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子宫内膜异位症患者血清、腹腔液、在位/异位内膜组织中RANTES的表达及意义
目的:探讨子宫内膜异位症患者血清、腹腔液、在位/异位内膜组织中RANTES的表达及意义,为临床上子宫内膜异位症的治疗提供依据。方法以本院2011年10月-2013年10月接收的行腹腔镜手术、经腹腔镜及病理确诊为子宫内膜异位症的34例患者为观察组;同期因其他原因行腹腔镜手术的、非子宫内膜异位症且盆腔结构正常的40例患者为对照组。采用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测两组患者血清、腹腔液、在位/异位内膜组织中RANTES,对比观察组、对照组间各项结果,同时对观察组不同分期患者之间血清、腹腔液、在位/异位内膜组织中RANTES的表达进行对比分析。结果观察组血清、腹腔液中RANTES的表达量分别为671.3±125.7ρ/(ng·L-1)、20.4±2.9ρ/(ng·L-1),对照组血清、腹腔液中RANTES的表达量分别为557.6±102.9ρ/(ng·L-1)、11.6±3.2ρ/(ng·L-1),观察组显著高于对照组,差异均具有统计学意义(t1=37.84,P1=0.000;t2=26.13, P2=0.000),且不同分期子宫内膜异位症患者的 RANTES 的表达量差异具有统计学意义(t1=29.57,P1=0.000;t2=7.64,P2=0.011),其中Ⅲ、Ⅳ期显著高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05)。正常内膜、在位内膜、异位内膜中RANTES的表达水平比较差异具有统计学意义(t=11.25,P=0.003),其中异位内膜、在位内膜显著高于正常内膜(P<0.05);轻度(Ⅰ~Ⅱ)子宫内膜异位症患者在位内膜、异位内膜中RANTES的表达水平显著低于重度患者(Ⅲ~Ⅳ),差异均具有统计学意义(t1=8.65,P1=0.009;t2=9.22,P2=0.007)。结论子宫内膜异位症患者血清、腹腔液、在位/异位内膜中RANTES的表达量显著高于非子宫内膜异位症患者,且其表达量与临床分期有关,表示RANTES可能参与子宫内膜异位症的发生和发展。
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补肾活血方调节在位内膜蛋白质表达治疗子宫内膜异位症不孕机制研究
目的:比较观察子宫内膜异位症(endometriosis,Ems)相关不孕患者与正常育龄期妇女在位子宫内膜的蛋白质表达差异及中药补肾活血方对其调节作用.方法:提取正常育龄期妇女、EMs不孕患者服用补肾活血方治疗3个月前后的分泌中期子宫内膜各4例,利用差速离心和密度梯度离心方法来提取纯化内膜蛋白质,采用荧光差异凝胶电泳(2D-DIGE)标记、分离蛋白质,Decyder差异分析软件进行分析、识别差异表达蛋白质,并应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)得到相应差异蛋白的肽质量指纹图谱,然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点.结果:分析得到35个差异蛋白点,质谱鉴定出28种差异蛋白.结论:分析预测Ems不孕发生的5种可能机制,涉及10种蛋白;补肾活血方作用于26种蛋白从4种可能机制修复Ems不孕患者在位内膜缺陷.
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少腹逐瘀汤含药血清对子宫内膜异位症在位内膜分泌IL-8的影响
目的:研究少腹逐瘀汤含药血清对子宫内膜异位症在位内膜分泌IL-8的影响.方法:实验分为少腹逐瘀汤含药血清高剂量组、低剂量组及空白对照组.收集接收手术治疗的子宫内膜异位症病人的在位子宫内膜组织,经体外分离、培养,以实时荧光定量PCR分析不同浓度少腹逐瘀汤含药血清对在位内膜细胞表达IL-8的影响.结果:少腹逐瘀汤含药血清能剂量依赖性抑制在位内膜细胞表达IL-8.结论:少腹逐瘀汤含药血清可抑制体外培养的子宫内膜异位症在位内膜细1胞IL-8的分泌,提示少腹逐瘀汤对于治疗子宫内膜异位症可能具有一定的作用.
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子宫内膜异位症的临床特点与中西医治疗
子宫内膜异位症(endo-metriosis,EM),是子宫内膜腺体和间质出现在子宫腔(在位内膜)以外的部位而引起的一种疾病,是生育期妇女的多发病,常见病.约有60%~80%以上有痛经或不孕的妇女患有此病,10%~15%本病患者无症状.国外对育龄期妇女
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子宫内膜异位症病机——瘀毒学说
子宫内膜异位症(EM)的发病率在生育年龄妇女中约占10%,在不明原因不孕妇女中则高达30%~50%,且难以根治,其5年临床复发率高达50%.现代医学对其发病机制尚未明了,子宫腔内的内膜作为异地种植的物质主体,在EM的发生发展中起着决定性作用,以致近年兴起"在位内膜决定论"的新学说[1],研究表明,EM患者在位内膜细胞黏附分子和血管生成因子表达增高,在位内膜的增殖活性增强,凋亡能力下降.同时发现患者在位内膜细胞对其生理抑制剂孕激素存在一种不敏感或抵抗现象.
