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天花粉蛋白注射终止瘢痕子宫、前置胎盘中期妊娠的临床观察
引产作为计划外妊娠的一种补救措施,一些特殊的中期妊娠引产也是临床工作中的棘手问题.选择一种安全、有效的引产方式是很重要的.本院自1998年至今采用天花粉蛋白注射液用于这类合并症的中期妊娠29例.取得良好的临床效果,总结如下.
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天花粉蛋白注射治疗未破裂型异位妊娠39例临床分析
目的研究天花粉蛋白肌注治疗未破裂型异位妊娠患者的疗效.方法选择未破裂型异位妊娠患者39例,天花粉蛋白皮试阴性后,予以肌注天花粉蛋白试探量,2 h后无不良反应予以肌注天花粉蛋白1.2 mg,同时行地塞米松肌注抗过敏治疗,注药后1周复查血β-hCG,下降未达50%或下降后又上升者行天花粉蛋白1.2 mg二次肌注.结果39例患者中,36例经一次注射天花粉蛋白即治愈,治愈率达92.3%,另3例患者经二次注射后也均达治愈,7例患者出现局部肌注部位皮肤红肿热痛,发生率为17.9%,3例出现低热、咽痛不适,发生率为7.7%,经金黄散湿敷等对症治疗后短时间内不良反应消失.结论天花粉蛋白注射治疗未破裂型异位妊娠是一种安全、经济、有效的治疗方法.
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剖宫产术后子宫瘢痕妊娠39例临床分析
目的:探讨剖宫产术后子宫瘢痕妊娠(CSP)的临床特点、诊断和治疗方法.方法:回顾分析2005年4月至2012年6月我院收治的39例CSP患者的临床资料.结果:39例CSP患者均有剖宫产手术史,其中4例有2次剖宫产史.39例CSP患者中,16例误诊为宫内妊娠,其中10例行清宫术中发生阴道大出血伴失血性休克,5例行药物流产失败,复查阴超确诊;1例引产分娩过程中发生大出血,出血量超过3000ml,彩超提示胎盘植入瘢痕;其余23例结合病史及阴道彩超确诊.12例CSP患者行天花粉蛋白+米非司酮杀胚治疗,9例成功,3例失败者行子宫动脉栓塞术,后行腹腔镜下局部病灶切除术+子宫修补术.26例行子宫动脉介入及栓塞治疗,22例成功,4例未能吸出孕囊而行腹腔镜下病灶切除术.1例行子宫全切术.患者均痊愈出院.结论:剖宫产史及超声检查可为CSP的诊断提供重要依据.子宫动脉介入及栓塞治疗、花粉蛋白+米非司酮是治疗CSP的安全有效的方法.
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天花粉蛋白诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡机制的研究
目的：探讨天花粉蛋白（ TCS）诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及与凋亡相关蛋白bcl-2表达相关性。方法利用CCK-8检测不同浓度TCS对MDA -MB-231细胞生长抑制作用；通过流式细胞仪（ FCM ）测定天花粉蛋白作用后MDA-MB-231细胞周期及细胞凋亡变化情况；利用流式细胞仪观察不同浓度天花粉蛋白作用于MDA-MB-231后bcl-2蛋白表达情况。结果随着TCS浓度升高、作用时间延长，人乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长受到明显抑制，且存在剂量效应和时间效应关系；TCS在一定浓度范围内能诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡，使细胞阻滞于G1期，并使细胞中bcl-2蛋白表达下降。结论 TCS能通过促进细胞凋亡来抑制人乳腺癌MDA-MB-231的生长，bcl-2表达下降可能是TCS诱导人乳腺癌MDA-MB-231凋亡的分子机制之一。
关键词： 天花粉蛋白 乳腺肿瘤 MDA-MB-231 BCL-2蛋白 -
三联药物治疗异位妊娠疗效观察
2008年7月～2010年6月,我们采用天花粉蛋白联合米非司酮辅佐中药保守治疗未破裂的异位妊娠156例,取得良好效果.现报告如下.临床资料:异位妊娠符合药物保守治疗条件[1]的患者156例,年龄19 ～41岁,平均29.5岁.经产妇64例,初产妇92例.其中有不孕不育史13例,重复异位妊娠22例.
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天花粉蛋白诱导胃癌细胞LoVo凋亡的实验研究
目的:通过对天花粉蛋白诱导胃癌细胞LoVo凋亡实验的研究,为TCS治疗胃癌提供理论依据.方法:用10％小牛血清、青霉素、链霉素的RPMI 1640培养基置于37℃,5％ CO2孵箱内培养,培养液均匀接种于6孔培养板,6孔分设为空白对照组、TCS低剂量组、TCS高剂量组,每孔加药10μL,72 h后,分别放入FCM试管,进行FACS检测.结果:TCS低剂量组、TCS高剂量组胃癌细胞LoVo凋亡率、LoVo细胞DNA含量、细胞周期分布的影响与空白组比较均有显著统计学意义(P＜0.01),且TCS高剂量组胃癌细胞LoVo凋亡率、LoVo细胞DNA含量均高于TCS低剂量组.结论:TCS抗肿瘤疗效与化疗药物比有明显优势,有利于临床推广应用.
