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测定尿假尿苷和肌酐对妇科恶性肿瘤临床意义的探讨
假尿嘧啶核苷(Pseudouridine,PD)简称假尿苷,是一种修饰核苷.它作为肿瘤标记物对肺癌、乳腺癌和肝癌等恶性肿瘤的诊断、监测和疗效评估具有指导意义.本文采用反相高效液相色谱法(HPLC)测定尿假尿苷和肌酐(UR),旨在探讨它对妇科恶性肿瘤,尤其是卵巢癌的应用价值.
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高效液相色谱法提纯和分离酵母苯丙氨酸tRNAphe ASL
通过用特殊树脂Nucleogen-DEAE 阴离子交换柱可有效地提纯和分离酵母苯丙氨酸tRNAphe ASL不同核苷酸的聚核苷酸 .经反相高效液相色谱进行定量核苷组分分析, 确认是否掺入了修饰的核苷, 用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度检查.
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尿嘧啶与假尿嘧啶核苷甲基化对酵母tRNAphe反密码环结构与功能的影响
酵母苯丙氨酸tRNAphe反密码区域核苷修饰的几率和种类远超过T环和D环.在17个核苷酸的序列中,5种转录后的自然修饰在32,34,37,39和40位.为研究核苷修饰与结构和功能的关系,需建立一种研究方法和模型体系,从技术上,本方法和化学修饰核苷[1]、自动合成、色谱法纯化和定性分析[2]、热变性和热力学分析[3]、生化检测[4]5个不同学科相关.为探讨一种系统的方法,测定修饰核苷对酵母苯丙氨酸tRNAphe反密码环结构与功能的影响,从原子水平上区别和理解尿嘧啶和假尿嘧啶甲基化对结构与功能的影响,进行了以下的实验研究.
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核苷甲基化对酵母tRNAPhe反密码环结构与功能影响的研究
通过用甲基选择性地取代核苷的氢原子,研究修饰的全面贡献.实验表明某些情况下核苷甲基化仅能略微地改变局部残基构象,而在另一些情况下却能显著地改变构象.
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修饰核苷对酵母tRNAphe反密码区域的贡献
采用单独或结合方式掺入自然出现的修饰核苷,合成酵母苯丙氨酸反密码区域17聚体tRNApheAC,测定其van't Hoff 热力学参数.从原子水平上理解ψ39,m1G37,m5C40,dm5C40,Cm32,Gm34对结构与功能的贡献.
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基于LC-MS技术修饰核苷作为肿瘤标志物的研究进展
修饰核苷是RNA的代谢产物,目前认为是一种广谱的潜在肿瘤标志物(tumor marker,TM),在肿瘤患者尿液中排放量较正常人显著升高.液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)技术结合了色谱的高分离能力和质谱的高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点,已逐渐成为修饰核苷分析的的主要技术平台之一.本文综述了近年来LC-MS技术在尿液修饰核苷分析方面的现状与进展,并对其发展前景进行展望.
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尿中修饰核苷在胃癌诊断中的意义
[目的]探讨尿中修饰核苷检测在胃癌诊断中的价值.[方法]应用高效液相色谱方法分别检测80名正常人与60例胃癌患者尿中Pseu、C、X、m1A、m2G和ac4C等6种核苷的水平.[结果]60例胃癌患者尿中6种核苷的平均水平明显高于正常人(P<0.01);C与肿瘤大小呈正相关(P<0.05):Pseu、X、m1A、m2G和ac4C与肿瘤TNM分期呈正相关(P<0.05).[结论]尿中修饰核苷检测对胃癌的诊断有一定意义.
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恶性肿瘤患者尿中修饰核苷的检测
应用毛细管电泳法分别对 35名健康成人及 32名恶性肿瘤患者尿中 13种核苷进行检测,结果肿瘤患者的平均值比健康人明显升高,提示其可用于恶性肿瘤的辅助诊断.
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尿中修饰核苷水平在膀胱移行细胞癌诊断及预测预后中的意义
目的 探讨尿中7种修饰核苷M1A、ac4C、A、06-MeG、MTA、1 -MeI、1-MeG检测在膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell carcinoma,BTCC)诊断及预测预后中的意义.方法 选取经病理证实为膀胱移行细胞癌患者45例为膀胱癌组,其中初发32例,复发13例;组织学分级:Ⅰ级22例,Ⅱ级16例,Ⅲ级7例;浸润性癌16例,非浸润癌29例.选取16例正常人为对照组.应用高效液相色谱/电喷雾-四极杆-飞行时间质谱技术(HPLC/ESI-Q-TOF-MS)检测膀胱癌组和对照组尿液中M1A、ac4C、A、06-MeG、MTA、1-MeI、1-MeG 7种修饰核苷水平(核苷含量/肌酐).结果 BTCC组尿液M1A、ac4C、06-MeG和1-MeI水平[分别为(4.61±1.82)、(0.63±0.29)、(0.46±0.35)和(12.28±9.74)],均显著高于对照组[(2.85±0.68)、(0.35±0.15)、(0.21±0.11)和(5.39±2.41),P<0.01];诊断准确度由大到小为1-MeI> M1A> ac4C> 06-MeG,且1-MeI与M1A联合检测可达到对膀胱癌高的灵敏度和特异性,分别为92.45%和87.50%.BTCC组织学分级之间以及浸润性与非浸润性之间尿液修饰核苷水平差异均无统计学意义(P>0.05).复发患者尿液M1A和ac4C水平分别为(6.74±1.23)、(0.83±0.41),均显著性高于初发患者[(3.93±1.43)、(0.57±0.20),P<0.05],M1A与其复发时间呈负相关(r= -0.895,P<0.01).结论 尿液M1A联合1-MeI检测在膀胱移行细胞癌诊断中意义重大,M1A和ac4C有助于预测膀胱移行细胞癌患者预后.
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尿中5种修饰核苷用于肺癌高危人群筛查分子标志物的可行性研究
目的:探讨尿中5种修饰核苷Pseu,m1A ,m1I,m1G及m2G作为肺癌诊断分子标志的可能性.方法:应用高效液相色谱在线系统分别检测肺癌患者55例(其中包括肺鳞癌18例,肺腺癌23例与小细胞肺癌14例)与正常人30例尿中 Pseu,m1A ,m1I,m1G及m2G五种核苷,同时应用液相色谱法检测尿中肌酐,以两者比值表示核苷浓度;分析其与肺癌发生、病理分型及肿瘤分期之间的关系.结果:肺癌患者尿中Pseu,m1A,m1I,m1G及m2G浓度均显著高于正常人(P 值均<0.01).小细胞癌组m1I浓度显著高于腺癌组(P=0.045);m1A、m1I和Pseu 3者联合检测对肺癌诊断的敏感性与4-5种联合检测相同,并且显著高于m1A单项检测(P=0.037).结论:尿中Pseu,m1A ,m1I,m1G及m2G可能成为肺癌诊断的分子标志物,也可能有助于肺癌病理分型.
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白血病患者血假尿苷测定的临床意义
假尿嘧啶核苷(PU)是一种修饰核苷,在体内不能被重新利用,也不能继续分解,只能作为一种完整代谢终产物自尿中排出。近年来认为在恶性肿瘤的诊断及疗效监测中有重要的意义。我室测定了104例白血病患者血中PU水平。现将结果报告如下,并探索其临床应用价值。 1 材料与方法……