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SeO2诱导的正常肝细胞株及肝癌细胞株的凋亡
目的:研究中毒剂量二氧化硒(SeO2)对正常肝细胞HL-7702及肝癌细胞SMMC-7721的影响.方法:用流式细胞术观察不同浓度硒对两种细胞的损伤作用及对两种细胞BcI-2,P53蛋白表达的影响.结果:30μmol/L的硒作用48h可以明显抑制正常肝细胞株HL-7702及肝癌细胞株SMMC-7721的增生与活力,诱导两种细胞的凋亡,且两种细胞伴随着不同程度的Bcl-2蛋白的下调及P53蛋白的上调.结论:中毒剂量的SeO2诱导正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞SMMC-7721的凋亡,且这种诱导凋亡作用是无选择性的,但两种细胞调亡的机制有一定区别.
关键词： 二氧化硒 凋亡 BCL-2蛋白 P53蛋白 HL-7702细胞朱 SMMC-7721细胞株 -
顺铂联合热疗抑制人肝癌细胞SMMC-7721体外增殖作用的研究
目的在国内外现有的研究基础上,探讨顺铂联合热疗体外抑制人肝癌细胞增殖的效果,以确定联合方案是否具有协同效应.方法使用MTT法测定单独或联合应用化疗药物顺铂与热疗对人肝癌SMMC-7721细胞的体外增殖的抑制作用,使用流式细胞仪检测不同方案对SMMC-7721细胞凋亡率的影响.结果联合应用热疗可以显著提高化疗药物顺铂引起的细胞增殖抑制及细胞凋亡.以亚毒性剂量浓度的顺铂为例,对照组、化疗组、热疗组、热化疗组的细胞增殖抑制率分别为0%、20.77%、32.46%、62.76%;细胞倍增时间分别为40.54、50.30、106.85、166.07 h;细胞凋亡率分别为2.19%、5.56%、10.16%、24.32%.结论联合应用热疗与顺铂,对SMMC-7721细胞体外增殖的抑制及诱导细胞凋亡具有显著的协同作用.
关键词： 热疗 顺铂 SMMC-7721细胞株 -
羟基喜树碱联合热疗抑制人肝癌细胞SMMC-7721体外增殖作用的研究
目的探讨羟基喜树碱联合热疗体外抑制人肝癌细胞增殖的效果,以确定联合方案是否具有协同效应.方法使用MTT法测定单独或联合应用羟基喜树碱与热疗对人肝癌SMMC-7721细胞的体外增殖的抑制作用,使用流式细胞仪检测不同方案对SMMC-7721细胞凋亡率的影响.结果联合应用热疗可以显著提高羟基喜树碱引起的细胞增殖抑制及细胞凋亡.以亚毒性剂量浓度的羟基喜树碱为例,对照组、化疗组、热疗组、热化疗组的细胞增殖抑制率分别为0%、 13.65%、 32.46%、 71.89%; 细胞倍增时间分别为40.54、 86.35、 106.85、 187.90 h; 细胞凋亡率分别为2.19%、 3.96%、 10.16%、 20.42%.结论联合应用热疗与羟基喜树碱,对SMMC-7721细胞体外增殖的抑制及诱导细胞凋亡具有显著的协同作用.
关键词： 热疗 羟基喜树碱 SMMC-7721细胞株 -
香加皮杠柳苷抑制Stat5信号通路诱导SMMC-7721细胞凋亡的实验研究
目的 研究香加皮提取物杠柳苷对Stat5信号通路的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制.方法 MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞术观察肿瘤细胞的周期变化和凋亡,western blot法检测杠柳苷作用前后人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内Stat5蛋白质表达.结果 杠柳苷明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,使细胞周期停滞在G2/M期,并能够诱导SMMC-7721细胞凋亡.杠柳苷作用后,细胞核内的Stat5蛋白量降低而胞浆中的量未见明显改变.结论 香加皮杠柳苷能够抑制Stat5信号转导通路,进而抑制SMMC-7721细胞的增殖并诱导其凋亡.
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STAT3在人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内的表达
目的 研究信号传导及转录活化因子STAT3在人肝癌细胞内的表达及其表达产物STAT 3酪氨酸磷酸化活化情况.方法 分别采用western blotting、流式细胞术检测人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内STAT 3蛋白和磷酸化STAT 3(P-STAT 3)蛋白的表达.结果 人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内有STAT3的表达和酪氨酸(Y705)磷酸化.结论 STAT3的异常表达和活化可能在肝癌的发生发展中起重要作用.
