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EB病毒感染再激活合并冠状动脉扩张
1964年,Epstein等[1]于Burkitt淋巴瘤细胞培养液中首次发现EB病毒(epstein-barr virus,EBv),正式归为人疱疹病毒-4(HHV-4),是已知的八种人疱疹病毒之一。与其他人疱疹病毒特性一致,EB病毒首次感染后可对正常宿主淋巴细胞形成终生潜伏感染[2]。10岁内儿童,首次EB病毒感染常表现为急性起病而无典型临床症状,青少年期原发EB病毒感染则常表现为传染性单核细胞增多症[3]。急性EB病毒感染可出现神经、血液、肝脏等系统严重并发症,累及心脏可引起心肌炎和心脏传导障碍,但致冠状动脉扩张报道罕见,现报道如下。
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实验性氟暴露对成骨细胞成骨功能表达的影响
我国不仅地方性氟病流行区域广,患者多,工业氟暴露对工人健康的影响也较明显.过量的氟摄入可引起全身骨及其他组织损害[1].其异常改变与氟中毒导致骨形成及骨矿化异常有关,但其机制尚不清楚.我们拟通过离体SD大鼠成骨细胞培养,研究过量氟对成骨细胞成骨活性的影响,从而在细胞学水平了解氟骨症的机制.碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OC)是成熟成骨细胞合成和分泌的两种主要的非胶原蛋白,代表成骨细胞活性状态,是检测骨形成的指标.因此,我们通过成骨细胞ALP活力及细胞培养液中OC水平测定,了解氟过量对骨形成过程的影响.
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内皮素与肾缺血再灌注损伤
内皮素(endothelin,ET)是1988年由日本学者Yanagisawa等从猪主动脉内皮细胞培养液中分离纯化出来的一种由21个氨基酸组成的具有强烈缩血管作用的血管活性肽,是调节心血管功能的重要因子,对维持基础血管张力与心血管系统稳态有重要作用.其中内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)是迄今为止发现的作用强的缩血管物质[1].其引起的血管收缩、代谢紊乱和细胞增殖是与血管损伤有关疾病的共同致病因素.本文仅就近年来ET在肾缺血再灌注损伤(ischemic reperfusion injury,IRI)中的作用做一概述.
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维生素E抗衰老
维生素E能抗衰老吗?能延年益寿实验表明,人类胚胎的肺细胞,其繁殖分裂的传代数仅为50次,若在人胚细胞培养液中加入维生素E,那么,其繁殖分裂的传代数可超过120次.此外,动物实验表明,维生素E可使大白鼠的寿命延长30%;再者,维生素E可减少恶性肿瘤的发生率.
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不同葡萄糖浓度对人牙龈成纤维细胞在钛表面附着和生长的影响
随着人们经济水平的大幅提高和糖尿病发病率的增长,在要求种植修复缺失牙齿的人群中糖尿病患者的比例不断提高,而糖尿病是影响种植修复成功的风险因素之一[1]。以往学者[2]研究糖尿病对种植修复的影响大多集中在骨整合方面,而糖尿病对牙龈组织在种植体表面黏附结合的影响的相关研究却鲜有报道。本研究在体外模拟高血糖环境,配制不同葡萄糖浓度细胞培养液培养人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)并接种于纯钛表面,观察不同培养时间HGFs的附着数量和生长形态的变化,以期指导口腔医师在临床实践中为糖尿病患者选择正确的种植修复时机提供理论参考。
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单克隆抗体亲和层析一步纯化重组人生长激素
单克隆抗体亲和层析技术可用来从体液、组织抽提液、细胞培养液中,特别是从基因工程菌体破碎液等复杂组成物中分离出微量蛋白质和多肽.由于其特异性高,操作简便而迅速,在高价值蛋白质和治疗用多肽的下游处理过程中,作为一种良好的分离纯化工具,有较广泛的适用性.本文运用该技术从人生长激素(hGH)基因工程菌发酵破碎液中一步分离制备高纯度并具有生物活性的重组hGH.
