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氯化钴缺氧处理对大鼠星形胶质细胞TFPI-2表达的影响

孙佳;高宏生;王毅铮;任贵兵;孟斌;龚燕华;李灵芝;张永亮;钟士江

摘要: [目的]探讨氯化钴缺氧对大鼠星型胶质细胞TFPI-2基因表达的影响及其可能的调节机制.[方法]将大鼠星型胶质细胞分为对照组、化学缺氧组(加入终浓度为100 μmol/L氯化钴培养24 h).显微镜下观察细胞形态变化,MTT法检测细胞活性,RT-PCR法检测各组缺氧诱导因子-1α(hypoxia induced factor,HIF-1α)、组织因子途径抑制因子-2 (tissue factor pathway inhibitor 2,TFPI-2)mRNA表达水平变化,Western blotting检测缺氧前后HIF-1α、TFPI-2、VEGF蛋白表达水平变化.[结果]MTT检测显示,氯化钴缺氧会降低细胞活性,且呈时间依赖性.在显微镜下可观察到细胞缺氧后胞体变小,突触缩短.氯化钴缺氧处理组细胞TFPI-2 mRNA水平显著高于对照组(P<0.05).Western blotting显示与对照组相比,缺氧后细胞内HIF-1α、TFPI-2、VEGF蛋白表达水平均有显著升高(P<0.05).[结论]氯化钴缺氧可以激活HIF-1/VEGF缺氧通路,增加SH-SY5Y细胞TFPI-2 mRNA和蛋白表达水平.

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