免疫学杂志
Immunological Journal 면역학잡지
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双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠TNF-α水平的影响
目的研究双氢青蒿素治疗对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠血清和肺泡巨噬细胞培养上清液TNF-α水平的影响.方法以醋酸可的松皮下注射Wistar大鼠建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型,用60 mg/kg双氢青蒿素治疗实验大鼠,杀鼠取肺,用胶原酶消化法分离肺泡巨噬细胞,用LPS刺激培养72h,同时设有感染组和正常对照.用TNF-α试剂盒分别检测血清和培养上清液TNF-α的水平.结果感染组和治疗组TNF-α水平均高于正常对照,治疗组TNF-α水平则低于感染组.结论卡氏肺孢子虫感染引起大鼠肺泡巨噬细胞分泌高水平的TNF-α,但双氢青蒿素治疗后PCP大鼠肺泡巨噬细胞产生TNF-α水平降低.
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肿瘤抗原MAGE-12的表位及二级结构预测
目的预测肿瘤抗原MAGE-12的a-螺旋二级结构、B细胞表位和MAGE-12的HLA-A2限制性CTL表位.方法用Garnier Robson和Chou-Fasman方案预测肿瘤抗原MAGE-12的α-螺旋二级结构;用Kyte-Doolittle亲水方案预测肿瘤抗原MAGE-12的B细胞表位;用简单基序(simple motifs)和延展基序(extended motifs)对肿瘤抗原MAGE-12的HLA-A2限制性CTL表位进行预测.结果 MAGE-12可能含有较多的α-螺旋;B细胞识别的表位可能在82～93残基(QSDEGSSNEE-QE)或附近和3～14残基(LEQRSQHCKPEE)或附近;发现1个HLA-A2限制性CTL表位为FLWGPRALV(271～279).结论用亲水性方案和基序法预测肿瘤抗原MAGE-12的B细胞表位和MAGE-12的HLA-A2限制性CTI表位,为实验方法探索MAGE-12的表位提供有用线索.
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RARE介导的视黄酸可调控的IFN-α表达载体的构建与鉴定
目的构建一个含视黄酸反应元件(RARE)的IFN-α表达载体,使其在真核细胞内的表达受视黄酸(RA)的诱导.方法运用DNA重组技术构建含有4个RARE重复序列的IFN-α真核表达载体(pRARE4-IFN-α),经酶切、PCR鉴定和测序确认后,用脂质体转染法使其转染HL-60细胞(人早幼粒白血病细胞系)、Bcap-37和MCF-7细胞(人乳腺癌细胞系),RA处理后,RT-PCR分析IFN-α mRNA水平,ELISA检测培养细胞上清中IFN-α含量.结果 pRARE4-IFN-α转染的HL-60、Bcap-37和MCF-7细胞,IFN-α分泌量为1 6～24 ng/(mL@106)细胞,而经RA处理24 h,IFN-α表达水平可增加8～13倍,但经RA处理24 h的细胞,换无RA的新鲜培养基继续培养24 h后,IFN-α表达水平又下降到25～34 ng/(mL@106)细胞.结论带有RARE的IFN-α表达载体转染细胞后,外源性IFN-α基因的表达受RA的诱导.
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重组人肿瘤坏死因子与阿霉素抗人结肠癌细胞株(SW480)的序贯作用研究
目的评价rHuTNF和阿霉素抗人结肠癌细胞株的序贯作用.方法采用克隆生成试验(Hamburger Salmon法).研究rHuTNF和DOX序贯作用于SW480细胞株后的抗增殖效果.结果对结肠癌细胞系SW480,存在DOX至rHuTNF序贯抗增殖作用;除反序贯给药情况外,出现显著的协同作用.结论在DOX存在情况下,TNF的抗瘤作用增强,从而支持DOX可干扰细胞保护机制以使瘤细胞对TNF细胞毒作用更为敏感的理论.
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α-MSH抑制内毒素血症大鼠不同组织表达巨噬细胞移动抑制因子mRNA
目的研究α-黑素细胞刺激素(α MSH)对内毒素血症大鼠不同组织表达炎症反应介质巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的影响,以探讨α-MSH的抗炎作用机理.方法SD大鼠腹腔注射LPS建立内毒素血症动物模型,静脉给予α MSH处理,采用半定量RT-PCR和northern印迹杂交的方法,检测大鼠不同组织MIF mRNA的表达.结果内毒素血症大鼠垂体、下丘脑、海马、大脑皮层及肾上腺和脾脏MIF mRNA的表达与正常大鼠比较明显增强,α MSH对大鼠垂体、海马、肾上腺和脾脏MIF mRNA的表达具有明显的抑制作用,但对大脑皮层和下丘脑部位MIF mRNA的表达无明显影响.结论α-MSH能抑制中枢神经系统和外周器官表达MIF可能在其抗全身炎症反应中起重要作用.
