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miR-145靶向调控Smad3对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

任志伟;王莹;杨益民;李新友;张小卫;尹思

摘要: [目的]探讨miR-145靶向调控Smad3对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响.[方法]骨髓间充质干细胞诱导分化0、 3、7、10、14d 后,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测 ALP 活性;Western blotting 检测 Runx2、osteopontin、Smad3 的蛋白表达;RT-PCR 检测 miR-145 的表达;miR-control、miR-145 mimics、anti-miR-control、miR-145 inhibitors及 pcDNA-control和pcDNA-Smad3转染hBMMSCs,并进行miR-NC+miR-145 mimics、Wt- Smad3+miR-145 mimics、Mut-Smad3+miR-143 mimics 3组共转染,检测ALP活性及Runx2.osteopontin、Smad3的蛋白表达.[结果]随着时间的延长,ALP活性及Runx2和osteopontin的蛋白表达升高,与0d比较差异具有统计学意义(P<0.01);Smad3是miR-145的靶基因;随着时间延长miR-145的表达降低,而Smad3表达升高,与0 d比较差异具有统计学意义(P<0.01); miR-145 inhibitors组ALP活性及Runx2和osteopontin的蛋白表达显著高于anti-miR-control, peDNA-Smad3组ALP活性及Runx2和osteopontin的蛋白表达显著高于pcDNA-control组(P< 0.01 ).[结论]miR-145可靶向调控Smad3促进入骨髓间充质干细胞的成骨分化.

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