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组织工程骨-软骨复合组织种子细胞的获取与培养

刘鹏;付崇健;邓天政;姜明;李吉国;于书娟;朱国雄

摘要: 目的:探索体外培养组织工程骨-软骨复合组织种子细胞的条件,并观察其部分生物学活性.方法:采用机械-酶消化法对3周龄新西兰大白兔耳软骨和关节软骨消化来获得软骨细胞,采用全骨髓贴壁法来获得骨髓间充质干细胞,对两种细胞进行原代和传代培养,通过倒置相差显微镜观察细胞形态、绘制生长曲线、免疫组化染色等对细胞进行生物学特性分析.结果:原代培养的软骨细胞以多角形或三角形为主,传代3次以后出现去分化.形态学和免疫组化显示细胞3代以内可以保持表型稳定,具有较强的增殖及分泌细胞外基质的能力,而且耳软骨及关节软骨细胞在实验中没有表现出明显的生物学差别.采用贴壁筛选法获得的BMSCs呈长梭形或多边形,生长曲线呈“S”形,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性,细胞生长增殖能力旺盛.结论:体外分离培养的软骨细胞和骨髓间充质干细胞符合组织工程要求,能够作为骨-软骨复合组织的种子细胞.

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