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人粘膜血管定居因子/GST融合基因表达载体的构建与表达
目的构建hMAdCAM-1/GST融合基因表达载体并进行表达.方法采用PCR技术扩增hMAdCAM-lcDNA5'端615 bp的基因片段,将其插入pGEM-T质粒中,经全自动序列分析仪测序证实后,再亚克隆至表达载体pGEX-2T,转化大肠杆菌DH5a表达.结果 sDS-PAGE检测显示,表达出相对分子量52 000 u的融合蛋白,占菌体总蛋白的31%左右.Western blot分析表明,表达蛋白能与抗hMAdCAM-1多抗特异性结合.结论 hMAdCAM-1/GsT融合基因表达载体的构建和表达,为深入研究MAdCAM-1提供了材料.
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转IL-3基因的骨髓基质细胞体外对造血功能的促进作用
目的探讨用逆转录病毒载体转入mIL-3基因的基质细胞系QXMSC1对骨髓造血细胞前体的影响.方法用含鼠IL-3基因的逆转录病毒载体感染骨髓基质细胞系QXMSC1,获得IL-3高表达细胞系QXMSC1 IL-3用于实验.观察QXMSC1 IL-3细胞上清对骨髓前体细胞CFU-GM、CFU-E、CFU-GEMM的影响,QXMSC1 IL-3基质细胞对长期培养起始细胞的影响.结果 QXMSC1 IL-3培养上清对骨髓前体细胞、CFU-GM、CFU-E、CFU-GEMM有明显促进作用.QXMSC1 IL-3能明显增加有核细胞数和长期培养起始细胞数,诱导分化形成CFU-GM增多.阻断基质细胞与造血细胞相互接触,QXMSC1IL-3促造血细胞增殖作用有所减弱.结论基质细胞QXMSC1 IL-3可能作为有效的基因载体进一步促进骨髓移植后或辐射损伤后的造血和免疫功能重建.
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衰变加速因子在Jurkat细胞增殖及分泌IL-2中的作用
目的研究衰变加速因子对CD3阳性与阴性Jurkat细胞的增殖效应及对IL-2分泌的影响.方法应用MTT比色实验观察交联DAF单抗DG3与固相化抗CD3联合作用对CD3阳性与CD3阴性Jurkat细胞增殖效应;IL-2依赖CTLL3H-TdR掺入实验检测CD3阳性与CD3阴性Jurkat细胞IL-2的分泌;细胞ELISA检测CD3阳性与CD3阴性Jurkat细胞IL-2R的表达.结果交联DG3可协助促进固相化抗CD3对CD3阳性Jurkat细胞的增殖效应和IL-2分泌,并可引起IL-2Re链表达增加,此作用可被Src家族酪氨酸激酶抑制剂PP2所抑制,而对CD3阴性Jurkat细胞无此作用.结论衰变加速因子可协同促进固相化抗CD3对CD3阳性Jurkat细胞的刺激增殖效应、IL-2分泌及IL-2R表达增加.
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肺癌DC融合细胞诱导的抗肿瘤免疫应答
目的研究肺癌DC融合细胞FLD-A11体内外诱导免疫应答的能力.方法用MTT法测定FLD-A11细胞诱导淋巴细胞增殖的能力;ELISA法检测其诱导淋巴细胞分泌IL-2的水平;LDH释放法测定FLD-A11细胞免疫后小鼠脾淋巴细胞的持异性CTL活性.结果 FLD-A11细胞能有效刺激淋巴细胞的增殖反应(SC:RC=1:50寸,SI=2.38),诱导淋巴细胞分泌IL 2.FLD-A11细胞免疫后,小鼠的胸腺和脾脏重量均高于对照组(P＜0.05),脾淋巴细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性显著高于对照组.结论 FLD-A11细胞具有诱导初次抗肿瘤免疫应答的能力,不仅能在体外诱导淋巴细胞的增殖和IL-2的分泌.而且体内免疫接种也能引起小鼠免疫器官的增生反应,产生针对Lewis肺癌的特异性CTL杀伤作用.
