF-3[3]三种。三者在结构和表达调控上有相似之处,且在肝癌中都存在表达异常,但肝癌的关系不并不相同。本文综合目前国内外的文献报道,对三者同肝癌的关系作一综述。
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分子生物学在消化系统肿瘤中的应用
分子生物学是指从分子水平上研究生命现象物质基础的一门学科,主要研究细胞成分的物理、化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系,如遗传信息的传递,基因的结构、复制、转录、翻译、表达调控和表达产物的生理功能,以及细胞信号的转导等.其内容包括细胞工程技术、基因工程技术、DNA芯片技术、酶工程技术等.分子生物学在医学领域中的应用越来越广泛,对人类疾病的早期诊断和研究,提高诊断的准确性和敏感性等方面发挥越来越重要的作用.
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P21对胃癌细胞MGC-803的增殖抑制及对POLD1基因表达调控
目的:研究P21对POLD1基因的调控通路,以探索阻断癌细胞恶性增殖的机制.方法:实验主要分3组:阴性对照组(转染空载体pXJ41-neo的803-pXJ细胞)、空白对照组(胃癌细胞MGC-803)、实验组(转染P21重组真核表达质粒pX J41 -p21的803-p21细胞).MTT实验分析细胞增殖变化,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR技术检测基因表达水平的变化,Western blot分析蛋白表达差异.结果:MTT实验显示,与空白对照和阴性对照组相比,实验组细胞增殖受到明显抑制,凋亡率(%)增高(11.36±0.51 vs 7.39±0.17,7.69±0.47,F=85.338,均P<0.05).实验组P21 mRNA表达水平显著提高(2.15±0.23 vs 1.05±0.11,1.00±0.00,F=59.054,均P<0.05),POLD1则显著下调(0.45±0.07 vs 1.09±0.13,1.00±0.00,F=49.907,均P<0.05); P21、P125蛋白表达变化与基因变化相一致.cyclin E、Rbl基因表达均上调,CDK2基因表达下调,c-myc基因表达则变化不大.结论:P21抑制了胃癌细胞的增殖、促进其凋亡,同时抑制了POLD1基因的表达,这种抑制作用可能通过CDK2、cyclin E、Rb1等细胞周期因子实现.
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细胞外基质基因在肝脏的表达与调控
0 引言细胞外基质(ECM)是结构和功能高度复杂的生命大分子,他们不仅对于维持细胞的形态和结构起重要作用,而且对于细胞的生长、分化、代谢、信号传导等功能有重要影响[1].ECM的基因表达处于复杂而精细的调控之中,在生理及病理状态下各种细胞因子、化学物质(如CCL4,乙醛及脂质过氧化产物)甚至物理因素(如应力)都可以影响ECM的基因表达[1-3].I型胶原是ECM的主要成分之一,由两条proal(I)肽链(COLIAI)和一条proa2(I)肽链(COLA2)组成,分别由位于不同染色体上的两个基因编码.以人类为例,其COLIAI基因位于第17号染色体(q21.3-22),有51个外显子;COLIA2基因位于第7号染色体(q2.3-33),有52个外显子.外加长度均在20kb以上的5'知3'端序列,人的OOLIAI基因总长度可达65kb.本文将以I型胶原为例简要介绍ECM基因在肝脏表达调控的几个方面:即染色质结构、DNA甲基化以及各种调节因子的影响
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膜转运蛋白ABCA1的表达调控、信号传导与脂质运输功能
ABCA1是一种介导细胞内过量胆固醇外流到载脂蛋白并将其包装成高密度脂蛋白(HDL)的膜转运蛋白,是调节血浆HDL及细胞内胆固醇水平的重要受体;然而,其具体的作用机制尚未明了.近期研究逐步揭示,ABCA1有可能通过特殊的信号传导通路诱发胆固醇外流;其信号传导作用还体现在抗凋亡、影响细胞骨架蛋白的相互作用等其它方面.本文对ABCA1的脂质调节、表达调控和信号传导等方面的新研究进行了综述.
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胰岛素基因在HepG-2细胞系中的调节表达
用脂质体介导法将质粒p(GIRE)3BP-11×Furin转染至HepG-2细胞.培养该细胞,以不同浓度的葡萄糖或胰岛素加入培养基.结果 显示,葡萄糖和胰岛素均能浓度依赖地分别刺激和抑制胰岛素基因的表达.