关键词： 人肝癌细胞 SMMC-7721细胞株 信号转导和转录活化因子 -
低浓度亚硝酸钠对人肝癌SMMC-7721细胞的毒物兴奋效应
低浓度的毒物往往存在对生物体毒物兴奋效应(hormesis),这种非线性剂量效应关系是近年来评价药物毒性的一种新方法~([1]) .低水平的亚硝酸盐暴露对细胞生物学效应实验研究文献报道较少,为了研究亚硝酸盐对肝源性细胞生长的毒物兴奋效应,课题组利用人肝癌SMMC-7721细胞,研究了亚硝酸盐从低浓度到高浓度时细胞增殖、凋亡、低浓度预适应细胞保护作用等毒物兴奋效应关键指标的变化.
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应用3H-TdR掺入法对SMMC-7721细胞株药敏试验条件的探讨与应用
目的探讨3H-TdR掺入法在进行SMMC-7721系细胞肿瘤药敏试验实验时的佳实验条件.方法确定出3H-TdR掺入法药敏实验时的适细胞浓度、适实验药物浓度、3H-TdR掺入适时间;在适条件下采用3H-TdR掺入法测定肝癌SMMC-7721细胞株对临床常用的9种抗癌药物的敏感性.结果应用3H-TdR掺入法检测肝癌SMMC-7721细胞株药敏试验的适实验细胞浓度为1×104个/孔,适试验药物浓度为1×PPC,3H-TdR适掺入时间为收集细胞前8 h;肝癌SMMC-7721细胞株对DDP、ADM、5-FU、CPT高度敏感,对MTX、VP-16、MMC、NVB低度敏感,对PYM不敏感.结论 3H-TdR掺入法可用于肿瘤药物敏感性测定并确定出它的适实验条件.
关键词： 3H-Tdr掺入法 SMMC-7721细胞株 药敏试验 -
用MTS比色法测SMMC-7721系细胞对抗癌化疗药物的敏感性
近年来通过肿瘤药敏试验指导个体化疗的研究,受到国内外肿瘤界的重视.MTS[3-(4,5-dimethylthiazol-zyl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazoliuzolium,inner salt]为Buttke等[1]设计出来的一种新型的MTT类似物,用MTS比色法进行肿瘤药敏试验,它克服了MTT、XTT的缺点,MTS在偶联剂PMS(phenazine methosulfate)存在的条件下,可被活细胞线粒体中的多种脱氢酶还原形成水溶性的有色甲瓒产物,其颜色深浅与某些细胞株活细胞数在一定范围内呈高度相关.MTS比色法优点在于:(1)无放射性(2)快速(3)安全(4)方便(5)灵活(6)特异性强.Toole等[2]用MTS法去测定子宫内膜和宫颈癌在体外的药物敏感性,发现它们与临床结果有较好的相关性,宋锦平[3]叶萍等[4]用MTS比色法、XTT比色法、3H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖反应,发现MTS比色法与XTT比色法、3H-TdR掺入法的结果一致,且此法较MTT比色法灵敏.为此我们采用此法检测肝癌SMMC-7721细胞株对临床常用化疗药物的敏感性,比较出有效的抗癌药物供临床用药参考.
关键词： SMMC-7721细胞株 肿瘤 药敏试验 -
天冬多糖对人肝癌SMMC-7721细胞株的作用及其机制
研究结果表明中药天冬所含的多糖是其抗肿瘤的有效成分.我们通过提取的天冬多糖作用于体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞株,探讨其对肝癌细胞的作用及机制.
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二氧化钛光照对人癌细胞光敏作用的研究
利用光敏剂治疗癌症,是近年发展起来的行之有效的一种新方法,其特点是利用光敏剂光照后产生一系列化学反应,并能消灭癌细胞.然而,目前能利用的治癌光敏剂尚较少,绝大多数都是采用血卟啉衍生物(HPD),其光照后对癌细胞有较强的杀伤作用,但是其不宜制得.而二氧化钛(TiO2)来源广泛,性质稳定,我们通过其对Hela及SMMC 772l细胞的抑制作用,对其光敏作用进行了研究.
关键词： 二氧化钛 MTT比色 光敏作用 HeLa细胞株 SMMC-7721细胞株 -
小剂量吉西他滨可促进放疗致人肝癌细胞株SMMC-7721的凋亡
目的观察小剂量吉西他滨(GEM)对放疗诱导的人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的促进作用.方法将体外培养的人肝癌细胞株SMMC-7721分为空白对照、单纯放疗、单纯化疗及放疗加化疗4组,应用MTT法检测不同条件下SMMCC-7721细胞的生长活性;经光学显微镜、透射电镜及荧光显微镜观察各组细胞经GEM作用后凋亡的形态学变化.结果单纯放、化疗都可诱导GEM细胞凋亡,GEM可明显增加放疗诱导的细胞凋亡.结论小剂量GEM可明显增加放疗诱导的SMMC-7721细胞的凋亡.
