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自拟通脑汤结合针灸治疗慢性脑供血不足的临床观察
目的:评价自拟通脑汤联合针灸治疗慢性脑供血不足的治疗效果.方法:回顾分析39例在我院接受治疗的慢性脑供血不足患者临床资料,对其进行常规西药治疗并纳入对照组;另择取同期同症患者39例作为观察组研究对象,对其实施西药常规治疗+通脑汤结合针灸治疗;对两组临床治疗效果进行评价比较.结果:T C D检查结果治疗前两组比较无显著差异,P>0.05;治疗后观察组显著高于对照组,P<0.05;观察组临床治疗有效率为92.31%,对照组临床治疗有效率为76.92%,明显观察组更高,P<0.05.结论:自拟脑通汤结合针灸治疗慢性脑供血不足可显著提高其临床治疗有效率,临床可推广应用.
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脑通汤对VD大鼠海马CA1区ICAM-1、EBA及GFAP蛋白表达的影响
目的:观察脑通汤对血管性痴呆大鼠学习记忆能力以及海马CA1区细胞间黏附分子(ICAM-1)、内皮屏障抗原(EBA)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响. 方法:除假手术以外的其他组大鼠采用改良的4-VO法制备大鼠模型,造模1周后予药物灌胃治疗,1次/d,共灌胃4周.灌胃治疗结束后Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,免疫组化法检测海马区CA1区ICAM-1、EBA和GFAP表达水平.结果:模型组大鼠逃避潜伏期明显延长,ICAM-1表达明显增加、EBA表达减少、GFAP表达显著增加,与假手术组比较具有显著差异(P<0.01). 脑通汤大、中剂量组均可显著缩短大鼠逃避潜伏期,可显著降低ICAM-1、GFAP表达,促进EBA表达,与模型组比较具有显著差异(P<0.01). 结论:脑通汤对VD大鼠学习记忆能力减退具有防治作用,其机制可能通过抑制ICAM-1、GFAP表达,促进EBA表达,改善血管内皮细胞、星形胶质细胞以及血脑屏障的损伤,从而减轻脑缺血对神经血管单元(NVU)的损害.
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磁共振灌注成像观察脑通汤对VD大鼠海马区血流灌注的干预作用
目的:运用磁共振灌注成像技术分别检测VD大鼠病程中1、2、3、4周海马区血流变化,并观察脑通汤的干预作用.方法:采用改良的4血管阻断法(4-VO)进行VD造模,Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,磁共振灌注技术(PWI)检测大鼠VD病程中海马区血流改变及脑通汤干预作用.结果:(1)与模型组及多奈哌齐组比较,脑通汤组rCBF值均升高,差异有统计学意义(均P＜0.01).(2)与模型组比较,脑通汤组、多奈哌齐组大鼠逃避潜伏期明显短于模型组,穿越平台次数明显增多(P＜0.01,P＜0.05);与多奈哌齐组比较,脑通汤组穿越平台次数较多,有统计学差异(P＜0.05).结论:脑通汤组可较好的改善大脑海马区血流量的变化,可提高VD大鼠学习记忆能力,且这种作用优于盐酸多奈哌齐.
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脑通汤含药血清对缺氧/复氧大鼠海马神经元抗氧化应激相关指标的影响
目的 探讨脑通汤通过海马神经元抗氧化应激治疗血管性痴呆(VD)的机制.方法 培养大鼠原代海马神经元及鉴定,取培养9d的神经元,随机分为正常细胞组、缺氧/复氧模型组、正常血清组、脑通汤大、中、小剂量含药血清组.除正常细胞组以外,各组均置入(95％ N2 +5％CO2)混合气体的三气培养箱缺氧24 h再复氧2h造模.采用MTT法检测缺氧24 h和复氧2h时间点海马神经元活性并计算细胞存活率;实时荧光定量PCR法检测海马神经元核因子-E2-相关因子(Nrf)2、血红素氧合酶亚型(HO)-1、醌氧化还原酶(NQO)1 mRNA的表达.结果 MTT显示:缺氧24h:模型组的海马神经元活性及存活率较正常细胞组明显下降(P＜0.05),与正常血清组及脑通汤不同剂量含药血清组比较无明显差异(P＞0.05).复氧2h:脑通汤不同剂量含药血清组均较模型组明显升高(P＜0.05),正常血清组较模型组无明显差异(P＞0.05).实时荧光定量PCR结果显示:脑通汤含药血清能够促进缺氧/复氧海马神经元抗氧化应激相关基因Nrf2、HO-1、NQO1的表达(P＜0.05),并且脑通汤含药血清大剂量组与中剂量组的上述3个基因水平明显高于缺氧/复氧模型组(P＜0.01).结论 脑通汤可通过上调抗氧化相关基因Nrf2、HO-1、NQO1的表达,减轻海马神经元缺氧/复氧损伤的氧化应激反应,从而保护大鼠海马神经元缺氧/复氧损伤.
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脑通汤对VD大鼠海马区神经血管单元微血管新生的影响
目的 观察脑通汤对血管性痴呆大鼠学习记忆能力以及海马CA1区脑微血管密度(MVD)及血管场面积的影响.方法 采用改良的4-VO法制备大鼠模型,脑通汤灌胃治疗后Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,免疫组化法检测海马区CA1区微血管密度(MVD)及血管场面积.结果 与模型组比较,脑通汤大、中剂量组大鼠逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数增加,微血管密度(MVD)及血管场面积明显增高(P＜0.01) 与多奈哌齐组比较,脑通汤大、中剂量组MVD及血管场面积均显著增高,有统计学差异(P＜0.01). 结论 脑通汤可促进微血管新生,增加缺血区血液灌流,保护海马区NVU整体功能,从而改善VD大鼠学习记忆能力.