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调肝方药对慢性束缚应激大鼠神经内分泌免疫功能的影响
七情致病理论及其防治是中医病因病机学中的一个重要内容,但目前相关研究较少,现代医学中的心理应激理论与中医七情学说在认识上存在着许多共同点,从应激角度出发,结合中医"怒伤肝"的理论,以束缚制动作为应激原,复制慢性激怒应激反应大鼠模型,并探讨调肝方药(TGFY)对应激大鼠神经内分泌免疫功能的影响。1 材料与方法1.1 主要试剂 细胞培养液RPMI-1640(Gibco产品),刀豆素A(ConA,Sigma产品),3H-TdR(中国科学院原子能研究所产品),莨菪葶(9.61μg,Sigma产品),辣根过氧化物酶(HRP,10μg,Sigma产品),十四酰佛波乙酸酯(PMA,100ng,Sigma产品)。125I-CRH、125I-ACTH、125I-CORT放免检测药盒(美国DPC产品)。1.2 大鼠应激模型制作及分组处理 雄性Wistar大鼠,体重250~300 g,分为正常对照组10只(正常饮食,不给任何刺激);慢性束缚应激组1O只(给予束缚刺激,正常饮食,不给中药治疗);调肝方药组10只(给予束缚刺激的同时灌胃调肝方药)。慢性束缚应激反应大鼠模型的制作取雄性Wistar大鼠20只,体重250~300 g,每2只一笼,每日给予黑暗和光照各12 h,20~22℃,同时给予每日1次成对双后肢的立式束缚,以引起明显的激怒应激反应(粗叫、站立对峙、扭打嘶咬),首次30min,以后隔日增加10min,共2 w。普通饲料,自由饮水。于实验第13天和第14天在动物清醒、安静状态下断头处死取材。1.3 药物组成剂量及给药方法 所用中药均由本校第一附属医院药房提供的纯正药材。调肝方药组成及剂量:柴胡15g、白芍15 g,香附10 g,山萸肉15 g,郁金10 g,枳壳10g。将上述药物制成100%水煎剂,每毫升含生药1 g,给予大鼠1 ml/100 g体重灌胃,每日2次,共2 w。对照组及应激组灌服等量生理盐水。
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结核患者外周血单个核细胞培养液及外周血骨桥蛋白水平检测及其临床意义
国内外许多研究表明结核感染的发生与机体细胞免疫功能失衡有关,体内细胞因子及Th1/Th2应答平衡对结核病的进展、预后发挥重要影响作用.近年来国外研究发现一种与骨代谢密切相关的分泌型细胞外基质磷蛋白Ⅰ,又称骨桥蛋白Osteopontin,OPN)与结核病的发病有一定的关系[1].我们对44例结核患者外周血骨桥蛋白、IL-l8及IL-4水平进行检测,并与20例健康者进行对照,同时检测外周血单个核细胞经卡介苗刺激后培养上清液中OPN、IL-18、IL-4水平变化,以了解骨桥蛋白在结核发病中的作用.
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脑血管痉挛发病机制相关因素的研究进展
蛛网膜下腔出血(SAH)后30%~70%患者发生脑血管痉挛(CVS),其中40%患者发生迟发性神经功能缺损,是SAH患者致残和致死的主要原因。近年研究发现CVS病因是多因素的,氧合血红蛋白(OxyHb)、内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、降钙素基因相关肽(CGRP)、蛋白激酶C(PKC)、钾通道都参与CVS的发生,现就近年的研究进展综述如下。 1 内皮素 ET是1988年首次由Yanagisawa等从猪主动脉内皮细胞培养液中分离提纯的一种生物活性肽,包括3种异构形式ET-1、ET-2、ET-3,研究多的是ET-1,存在于中枢神经系统中,ET合成是先由203个氨基酸的内皮素前体在血管内皮细胞胞内分裂,形成38个氨基酸的大ET,再由内皮素转换酶(ECE)蛋白水解生成21个氨基酸的ET,与血管平滑肌细胞膜上特异性受体结合,激活磷脂酶C,水解成三磷酸肌醇(IP3)和二酰甘油(DAG),IP3促进细胞外钙内流和细胞内钙动员,细胞内钙升高,血管收缩。是目前发现作用强且持续久的血管收缩剂。
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鹅血对肝癌细胞株抑瘤作用的实验研究
1 实验资料供血鹅:武汉市商品白鹅(品种为太湖鹅)10只,26周龄,体重3~5kg,用5~10ml一次性消毒注射器抽取鹅翅翼内静脉新鲜血.实验时用细胞培养液制备成5种浓度梯度的鹅血稀释液,浓度分别为20%、10%、5%、2.5%、1.25%.瘤株:肝癌细胞株MHCC97由我院中心实验室提供.主要试剂及仪器:甲基噻基四唑MTT(美国Sisma)、二甲基亚砜DMSO(美国Sigma)、RPMI1640细胞培养液(Gibco)、胎牛血清(美国sism)、0.25%胰酶、分析纯.Napco5410型CO2培养箱(美国BIO-RAD公司)、MicrolateReader 450酶标仪、96孔细胞培养板等.