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幽门螺杆菌全菌抗原口服免疫BLAB/c小鼠的免疫应答机理研究
目的分析幽门螺杆菌全菌抗原的口服免疫应答反应.方法 ELISA分析免疫小鼠血清、唾液、粪便提取物特异抗体水平,ELISPOT分析胃粘膜、派伊尔小结(PP)抗原特异性抗体分泌细胞(ASC),RT-PCR分析PP T细胞因子mRNA表达水平.结果①口服免疫可诱导强烈的血清IgG反应和唾液、粪便提取物特异sIgA反应;②胃粘膜、PP结产生大量抗原特异性抗体分泌细胞(ASC),尤以sIgA-ASC型居多,PP结抗原特异性形成细胞(ASC)数量与特异抗体水平密切相关;③加佐剂免疫组小鼠PP T细胞,体外抗原刺激下,早期高表达IFN-γ,晚期高表达IL-4.结论全菌抗原和粘膜佐剂免疫可诱导H.pylori特异的系统、粘膜免疫应答,局部sIgA可能在抗H.pylori感染中具有重要作用,肠粘膜免疫主要诱导部位PP早期表现为TH1型优势应答,晚期则转为TH2型优势应答.
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氨茶碱对哮喘豚鼠嗜酸细胞凋亡及bcl-2 mRNA表达的影响
目的观察氨茶碱对体外不同密度嗜酸细胞(Eos)凋亡及bcl-2 mRNA表达的影响,探讨其促进哮喘Eos凋亡的机制.方法卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型48 h后行支气管肺泡灌洗,分离不同密度Eos.氨茶碱(AM)(10-5～10-3mol/L)干预24 h,原位杂交检测Eos的bcl 2 mRNA表达,TUNEL法检测细胞凋亡.结果 AM干预24 h,可见Eos凋亡增加,以低密度Eos(HEos)为明显,bcl 2 mRNA表达降低,呈剂量依赖性.bcl-2 mRNA的表达与Eos凋亡呈负相关.结论 AM可抑制bcl 2 mRNA表达,促进Eos凋亡.bcl-2参与了AM对Eos凋亡的调节.
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双表达载体研究GM-CSF对HCV C基因免疫应答的影响
目的 HCV C蛋白基因诱导的免疫应答较弱,因而增强HCV C蛋白基因免疫对于开发HCV疫苗具有极其的重要性.方法将GM-CSF基因与pc154基因插入双表达载体pcDNA3.0 BA构建成双价质粒pcDNA3.0 BApc154GM-CSF,肌肉免疫Balb c小鼠.结果 GM-CSF和pc154在Cos-7细胞中同时获得瞬时表达;pcDNA3.0 BApc154GM-CSF双价质粒较单价pcDNA3.0 BApc154诱导小鼠产生抗体的几何平均滴度显著增高(P=0.04),而pcDNA3.0 BApc154+pcDNA3.0BAGMCSF混合质粒较单价质粒pcDNA3.0BApc154诱导小鼠产生抗体的滴度极显著降低(P＜0.01).HCV C蛋白抗原特异性的脾淋巴细胞增殖能力,双价质粒较单价及单价混合质粒极显著增高(P＜0.01).结论双表达载体同时输送GM-CSF与pc154基因能增强Balb/c小鼠对HCV C蛋白基因的体液免疫应答及免疫鼠脾淋巴细胞对特异性抗原刺激的增殖能力.
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门静脉输注供体脾细胞诱导异基因大鼠心脏移植耐受
目的通过门静脉输注同种异基因脾细胞、腹腔给予环磷酰胺诱导同种心脏移植耐受,并探讨其耐受机理.方法经门静脉给予受体大鼠3×108个异基因供体脾细胞,2 d后腹腔注射80 mg/kg的环磷酰胺,10 d后实施心脏移植手术.观察、记录移植物的存活时间,通过MLR、DTH、IL 2逆转实验及过继性转移实验,探讨耐受机理.结果异基因心脏移植物的存活时间明显延长;MLR和DTH实验证明:受体大鼠的免疫应答受抑制,且该耐受表现为供体特异性;IL 2逆转实验、过继性转移实验表明:该耐受与克隆失活、抑制细胞和"感染”耐受机理有关.结论本诱导方案对于大鼠心脏移植存活时间的延长是一有效的方法,移植耐受的形成涉及多种机制.
