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炭疽毒素受体单克隆抗体的制备、鉴定及结合位点分析

屈野;徐俊杰;赵剑;刘树玲;郭强;付玲;宋小红;陈薇

摘要: [目的]制备与鉴定针对两种炭疽毒素受体(anthrax toxin receptor,ATR)的特异性单克隆抗体,为建立ATR的检测方法、研究炭疽毒素的致病机理提供工具.[方法]以重组表达的两种ATR即毛细血管形态发生蛋白2(capkllary morphogenesis protein 2,CMG2)和肿瘤内皮标志8蛋白(tumor endothelial marker 8,TEM8)分别免疫小鼠,制备单克隆抗体,用ELISA、Western dot blotting及细胞保护性试验等方法对所制备的单克隆抗体进行鉴定和分析,并尝试应用上述单克隆抗体经双抗体夹心ELISA、Western blotting和IFA对ATR进行检测.[结果]获得针对CMG2的单克隆抗体485、4G3;针对TEM8的单克隆抗体2D6、489;以及可同时结合CMG2和TEM8的单克隆抗体2G4,其中485具有一定的细胞保护活性,这些单克隆抗体可用于ATR的特异性检测.[结论]本研究所制备的单克隆抗体可经ELISA、Western blotting和IFA用于ATR体内外检测,从而为探讨炭疽毒素的致病机理提供有效的研究手段.

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