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内皮祖细胞诱导生物血管基质材料内皮化研究
目的了解骨髓干细胞诱导分化成内皮细胞及在生物材料进行种植的可行性,为血管组织工程提供资料.方法取正常健康人(2~50岁)骨髓,加淋巴细胞分离液,经密度梯度离心后获得单核细胞,再运用微磁珠和单抗选择出CD45和GlyA都为阳性的细胞.用60%低糖DMEM,40%MCDB-201(Sigma),1×胰岛素铁传递蛋白硒,1×linoleic acid bovine serum albumin(BSA),10-9M地塞米松(Sigma),和10-4 M 2-磷酸盐维生素C(Sigma),100 U青霉素,和1000 U链霉素(Gibco).培养.用无血清、EGF or PDGF,含20ng/mL VEGF-B骨髓干细胞培养液培养,分化的细胞通过免疫荧光激光共聚焦检测KDR,vWF,CD34,的表达,以确定是否已分化成内皮细胞.
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芒果甙对肝癌可溶性E-上皮钙黏蛋白及癌胚抗原和单胺氧化酶的影响
上皮型钙黏蛋白(E-cad)是细胞黏附分子和信号转导分子,近已被认为是抑癌因子.近来有报道,E-cad的胞外肽段在一定条件下可发生蛋白水解作用而释放到血液中,并发现某些恶性肿瘤如大肠癌、卵巢癌、肺癌等患者血清(浆)中可溶性E-cad含量明显升高,治疗后(如手术)下降,可作为一种疾病疗效和判断预后的指标.而芒果甙被认为具有抗脂质过氧化、增强免疫功能和抗肿瘤作用[1].表皮生长因子(EGF)是一种细胞促分裂剂(丝裂原),能使上皮细胞向癌变转化.为探讨芒果甙的抗肿瘤作用及其机制,我们建立大鼠肝癌模型,检测肝癌发生后大鼠血清中可溶性E-cad的含量变化,并与其他肿瘤标志物进行比较,同时测定细胞培养液中可溶性E-cad的含量变化,观察芒果甙对这些标志分子的影响.
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血管内皮生长因子的研究进展及其在缺血性脑血管病的应用前景
血管内皮因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),也称血管渗透因子(vascular permeability factor,VPF),是在1989年由Ferraral等牛垂体泡星状细胞培养液中利用硫酸铵析出、肝素琼脂糖亲和层析法及两次反相高压液相色谱纯化得到的一种糖蛋白.
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女性急性心肌梗塞患者血清CA125的变化及其意义
Bast等人用卵巢浆液性乳突状束腺癌细胞系OVCA 433免疫BALB/c小鼠,并与骨髓瘤杂交得到一株单克隆抗体,将其命名为OC125,而该单抗所识别的抗原被取名为CA125[1].从细胞培养液或血清中分离出来的CA125抗原为极不稳定的糖蛋白,其抗原决定簇不在碳水化合物的组分上而是存在于蛋白质部分,由于80%卵巢上皮癌患者的癌组织及血清内存在CA125,因此,CA125又被称为卵巢癌相关抗原,临床上主要用于间皮细胞及苗勒氏管衍生物所发生的诸如卵巢上皮癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈腺癌及间皮瘤等的诊断和监测.为了探讨血清CA125的变化与女性急性心肌梗塞(AMI)的关系,我们进行了30例女性正常人和32例女性急性心肌梗塞患者的血清CA125的检测,并对其影响机制作了初步探讨.