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表达HLA-G1的K562细胞抵抗外周血NK细胞杀伤作用的研究
目的研究HLA-G1分子对NK细胞杀伤活性的影响.方法借助脂质体介导的DNA转染技术,将本室构建的真核表达质粒pcDNA3-HLA-G1转染人K562细胞;通过G418筛选,获得克隆化细胞株K562-G1;应用RT-PCR及流式细胞术分别在RNA水平和蛋白质水平检测HLA G1的表达;后,应用MTT比色法检测转染细胞对不同个体外周血NK细胞杀伤活性的抑制效应.结果与转染了空质粒的对照组相比,外周血NK细胞对K562-G1的杀伤率降低32.43%(P＜0.01).结论靶细胞表达HLA-G1分子可明显抑制NK细胞的杀伤效应.
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鼻咽癌组织EB病毒膜抗原和EB病毒核酸观察
目的观察分析EB病毒膜抗原和EB病毒核酸的存在及其在鼻咽癌诊断中的作用.方法应用抗EB病毒膜抗原(EBV MA)的单克降抗体检测51例病理确诊的鼻咽癌(NPC)活检标本的冰冻切片,以Southern杂交法检查20例鼻咽癌活检组织中EB病毒核酸(EBV DNA).结果其中49例有EBV MA的表达.经细胞形态学分析首次发现鼻咽癌细胞,增生上皮细胞以反正常鼻咽部上皮细胞部有EBV MA.而12例慢性炎症病例仅1例阳性,20例低分化鼻咽癌中17例存在与细胞转化有关的K片段.证实鼻咽癌组织中不仅有EB病毒核酸的重复序列W片段,还有与细胞转化有关的K片段的序列存在.结论进一步表明EB病毒在鼻咽癌的发生中并非"过客”,而可能是其病原重要因素之一.
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HSP70在慢性乙型肝炎患者肝组织中的表达及意义
目的探讨热休克蛋白70(HSP70)在慢性乙型肝炎肝组织中的表达及意义.方法采用免疫组化技术对36例慢性乙型肝炎和20例正常肝组织中HSP70的表达进行检测.结果慢性乙型肝炎和正常肝组织中肝细胞HSP70表达阳性率分别为45%和15%,两者相比差异显著(x2=6.3,P＜o.05);中度和重度肝炎HSP70阳性率明显高于轻度肝炎(阳性率分别为62.5%和30%,x2=3.9,P＜0.05);HSP70阳性细胞多位于灶性和碎屑样坏死区.结论肝细胞HSP70的异常表达在慢性乙型肝炎免疫保护中起重要作用,可作为肝组织损伤的一种标志.
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肾脏疾病时血与尿中的瘦素水平
目的探讨人瘦素(leptin.LEP)在肾脏疾病中的作用机制及其表达特征.方法采用放射免疫分析法对慢性肾功能衰竭等10组肾脏疾病患者进行血清和尿液中瘦素水平检测.观察其浓度变化与Cr、BUN的关系@并与30例正常人比较.结果 152例患者中,除肾积水组外,其它各组瘦素水平均不同程度高于对照组,差异显著(P＜0.01)慢性肾衰组瘦素含量随Cr、BUN增高而增高,呈正相关关系(r=0.40,P＜0.01.r=0.38,P＜0.05).尿液中瘦素在慢性肾炎和肾病综合症组含量增高,慢性肾衰和肾肿瘤组则较正常人降低.结论瘦素增高与多种因素有关,并与肾脏功能受损程度成正比.
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用mRNA差异显示方法寻找小鼠胸腺基质细胞差异表达基因
目的寻找并初步分析小鼠胸腺基质细胞差异表达基因.方法来源于小鼠胸腺基质细胞系的两株亚克隆细胞4(5)和4(12),前者可诱导前体T细胞的进一步成熟,分别提取该两株细胞的总RNA,利用mRNA差异显示方法(DD-PCR)筛选4(5)细胞特异表达的基因片段.结果得到了17个4(5)细胞特异表达的基因片段(expressed sequences tag,EST),其中14个代表了尚未登录的小鼠新基因,另外3个则分别与小鼠的cytochrome C oxidase,Hsp65,Eps8基因高度同源.结论 DD-PCR方法是一种优良的寻找新基因的方法,小鼠胸腺基质细胞可能分泌或表达更多的新因子或分子.
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抗凋亡抑制蛋白--survivin单克隆抗体的制备
目的制备抗survivin蛋白单克隆抗体.方法以大肠杆菌表达的survivin融合蛋白为抗原,免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合,建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系.结果获得了6株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系.6株单克隆抗体均能特异识别和结合大肠杆菌表达的survivin融合蛋白,但其中仅有3株能够结合肿瘤细胞系表达的天然survivin蛋白,并与某些肿瘤细胞系中50 000 u±分子量的未知蛋白存在交叉反应,与正常人外周血淋巴细胞样本未见任何反应.结论通过单克隆抗体的免疫印迹反应,可以观察survivin特定分子量蛋白的表达,为深入研究该蛋白的细胞凋亡调控功能提供了工具.此外,这些单克隆抗体对于肿瘤诊断也具有一定应用价值.