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香加皮提取物杠柳苷抑制SMMC-7721细胞Stat3信号通路诱导细胞凋亡的研究
目的 研究香加皮提取物杠柳苷对Stag信号通路的影响,及其诱导细胞凋亡的分子机制.方法 MTT比色法检测人肝癌细胞SMMC-7721增殖活性,流式细胞术分析肿瘤细胞的周期变化和凋亡,Western blot检测细胞内Star3蛋白表达,RT-PCR检测细胞Mcl-1、Survivin和XIAP mRNA的表达.结果 杠柳苷可明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导SMMC-7721细胞凋亡,并使细胞周期停滞在G2/M期.杠柳苷作用后,细胞核内Stat3量降低,而细胞质中的量末见明显改变,细胞内Mcl-1、Survivin和XIAP基因的表达明显降低,并呈时间依赖性.结论 香加皮提取物杠柳苷通过抑制Stat3信号转导通路和Mcl-1、Survivin和XIAP mRNA的表达,进而抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导其凋亡.
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氧化白藜芦醇体内外抑制肝癌细胞增殖的研究
目的:研究氧化白藜芦醇对肝癌SMMC-7721细胞以及小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用及其抗肝癌作用机制.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测氧化白藜芦醇对人肝癌SMMC-7721细胞体外增殖的抑制效果.流式细胞术测定肝癌SMMC-7721细胞的凋亡率.建立小鼠H22肝癌细胞移植瘤模型,分为对照组、环磷酰胺组、氧化白藜芦醇80、40、20 mg/kg剂量组,以实体瘤瘤块生长曲线及抑瘤率为指标评价氧化白藜芦醇对小鼠移植瘤生长的抑制作用;取用不同剂量组作用后的瘤块组织,采用免疫组织化学法检测Bax,bcl-2,Caspase-3蛋白表达情况.结论:MTT结果显示,氧化白藜芦醇对肝癌7721肿瘤细胞的IC50值为58.13μg/ml,抗肿瘤活性良好;流式细胞术结果显示氧化白藜芦醇促进肝癌7721细胞凋亡;体内试验显示氧化白藜芦醇对移植瘤的抑制作用明显,80、40、20 mg/kg三个剂量组对H22移植瘤抑制率为76.88％、65.90％和45.99％,呈一定量效关系,氧化白藜芦醇增加caspase-3表达量及Bax/Bcl-2比值.结论:氧化白藜芦醇具有明显的体内外抑制肿瘤作用,作用机制可能与诱导细胞凋亡有关.
关键词： 氧化白藜芦醇 SMMC-7721细胞株 肝癌H22 细胞凋亡 -
Alamar Blue法用于体外培养细胞活性检测的方法研究
目的在比较Alamar Blue法与MTT法的基础上探讨Alamar Blue法用于测定细胞体外增殖及细胞毒实验的可行性.方法采用Alamar Blue法及MTT法分别测定人肝癌细胞株SMMC-7721的体外增殖以及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体、顺铂、羟基喜树碱对该细胞株体外增殖的影响.结果使用Alamar Blue法,接种人肝癌SMMC-7721细胞数在3.12×102～2×104/孔范围内时,细胞数与Alamar Blue还原率呈线性相关(r=0.9989),高、中、低三种细胞浓度组内差异分别为1.41%、3.88%、4.87%.使用MTT法接种人肝癌SMMC-7721细胞数在3.12×102～2×104/孔范围内时,细胞数与OD490～620值呈线性相关(r=0.9981),高、中、低三种细胞浓度组内差异分别为1.44%、4.07%、8.27%.结论Alamar Blue法是一种简便、敏感、安全、经济的方法,可用于体外测定细胞增殖及化疗或免疫制剂的细胞毒作用.
关键词： Alamar Blue MTT SMMC-7721细胞株 -
化合物OCAM的体外抗肿瘤活性
目的 研究化合物OCAM的体外抗肿瘤活性并初步探讨其作用机制.方法 采用MTT法、台盼蓝染色法和集落形成实验检测OCAM对体外培养的SMMC-7721及H22肿瘤细胞的杀伤作用;用MTT法检测OCAM对HL-7702人正常肝细胞的毒性作用;流式细胞仪检测OCAM对SMMC-7721细胞的诱导凋亡作用和细胞周期变化.结果 与空白对照组相比较,OCAM从12.5mg/L到200mg/L剂量范围内对SMMC-7721肝癌细胞均有不同程度的杀伤作用,高抑制率达到70.99%.OCAM浓度为100mg/L时,即对H22肿瘤细胞产生杀伤作用,抑制率为47.49%.OCAM剂量为500mg/L时,集落形成抑制率达到100%.OCAM组的肿瘤细胞凋亡率和G0/G1期比例均高于空白对照组.结论 通过体外细胞试验证实OCAM具备较好的抗肿瘤活性和较低的毒性.
关键词： 抗肿瘤作用 细胞毒作用 SMMC-7721细胞株 MTT 流式细胞术