关键词： 脑通汤 血管性痴呆 神经血管单元 微血管密度(MVD) 血管场面积 -
脑通汤对血管性痴呆大鼠海马神经元凋亡基因Bcl-2、Bax及Bcl-2/Bax比例变化的影响
目的 观察脑通汤对血管性痴呆大鼠行为学、海马CA1区神经元凋亡基因Bcl-2、Bax表达及Bcl-2/Bax比例变化的影响.方法 采用改良四血管法(4-VO)制备血管性痴呆(VD)模型,Morris水迷宫测定大鼠学习、记忆能力,免疫组化法检测海马CA1区神经元凋亡基因Bcl-2、Bax蛋白表达水平,计算Bcl-2/Bax比例.结果 与模型组比较,脑通汤大、中剂量组逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增多,Bax表达降低,Bcl-2表达增高,Bcl-2/Bax比例升高.结论 脑通汤可明显提高Bcl-2表达,减少Bax表达,升高Bcl-2/Bax比例,抑制神经细胞凋亡,从而减轻脑缺血对神经血管单元的损伤,改善VD大鼠学习、记忆能力,这可能是其治疗血管性痴呆的作用机制之一.
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脑通汤对脑微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤内皮屏障抗原及紧密连接相关蛋白Claudin-5、ZO-1表达的影响
目的:探讨脑通汤对脑微血管内皮细胞(BMECs)缺氧/复氧损伤的保护作用及血脑屏障通透性的影响.方法:体外培养大鼠原代BMECs,缺氧/复氧法模拟脑缺血再灌注损伤.免疫组化检测内皮屏障抗原(EBA)蛋白表达;实时荧光定量PCR法检测紧密连接蛋白-5 (Claudin-5) mRNA、紧密连接蛋白(ZO-1)mRNA的表达.结果:免疫组化示,与正常细胞组比较,模型组EBA蛋白表达明显下降(P＜0.05);与模型组比较,脑通汤大、中剂量含药血清组EBA蛋白表达显著升高(P＜0.05);但正常血清组与模型组比较差异无显著性(P＞0.05).买时荧光定量PCR法示,与正常细胞组比较,模型组Claudin-5、ZO-1 mRNA的表达明显下降(P＜0.05);与模型组比较,脑通汤不同剂量含药血清组干预后,Claudin-5、ZO-1 mRNA的表达量明显上调,其中脑通汤大剂量含药血清组显著上调(P＜0.05).结论:脑通汤可以保护脑微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤,其保护机制可能与其上调EBA蛋白及Claudin-5、ZO-1基因的表达密切相关.
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脑通汤对缺氧-复氧损伤脑微血管内皮细胞的保护作用
目的:探讨脑通汤对缺氧-复氧损伤脑微血管内皮细胞(BMECs)的保护作用及机制.方法:将大鼠原代BMECs培养传代至第二代,分为对照组、正常血清组、缺氧-复氧模型组、大、中、小剂量脑通汤含药血清组,后5组细胞均放入三气培养箱中持续通入95％N2和5％ CO2混合气体缺氧24 h再复氧2h制作脑缺血再灌注细胞模型;采用MTT法检测缺氧24 h和复氧2h时BMECs的活性并计算细胞存活率,实时荧光定量PCR法检测BMECs中HIF-1α、VEGF、MMP-9 mRNA的表达.结果:缺氧24h时,模型组的BMECs的活性及存活率较对照组明显下降(P＜0.05),与正常血清组及各剂量含药血清组比较差异无统计学意义(P＞0.05);复氧2h时各剂量含药血清组BMECs的活性及存活率均较模型组明显升高(P＜0.05),正常血清组与模型组差异无统计学意义(P＞0.05);模型组HIF-1α、VEGF、MMP-9 mRNA的表达量均升高(P＜0.05),与模型组比较,各剂量含药血清组的HIF-1 α、VEGF mRNA的表达量明显升高,MMP-9 mRNA的表达量明显下降,脑通汤大、中剂量组变化更显著(P＜0.01);正常血清组与模型组比较上述3种mRNA表达量差异无统计学意义(P＞0.05).结论:脑通汤可以保护缺氧-复氧损伤的BMECs,其机制可能与其能上调HIF-1α、VEGF mRNA表达以及下调MMP-9mRNA表达有关.
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脑通汤对缺氧-复氧大鼠海马神经元BDNF mRNA表达的影响
目的:探讨脑通汤对缺氧-复氧大鼠海马神经元脑源性神经营养因子基因(BDNF mRNA)表达的影响.方法:将体外培养大鼠海马神经元分为正常细胞组、缺氧-复氧模型组、正常血清组和脑通汤大、中、小剂量含药血清组,实时荧光定量PCR法检测脑通汤干预缺氧24h复氧2h后海马神经元BDNF mRNA的表达.结果:实时荧光定量PCR结果显示,与正常海马细胞组比较,缺氧-复氧模型组海马BDNF mRNA的相对表达量明显下降(P＜0.05);与缺氧-复氧模型组海马细胞相比,脑通汤大、中、小剂量含药血清组海马细胞中BDNFmRNA的相对表达量明显增高(P＜0.05),其中脑通汤大、中剂量含药血清组升高更明显(P＜0.05);但正常血清组与模型组海马细胞比较BDNFmRNA的表达趋势差异无统计学意义(P＞0.05).结论:脑通汤可以上调缺氧-复氧后海马神经元BDNF mRNA的表达.