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天花粉治疗异位妊娠过程中血β-HCG浓度曲线的动态变化
目的:测定用天花粉保守治疗异位妊娠患者血中的β-HCG,并画出其浓度曲线的动态变化,来了解用天花粉治疗异位妊娠用药的佳时期和治疗时间.方法:选择本院2008年9月-2009年10月收住人院确诊为异位妊娠用天花粉蛋白注射治疗的299例患者,按治疗期间血β-HCG升高与降低的不同分为A、B两组,A组:第1次用2.4 mg天花粉蛋白注射后血β-HCG值上升超过用药前水平,于第2次用1.2 mg天花粉蛋白注射后逐渐下降.B组:第1次用2.4mg天花粉蛋白注射后血β-HCG值呈逐渐下降.结果:首次血β-HCG值大于5000 mIU/ml有32例占10.7%,小于500 mIU/ml有47例占15.7%,在500 mIU/ml-5000 mlU/ml有220例占73.5%,本次实验选择首次浓度在500 mIU/ml-5000 mIU/ml已经治疗成功的220例作为研究对象,然后画出血β-HCG浓度曲线,观察曲线的动态变化.结论:利用血β-HCG浓度曲线的动态变化能掌握首次注射天花粉治疗异位妊娠的敏感性,对血β-HCG值上升超过用药前水平要补注天花粉蛋白应尽量集中在血β-HCG值下降至峰值50%之前时使用治疗效果佳,总疗程比首次用药既敏感的治疗时间要长.
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天花粉蛋白对单纯疱疹病毒-1DNA复制的影响
目的 探讨天花粉蛋白对体内外单纯疱疹病毒-1(HSV-1)DNA复制的抑制作用.方法 昆明小鼠40只随机分为模型对照组和天花粉蛋白治疗组,各20只.模型小鼠颅内接种HSV-1建立病毒性脑炎模型.治疗组于接种HSV-1前30 min腹腔注射天花粉蛋白注射液;对照组予等量9 g/L盐水.2组于接种病毒后12、24、48、96 h分别测定脑组织HSV-1DNA复制水平.体外培养神经细胞分为病毒对照组和药物预处理组,接种病毒后12、24、48、96 h分别测定各组培养神经细胞HSV-1DNA复制水平.结果 天花粉蛋白治疗组于小鼠颅内接种HSV-1后12、24、48、96 h脑组织HSV-1DNA复制水平分别为(1 535±656、1 468±608、1 657±643、1 425±534)×106拷贝/mL,显著低于模型组(4 336±1 350、5 256±1 837、5 379±1 975、5 946±2 769)×106拷贝/mL(Pa ＜0.001).药物预处理组在12、24、48、96 h后培养神经细胞HSV-1DNA复制水平分别为(1 775±743、1 347±687、1 254±543、1 276±525)×106拷贝/mL,显著低于病毒对照组(4 653±1851,5 120±2110,5 045±1867,4 995±2578)×106拷贝/mL(Pa ＜0.001).结论 天花粉蛋白对体内外HSV-1DNA复制具有抑制作用.
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天花粉蛋白抗肿瘤机制研究进展
天花粉蛋白是从中药天花粉中提取纯化的一种活性蛋白,具有抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡;抑制肿瘤细胞蛋白质的合成;增强NK细胞的杀伤活性以及免疫调节等作用,有着良好的研究前景及实用价值.
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甲氨喋呤和天花粉蛋白治疗剖宫产术后子宫瘢痕妊娠的效果比较
目的 比较甲氨喋呤和天花粉蛋白治疗剖宫产术后子宫瘢痕妊娠(CSP)的临床效果.方法 选取上蔡县妇幼保健院2015年1月至2016年12月收治的50例CSP患者,按照随机数表法分为两组,各25例.给予对照组患者甲氨蝶岭肌内注射治疗,给予观察组患者天花粉蛋白肌内注射治疗,比较两组患者的临床效果和不良反应发生情况.结果 两组患者治疗前孕酮及β-HCG水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);治疗后观察组患者孕酮、β-HCG水平低于对照组,不良反应发生率低于对照组,差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 采用天花粉蛋白治疗CSP效果显著,不良反应少,值得临床推广.