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基于替代分析物的亲水作用色谱串联质谱法定量检测细胞培养液中酪氨酸含量
目的 通过准确测定细胞培养液中酪氨酸含量,无损地动态监测肺癌细胞系相较于非肿瘤细胞系的异常酪氨酸代谢.方法 收集16HBE、PC9和HCC827各细胞系培养24、48和72 h后的细胞培养液样本,通过建立基于酪氨酸替代分析物的HILIC-MS/MS方法,定量检测不同时间点各细胞培养液中的酪氨酸含量.结果 该方法在1~ 40 μg/mL的范围内表现出良好的线性关系(R=0.999 9),相对回收率为93.02%~102.53%,重复性好(3.91%~8.69%).结论 该方法适用于细胞培养液中酪氨酸的测定,可用于观察肺癌细胞系的特异性酪氨酸代谢.
关键词: 酪氨酸 替代分析物 亲水作用色谱串联质谱法 细胞培养液 -
IL-1β在急性脑缺血中作用机制的研究进展
1972年Gery等人发现的人类白细胞培养液中含有的一种可溶性物质,后命名为IL-1. 而作为IL-1的一种亚型的IL-1β,开始被人们所逐渐关注.1 IL-1β1.1 IL-1β生成的调节 体内许多细胞在一定环境下都会产生IL-1β,以单核细胞为主. IL-1β的诱导生成过程中,模式识别受体扮演着十分重要的角色. 现发现参与IL-1β生成的模式识别受体有4 种, Toll 样受体( TLRs )家族、Nod 样受体( NLRs)家族、RIG-1样受体家族及C型凝集素受体家族[1].,磷酸化的IκK进一步促使NF-κB生成,NF-κB再促进IL-1β生成.
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α-L-岩藻糖苷酶检测的临床应用
α-L-岩藻糖苷酶(α-L-Fucosidase,AFU)是一种溶酶体酸性水解酶,分类名为α-L-岩藻糖苷岩藻糖水解酶(EC3.2.1.51).基本生理功能是催化含岩藻糖基的低聚糖、糖肽、糖蛋白和糖苷的分解代谢.广泛分布于人体内的各种组织、细胞及体液中.如肝、脑、肾、胰、胎盘组织;细胞培养液中的成纤维细胞、白细胞以及血清、尿液、唾液、泪液和垂体液中均含此酶.
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纯甘油保存人羊膜治疗翼状胬肉的临床研究
目的观察纯甘油保存的人羊膜用于原发性及复发性翼状胬肉治疗的临床疗效 ,并与细胞培养液(DMEM)加二甲亚砜(DMSO)保存的人羊膜进行比较,探讨简便实用的羊膜保存方法. 方法对82例(90眼)翼状胬肉患者行翼状胬肉切除术联合羊膜移植术,随机对61例(65眼)联合使用纯甘油保存的羊膜(甘油组),包括45例(48眼)初发性翼状胬肉及16例(17眼)复发性翼状胬肉.21例(25眼)联合用细胞培养液加二甲亚砜保存的羊膜( DMEM+DMSO组),包括15例(18眼)初发性翼状胬肉及6例(7眼)复发性翼状胬肉.术后定期随访观察. 结果术后随访7~29月,平均(16.2±6.3)月.共8眼复发,其中甘油组6 眼复发,包括初发性翼状胬肉3眼和复发性翼状胬肉3眼.DMEM+DMSO组2眼复发 ,均为初发性翼状胬肉.2组复发率经х2检验(х2=0.061,P>0.05)差异无显著性,2组初发性翼状胬肉复发率(х2=0.215,P>0.05)及复发性翼状胬肉复发率( Fisher's test,P=0.333)均无统计学差异. 结论纯甘油羊膜移植治疗初发性翼状胬肉及复发性翼状胬肉均取得满意疗效. 纯甘油保存羊膜是一种安全、简便、有效的羊膜保存方法.
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角膜缘干细胞培养液影响血管内皮细胞增殖的实验研究
本研究通过体外细胞培养的方法观察角膜缘干细胞培养上清液对人脐静脉血管内皮细胞增殖的影响.
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缺血性脑血管病患者血浆内皮素水平昼夜节律变化的研究
内皮素(Endothelin, ET)是1988年由日本学者Yanagisawa等从猪的主动脉内皮细胞培养液中发现的一种强效收缩血管的生物活性肽. ET具有促细胞增殖, 增加细胞内游离Ca2+浓度的作用[1].为探讨ET变化与缺血性脑血管病发生发展的关系, 我们检测了32例脑血栓急性期(3天内)和短暂性脑缺血发作(TIA)病人血浆24 h ET水平变化.