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亲和电泳酶免疫法快速测定AFP异质体
目的建立AFP异质体快速检测新方法,以促进其在临床上的普及.方法采用亲和电泳结合单克隆双抗体夹心酶免疫分析法.结果本法可在6 h内得出结果,灵敏度为1 ng/mL,高、中、低浓度AFP样本的结合型AFP(AFP h),平均CV为5.57%.临床应用表明,总AFP及其异质体(AFP-h)诊断原发性肝癌(PHC)的敏感性分别为73.5%和90.2%,特异性分别为63.5%和89.3%;准确度分别为84.6%和94.3%.结论本法简便快速、使过去亲和交叉免疫电泳自显影法的70 h缩短为6 h,而且灵敏度高,重复性好;AFP-h百分比与AFP含量无关;AFP-h诊断PHC的敏感性、特异性和准确度均优于AFP,并具有排除转移性肝癌和肝血管瘤的功能.
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超抗原SEA诱导T细胞失能体外实验模型的建立
目的建立超抗原诱导T细胞失能的体外实验模型.方法 SEA刺激人外周血淋巴细胞,再加入外源性的rIL2维持@建立短期SEA反应性T细胞系;进行Ficoll Hypaque密度梯度离心获取经SEA多次刺激过SEA反应性T细胞;加入处理过的PBMC作APCs,建立超抗原SEA诱导T细胞的活化组和失能组.结果 SEA和rIL-2共同作用可得到静息SEA反应性T细胞系;SEA反复刺激使T细胞处于一低反应状态,与活化组相比,其DNA合成能力明显下降,IL-2分泌显著减少,静息一段时间后,其增殖能力慢慢恢复.结论超抗原SEA多次刺激诱导SEA反应性T细胞处于失能状态.
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输精管吻合不育家兔皮质醇与IL-1、TNF-α变化
应用显微外科技术以来,输精管吻合解剖学成功率可达95%以上,但生育力恢复却只有50%～60%.吻合不育的内分泌变化机制值得研究.本文研究了输精管吻合不育家免血清皮质醇变化,并检测了血清IL 1活性和TNF-α含量.
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严重创伤脾移植患者细胞免疫功能的初步研究
脾脏是人体重要的免疫器官之一.严重创伤后脾破裂导致多处炎症,患者通过手术治疗(切脾+植脾与保脾,以下简称脾手术组)后,脾脏是否在体内继续发挥其原有的免疫功能,从而使机体早日康复,国内尚未见报道.本文对此进行了研究,测定了切脾+植脾与保脾手术患者外周血T、B淋巴细胞数目,PHA刺激的淋巴细胞IL 2受体的表达,IL-2诱生水平,并进行了动态观察,旨在探讨脾手术患者的术后细胞免疫功能状态.
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活动期与稳定期SLE患者血清IgE水平实验室分析
SLE患者体内IgE抗体在自身免疫性疾病中的作用近年更加被重视,IgE抗体水平升高与TH2细胞功能亢进密切相关.我们对活动期与稳定期SLE患者血清IgE水平进行了测定分析,以期重新评价IgE抗体在SLE患者疾病发展中的作用.
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高效毛细管电泳法分析rhIL-2的纯度
重组人白细胞介素2(rhIL-2)是利用基因工程技术,从大肠杆菌中获得的.rhIL 2能抑制肿瘤细胞的增殖,是肿瘤过继免疫治疗中应用广泛,研究得多的细胞因子[1].作为生物制剂,在药品的质量监控中,其纯度分析又是非常重要的指标之一.目前,常用的纯度鉴定方法有凝胶电泳和高效液相色谱(HPLC).与HPLC相比,高效毛细管电泳(HPCE)具有更高的分辨率和灵敏度,且同时具有快效、高效、自动化、上样量少等特点[2].本文运用HPCE对rhIL-2进行纯度分析,建立了快速简便的测定方法.
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核转录因子κB在全身炎症反应综合征中的作用
核转录因子κB(NF-κB)是一种多向性核转录调节蛋白,参与多种炎症介质基因的转录和调控,在炎症、免疫反应中发挥重要作用.本文就NF-κB与全身炎症反应综合征的关系以及阻断NF-κB对全身炎症反应综合征、多器官功能不全综合征的治疗作用作一综述.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 Z1 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
