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人肝癌HepG2/5-Fu耐药细胞株多药耐药与凋亡关系的研究

张阳德;彭程;李年丰;龚连生;彭健

摘要: 目的 探讨耐药株人肝癌细胞HepG2/5-Fu的耐药机制及耐药与细胞凋亡的关系.方法 检测HepG2/5-Fu细胞株对不同抗肿瘤药物的敏感性,流式细胞仪分析HepG2/5-Fu细胞在5-Fu作用的凋亡情况以及对5-Fu的耐受分析,RT-PCR分析HepG2/5-Fu细胞株中凋亡相关基因p53、bcl-2、bcl-xl、bax等基因的表达情况.结果 HepG2/5-Fu细胞与HepG2细胞相比除对5-Fu耐药外,对其它几种常用化疗药均有不同程度的耐药性.HepG2细胞中未经5-Fu处理的对照组、30μmol/L 5-Fu组及150μmol/L 5-Fu组的凋亡指数与对照组相比,凋亡分别增加了1.2倍和2.1倍,差异具有显著性(P<0.05).而经同样浓度5-Fu处理的HepG2/5-Fu细胞与其对照组相比,细胞凋亡变化不明显.经30μmol/L和150μmol/L 5-Fu处理后,HepG2细胞与其对照组相比,呈现明显的G0/G1期增加,S期、G2/M减少,而HepG2/5-Fu细胞与其对照组相比细胞周期未见改变.PCR分析发现:与HepG2细胞相比,HepG2/5-Fu细胞耐药株bcl-xl、bcl-xs和bax的表达增高,而p53和cpp32的表达减少,特别是p53基因,表达明显减少.在人肝癌细胞HepG2和HepG2/5-Fu细胞mRNA水平均没有检测到bcl-2的表达.结论 wtp53基因的突变与肝癌细胞的细胞周期的改变、耐药性的产生相关,是肝癌细胞HepG2/5-Fu产生多药耐药性的机制之一.

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