关键词： 甲氨喋呤 天花粉蛋白 剖宫产术后子宫瘢痕妊娠 疗效 -
天花粉蛋白与米非司酮、甲氨蝶呤治疗未破裂异位妊娠疗效比较
异位妊娠是指受精卵在子宫体腔以外部位着床而发生的妊娠.由于人绒毛膜促性腺激素(HCG)检查技术及先进彩色B超仪器的推广,现在不少异位妊娠患者在流产或破裂前得以诊断,为非手术治疗创造了条件.我院自2002年以来,采用天花粉蛋白与米非司酮、甲氨蝶呤(MTX)保守治疗未破裂异位妊娠87例,疗效满意,现报告如下.
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重组天花粉蛋白研究进展
目的 天然天花粉蛋白(TCS)是一种拥有抗肿瘤、抗病毒的核糖体失活蛋白,但在临床应用时有细胞毒性强和诱导严重过敏反应等不良反应.利用基因工程技术和化学修饰的方法对天然TCS进行改造和修饰,以期获得高效、低毒和低免疫原性的TCS供临床和研究使用,是当前研究的热点课题,文章综述了该领域的新近研究进展.
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天花粉蛋白的构效关系及进入细胞的途径
天花粉蛋白(Trichosanthin, TCS)因具有妊娠引产、抗肿瘤、抗病毒及免疫调节等多种药理学作用而倍受关注.研究天花粉蛋白的结构特征,明确其活性中心及过敏原性区域对于深入了解天花粉蛋白的生物学功能十分重要.该文对近年来关于天花粉蛋白构效关系的研究进展作了综述,并着重介绍了天花粉蛋白进入细胞的具体途径,为研究其他的核糖体失活蛋白提供新的思路.
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天花粉蛋白作用机制研究进展
天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)是从葫芦科科植物栝蒌的块根中分离纯化得到的一种碱性蛋白,属于Ⅰ型核糖体失活蛋白(Ribosome Inactivating Proteins, RIPs).TCS成熟肽是由247个氨基酸残基组成,分子量约24 000,pⅠ=9.4,为不含糖的单链核糖体失活蛋白.天花粉蛋白一直以来多用于引产临床治疗妇科疾病,如宫外孕,葡萄胎,绒癌等.另外,因其具有 N2糖苷酶活性 ,能水解真核细胞核糖体的 28SrRNA 的 4324 位上的腺苷酸的 N-C糖苷键,使核糖体不可逆失活,从而抑制蛋白质的合成,使得其应用范围已涉及抗肿瘤、抗病毒,免疫调节等方面.
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不同剂量的天花粉蛋白对Caski细胞凋亡的影响
目的 探讨天花粉蛋白(TCS)对人宫颈癌Caski细胞生长的抑制作用及量-效关系.方法 不同浓度TCS作用于体外培养人宫颈癌Caski细胞株,采用吖啶橙荧光染色,荧光显微镜观察TCS对Caski细胞的生长抑制作用;透射电镜和TUNEL检测法观察Caski细胞凋亡及TCS诱导Caski细胞凋亡的量效关系.结果 TCS对Caski细胞的生长具有明显的抑制作用,透射电镜和TUNEL法证实该抑制作用是通过诱导细胞凋亡实现的.在一定浓度范围内,细胞凋亡数与TCS的浓度之间有剂量依赖性.结论 TCS能诱导体外培养Caski细胞凋亡,佳浓度为60μg/ml.
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天花粉蛋白对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究
目的 通过建立荷U14小鼠宫颈癌模型,从个体水平初步探索天花粉蛋白(TCS)对荷瘤小鼠体内抗肿瘤活性.方法 建立荷U14小鼠宫颈癌模型,TCS治疗,检测抑瘤率、脾指数、流式细胞术分析T细胞亚群.结果 TCS治疗组,脾指数明显高于阴性对照组,C JD+;8较阴性对照组、CTX组明显减少(P<0.05);与正常组比较无显著性差异.TCS组的C JD+;4/C JD+;8较阴性对照组、正常组明显增大(P<0.05);与CTX组比较无显著性差异.结论 在体内,当TCS的剂量为0.2 mg/kg时,具有一定的免疫调节和增强体液免疫功能作用.
