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Bcl-2反义寡核苷酸诱导增生性瘢痕细胞凋亡的研究

可国安;刘柏林;陈学杰;龙道畴

摘要: 目的:探讨反义寡核苷酸(ASODN)对bcl-2基因的表达调控及诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的作用.方法:采用RT-PCR法和流式细胞术检测ASODN对bcl-2蛋白和mRNA表达量的调控;通过MTT法比较两条人工合成ASODN直接作用及脂质体DOTAP转染对增生性瘢痕成纤维细胞的抑制效果;用相差显微镜、电子显微镜观察bcl-2 ASODN诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡效果.结果:ASODN降低bcl-2蛋白和mRNA表达;两条ASODN抑制增生性瘢痕成纤维细胞增殖的作用呈浓度和时间依赖性,且靶位点于mRNA蛋白编码区(ASODN2)和以DOTAP为载体的ASODN对成纤维细胞的增殖抑制效果佳.bcl-2 ASODN作用于成纤维细胞后,成纤维细胞缩小、凋亡小体和染色质浓缩等特征性改变出现.结论:bcl-2 ASODN能抑制bcl-2 mRNA和蛋白表达,诱导成纤维细胞凋亡.

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