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CD44v6与MMP-7在子宫内膜异位症r-AFs分期中表达的相关性研究
目的 通过检测CD44v6和基质金属蛋白酶-7(MMP-7)在子宫内膜异位症(EMs)美国生育学会修订的EMs分期标准(r-Afs)不同分期中在位内膜及异位内膜、非EMs患者子宫在位内膜中的表达水平,分析它们在各r-AFs分期中的相关性.探讨CD44v6和MMP-7与EMs侵袭、种植的关系.方法 采用免疫组织化学法检测EMs异位内膜(60例)、在位内膜(60例)及正常子宫内膜(60例)中CD44v6和MMP-7的表达情况,术中进行r-AFs分期.结果 CD44v6在EMs组异位内膜的表达高于在位内膜组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组CD44v6的活性高于在位内膜组,差异有统计学意义(P<0.05).MMP-7与正常子宫内膜组织中呈现弱表达,在位内膜和异位内膜组织表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).CD44v6和MMP-7在III~IV期异位内膜的表达强度均高于I ~ II (P<0.05),而在位内膜二者的表达强度在不同r-AFs分期中差异无统计学意义(P>0.05).CD44v6和MMP-7在EMs患者异位内膜中的表达具有显著相关性(r=0.726,P0.05),并与r-AFs分期具有显著相关性((r=0.615,P<0.05).结论 CD44v6和MMP-7在EMs异位内膜中高表达可能是EMs发生发展的重要因素并有协同作用,与EMs的侵袭、种植密切相关.
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筛选子宫内膜异位症中差异表达miRNA的系统综述
目的 系统综述利用基因芯片技术筛选子宫内膜异位症患者差异表达的microRNA.方法 计算机检索Pubmed、Embase、Web of Science、CBMDisc、CNKI、VIP、万方数据库,2000~2016年间关于子宫内膜异位症miRNA筛选的相关文献,并由两名评价员按纳入排除标准独立筛选文献和提取资料,综述患者资料及miRNA筛选结果.结果 检索到相关文献382篇,终纳入16篇.各项研究中对照组选择标准差异较大,患者资料报道不全面.内异症和非内异症患者间miRNA差异表达谱结果一致性差,在位和异位内膜组织间miRNA差异表达谱结果一致性较高.结论 利用芯片技术筛选内异症相关miRNA差异表达谱是高效、有意义的,但需细化研究纳入标准,做好质量控制,以保证结果可重复验证.
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miRNA -145在子宫内膜异位症中的诊断价值及其机制研究
目的:探讨 miRNA -145在子宫内膜异位症(EMs)中的诊断价值及其可能的机制。方法采用实时荧光定量(RT - PCR)法检测不同病程阶段 EMs 患者血清及内膜组织中的 miRNA -145表达水平,分析其相关性,并预测其靶基因。选同期因不孕症(输卵管因素)及输卵管系膜囊肿等手术的患者27例作为对照组。结果 RT - PCR 检测结果显示,Ectopic 组和 Eutopic 组内膜组织 miRNA -145相对表达水平均高于对照组( P <0.05),EMs1、EMs2、EMs3和EMs4组患者血清 miRNA -145相对表达量均高于对照组( P <0.05),无疼痛组、轻度疼痛组、中度疼痛组和重度疼痛组患者血清 miRNA -145相对表达水平均高于对照组( P <0.05),且随着 r - AFS 分期进展及 VAS 疼痛评分增加,miR-NA -145表达水平逐渐上升( P <0.05)。靶基因预测结果提示与 EMs 相关的基因有5个:CRK、PTEN、VEGFA、PGR 和MMP9。结论 miRNA -145在 EMs 患者早期血清中存在特异性表达,可能作为 EMs 早期诊断指标,成为新兴的 EMs 诊断和预后的分子标志物。
关键词: 子宫内膜异位症 microRNA-145 异位内膜 在位内膜 诊断 -
体内外孕激素和GnRHa对子宫内膜异位症患者在位内膜血管内皮生长因子表达影响的差异
目的 探讨孕激素和促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)对内异症患者在位内膜VEGFs表达的影响.方法 子宫内膜细胞体外培养并行药物刺激,体内研究采集放置曼月乐,口服MPA或注射GnRHa后的患者内膜,以半定量RT-PCR方法检测内膜组织中VEGFs mRNA的表达.结果 体外研究显示,孕酮和GnRHa均抑制内膜VEGFs mRNA的表达,病例组下降的幅度小于对照组.放置曼月乐和注射GnRHa均使在位内膜VEGFs mRNA表达明显升高,口服MPA组的VEGFs升高未达显著性差异.VEGFs mRNA的表达与MMP-9 mRNA呈正相关.结论 孕激素和GnRHa体内用药对内异症患者在位内膜VEGFs表达的影响不能用体外干预的效应简单推论.VEGFs升高不一定引发突破性出血.