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Smac基因过表达联合天花粉蛋白对Caski细胞凋亡的影响及其相关机制的研究
目的 探讨Smac基因过表达联合天花粉蛋白(TCS)对人宫颈癌Caski细胞凋亡影响及其相关机制.方法 构建真核表达质粒pcDNA3.1(-)/Smac,稳定转染入宫颈癌Caski细胞后,筛选Smac高表达的细胞株Caski/Smac；RT-PCT和Western blot法分别用于测定Smac基因在mRNA和蛋白水平上的表达水平；MTr法观察Smac高表达对Caski细胞生长及对TCS敏感性的影响；流式细胞仪分析TCS对Caski细胞凋亡的影响.结果 ①TCS能诱导Caski细胞内Smac基因表达,且呈时间与浓度依耐性；②成功获得Smac基因高表达的细胞株Caski/Smac；③Smac高表达使Caski细胞生长速度明显减慢(P＜0.01),且对TCS的敏感性显著性增加(P＜0.01)；④TCS作用于Caski细胞可诱发其凋亡,但Smac高表达的细胞凋亡更为明显,差异具有显著性(P＜0.01).结论 Smac基因过表达能增加Caski细胞对TCS的敏感性,在同等药物浓度下能更明显抑制细胞增殖和促进其凋亡.此外,TCS也能够诱导细胞中Smac基因表达,这可能是其促细胞凋亡的机制之一.
关键词： Smac/DIABLO 宫颈癌细胞 天花粉蛋白 基因 -
天花粉蛋白对同种胰岛移植排斥反应的抑制作用
目的 探讨天花粉蛋白对小鼠同种胰岛移植排斥反应的抑制作用及其机制.方法 行BALB/C小鼠至C57BL/6小鼠的同种异基因胰岛移植,实验组腹腔注射天花粉蛋白,移植后每天测血糖,了解胰岛移植物存活时间.检测各组T细胞增殖水平及脾脏T细胞的组成比例.结果 实验组和对照组胰岛移植物存活时间分别为(12.2±1.7)d和(9.7±1.4)d,实验组有所延长(P＜0.05).天花粉蛋白注射后T细胞对供体特异性抗原刺激的增殖反应明显减弱(P＜0.01)；脾内调节型T细胞比例上升.结论 天花粉蛋白对小鼠同种胰岛移植排斥反应有一定抑制作用；其机制可能与天花粉蛋白抑制小鼠的抗原特异性T细胞增殖及上调调节型T细胞有关.
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重组天花粉蛋白的原核表达、纯化及其对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响
目的 克隆天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)的cDNA,构建原核表达TCS的质粒,从表达菌中分离纯化重组天花粉蛋白(rTCS)后,分析rTCS和nTCS(天然天花粉蛋白)对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响.方法 RT-PCR技术从新鲜栝楼叶片中扩增TCS cDNA,测序鉴定后克隆入表达载体pET-28a(+)并转化入BL21(DE3)细胞.IPTG诱导表达后,用金属镍螯合层析法纯化rTCS蛋白,MTT法分别检测rTCS和nTCS处理24、48和72 h对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响.结果 1.成功克隆获得TCS的cDNA并构建pET-28a(+)-TCS原核表达质粒;该cDNA的碱基序列与基因库中注册的序列99.4%同源;2.在BL21(DE3)菌中,IPTG可诱导重组TCS蛋白表达,且表达的TCS主要以包含体的形式存在.在一定的时间范围内(0～8 h);rTCS的表达水平与诱导时间正相关;3.用Ni-NTA树脂亲和层析法,从诱导表达菌中获得了高纯度的重组TCS蛋白;4.MTT法分析表明,rTCS和nTCS均对He-La宫颈癌细胞的生长具有抑制作用.在0～100μg/ml的浓度范围内,随着药物浓度的增加及作用时间的延长,rTCS和nTCS时HeLa细胞的生长抑制率逐渐增大,且各组之间差异有统计学意义(P<0.05);rTCS的IC50小于nTCS.结论 本实验克隆了TCS的cDNA,构建了表达载体pET-28a(+)-TCS,并成功地在E.coli中原核表达和纯化出重组TCS蛋白,发现纯化的rTCS和nTCS对HeLa细胞的生长都有明显抑制作用,并且rTCS的细胞毒性小于nTCS.
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天花粉蛋白对宫颈癌HeLa细胞凋亡及bax、bcl-2基因表达的影响
目的 研究天花粉蛋白对人宫颈癌HeLa细胞的诱导凋亡作用并探讨其对凋亡相关基因bax和bcl-2表达的影响.方法 不同浓度天花粉蛋白分别处理HeLa细胞24～72 h后,MTT法检测细胞的生长活性,显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期,Western Blot检测凋亡相关蛋白bax,bcl-2的表达.结果 显微镜下观察到细胞圆缩,染色体凝聚等凋亡细胞的形态学改变,流式细胞仪直方图上亦出现特征性的亚二倍体峰,随着天花粉蛋白浓度的增加,bax基因的表达增加而bcl-2的表达减少.结论 天花粉蛋白对HeLa细胞的生长具有抑制作用,可诱导宫颈癌HeLa细胞发生凋亡,bcl-2蛋白的减少与bax蛋白表达增多可能是HeLa细胞凋亡的机制之一.