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人子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞永生化细胞系的建立及鉴定
目的 建立人子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)患者在位内膜间质细胞永生化细胞系.方法 将原代培养的EMs患者在位内膜间质细胞转染质粒PCD2SV40T,G418筛选并进行单克隆细胞挑选,采用核型分析、免疫细胞化学、RT-PCR、裸鼠成瘤实验等方法对传代培养后的抗性单克隆细胞进行鉴定.结果 首次建立了EMs患者在位内膜间质细胞永生化细胞系hEM15A,该细胞系具有子宫内膜间质细胞特征,可连续传代,表现为正常二倍体核型,未观察到致瘤性.结论 hEM15A细胞系易获得、培养难度小、细胞均一性高、存活时间长,可成为EMs的研究工作中实用的体外模型.
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白细胞介素1受体Ⅱ在正常子宫内膜及子宫内膜异位症患者在位和异位内膜组织中的表达
子宫内膜异位症(内异症)可能是一种自身免疫性炎症疾病[1].内异症患者腹腔液、在位内膜和异位内膜中都可观察到细胞因子的失衡和表达异常[2-5].白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)可通过多个通路导致内异症的发生.本研究采用RT-PCR技术和免疫印迹法,检测了IL-1受体Ⅱ(IL-1RⅡ)基因及蛋白在正常子宫内膜以及内异症患者在位和异位内膜中的表达,现将结果报道如下.
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巴多昔芬对子宫内膜异位症模型大鼠异位内膜组织中ERα、ERβ、AP-1、VEGF表达的影响
子宫内膜异位症(内异症)是雌激素依赖性疾病,严重影响育龄期妇女的生命质量及生育能力。关于其发病机制, Sampson先提出“经血逆流学说”,近年的“在位内膜决定论”[1]认为,内异症的在位内膜与非子宫内膜异位症存在本质上的不同,其分子生物学行为可能源于雌激素暴露,雌激素作用于ER,启动对应的信号通路,多条信号通路相互作用的结果促进了逆流的子宫内膜能在宫腔以外生长。活化蛋白1(activator protein 1,AP-1;又称c-jun)是1种重要的核转录调控因子,参与细胞增殖、分化和凋亡等多种生理过程;雌激素与ER结合后,依赖ER传导通路,调节转录因子(如AP-1和核因子кB)的活性,进而调控相应细胞因子[如血管内皮生长因子(VEGF)]的表达。巴多昔芬作为第3代选择性ER调节剂(SERM)能明显抑制内异症模型大鼠子宫内膜的增生,缩小异位病灶的体积,并使异位病灶及在位内膜中ER、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达明显减少[2],因其表现出对大鼠内异症的治疗作用,而逐渐进入学者们的视野。本研究通过巴多昔芬处理内异症模型大鼠,应用免疫组化方法检测内异症模型大鼠异位病灶和在位内膜组织中ERα、ERβ、AP-1、VEGF的表达,探讨巴多昔芬治疗大鼠内异症可能的分子机制,为巴多昔芬的临床应用提供依据。
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膜联蛋白Ⅰ在子宫内膜异位症患者在位内膜组织中的表达变化及其意义
子宫内膜异位症(内异症)是育龄妇女的常见病,发病率达10%[1].虽然,内异症是良性病变,但其病理过程表现出浸润、转移等恶性疾病的特征.目前,有关内异症发生的分子机制尚不清楚.我们利用蛋白质组学研究发现,膜联蛋白家族成员——膜联蛋白Ⅰ(annexin Ⅰ)可能为内异症疾病相关蛋白[2].本研究采用免疫组化、实时定量PCR及蛋白印迹的方法,检测annexin Ⅰ在非内异症患者子宫内膜和内异症患者在位内膜中的表达情况,旨在探讨annexin Ⅰ在内异症发病中的作用.
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HOXA10基因与子宫内膜异位症发病关系的研究进展
子宫内膜异位症(endometriosis,EM)在育龄期妇女中的发病率高达10%~15%,且近年来的发病率呈升高的趋势.EM为良性病变,但具有与恶性肿瘤相似的生物学行为,严重影响着妇女的身心健康和生育功能,目前发病机制仍不清楚,"在位内膜决定论"是较公认的发病学说<'[1]>.随着对EM基因表达及其调控的深入研究,有学者发现,EM可能是一种表观遗传性疾病,同源盒(homeobox,HOX)基因HOXA10的异常表达及异常甲基化模式与其发病及不孕密切相关.本文将就HOXA10基因与EM的研究进展做一综述.
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内异症患者腹腔微环境对生殖功能影响的研究进展
内异症以具有生长功能的子宫内膜组织种植到子宫腔被覆内膜及子宫肌层以外的部位为特征,约30%~50%的患者合并不孕.目前多数学者认为,盆腔结构异常尤其是输卵管形态变化是导致重度内异症患者不孕的主要因素,但绝大多数的轻、中度内异症不孕患者腹腔内并无明显粘连,因而非解剖性因素尤其是腹腔微环境与不孕的关系引起了越来越多的关注.关于内异症的发病学说,国内学者提出了“在位内膜决定论”,即有内在差异的在位子宫内膜是内异症形成中的决定因素,而免疫反应、激素水平变化等可能只是继发表现[1].这些继发性变化诱发腹腔内炎症及氧化应激反应、细胞活性物质增加等一系列病理学变化,致使腹腔液的性质和量发生变化、内环境失衡、生殖功能异常,终导致内异症患者不孕.本文就内异症不孕患者腹腔液微环境变化对卵母细胞成熟、精子活性、受精卵形成及胚胎发育和植入的影响等综述如下.
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血管内皮和角质细胞生长因子在子宫腺肌症组织中的表达
血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是极为重要的血管形成因子,可特异性地直接作用于血管内皮细胞,导致新的血管生成[1].角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)是由间质细胞分泌的可特异性地刺激上皮细胞增生的因子[2].本研究通过检测子宫腺肌症(腺肌症)患者的正常子宫内膜(在位内膜)及腺肌症病灶中的异位内膜组织中VEGF及KGF蛋白的表达,以探讨其与腺肌症发病的关系.
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第十一届国际内异症会议纪要
第十一届国际内异症学术会议(WCE)于2011年9月4-7日在法国的蒙彼利埃(Montpellier)召开.来自世界各地的1000多位医师参加了会议,中国参会代表89人,是历年来参会人数多的一次,并有复旦大学附属妇产科医院郭孙伟教授等3位中国学者分别在大会上进行了主题发言,充分展现了近3年来我国内异症基础和临床研究的飞速发展和取得的成果.本次会议内容丰富,涉及内异症基础和临床研究的各个方面,强调了环境因素对内异症发病的影响以及miRNA调控机制在内异症发病中的作用;对在位内膜异常在内异症发病中的作用、疼痛和不育的机制以及深部内异症的处理和分期、辅助生育、内异症的早期诊断和复发的相关问题等进行了深入的探讨.其中,就内异症的分期讨论非常热烈,展示了内异症临床和基础研究未来的研究方向和发展趋势.现就本次会议的主要内容纪要如下.
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第十届国际子宫内膜异位症学术会议纪要
第十届国际子宫内膜异位症(内异症)学术会议于2008年3月11-14日在澳大利亚的墨尔本召开.来自世界各地的600多位专家学者参加了会议,中国参会代表有40余人.本次会议内容丰富,涉及内异症基础和临床研究各个方面;形式新颖,除传统的主题讲课和大会发言外,进行了热点问题的正、反方讨论;对在位内膜异常在内异症发病中的作用、疼痛和不育的机制以及深部内异症的处理和辅助生育的相关问题进行了深入的探讨.现就本次会议的主要问题纪要如下.
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子宫内膜异位症的MRI诊断
子宫内膜异位症(endometriosis,简称内异症)定义为在子宫腔以外存在有功能的子宫内膜腺体和基质,即相对于在位内膜(eutopic endometrium)存在的异位内膜(ectopic endometrium),子宫腺肌病特指异位内膜组织位于子宫肌层,而内异症一般指除子宫腺肌病以外的内异症.
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子宫内膜异位症痛经患者内膜组织中雌激素受体表达的相关研究
目的 检测内异症痛经患者内膜组织中雌激素受体的表达,分析其与疼痛及其程度的关系.方法 内异症组50例,其中在位内膜组40例,异位内膜组10例,对照组30例,在位内膜组患者术前均对痛经程度进行评分,采用免疫组化法测定雌激素受体的表达.结果 EMs组在位内膜ER蛋白的表达高于对照组,差异有显著性(P<0.05);EMs疼痛组与无痛组的表达差异有显著性(P<0.05);ER蛋白在EMs重度疼痛组组织中阳性灰度值高,而在轻度疼痛组灰度值低,三组间比较差异均有显著性(P<0.05).结论 内异症病灶局部雌激素受体表达增加,可能与子宫内膜异位症疼痛的发生、发展密切相关.