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TLR4介导克罗恩病不同病变部位淋巴归巢水平的差别
目的 了解克罗恩病(Crohn's disease,CD)患者正常肠段和病变肠段中CCR9、TLR4表达的相关性,探讨淋巴细胞归巢在CD致病机制中的作用.方法 收集2014年1月-2017年12月22例CD患者正常肠段和病变肠段的黏膜标本,采用RT-PCR和Western blotting的方法检测CCR9、TLR4的表达.结果(1)CD患者病变肠段组中CCR9、TLR4的表达高于CD患者正常肠段组,差异具有统计学意义(P<0.05),CD患者正常肠段组、CD患者病变肠段组中CCR9、TLR4的表达均高于正常组,差异具有统计学意义(P<0.05).(2)CCR9与TLR4在核酸表达水平呈明显正相关(r=0.842,P<0.05).CCR9与TLR4在蛋白表达水平上亦呈明显正相关(r=0.791,P<0.05).结论 引起 CD 病变部位不同的机制可能与 CCR9、TLR4介导的淋巴细胞归巢有关.
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CCL25介导急性T淋巴细胞性白血病Jurkat细胞L-plastin的迁移
目的：研究CCL25对T-ALL细胞系Jurkat上L-plastin（LPL）迁移作用的影响，为临床治疗提供理论依据。方法：用激光共聚焦显微镜检测CCL25处理前后，LPL的形态变化。结果：静息状态下，LPL均匀分布在胞浆内，与F-actin不共定位。CCL25处理后，LPL发生迁移，与F-actin发生共定位。结论：CCL25介导Jurkat细胞LPL的迁移。
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恒河猴胃肠道相关淋巴组织中CCL25、CCR9、CCL20及CCR6转录水平的定量分析
目的:阐明恒河猴胃肠道相关淋巴组织中CCL25、CCR9、CCL20和CCR6转录产物的分布和丰度.方法:建立CCL25、CCR9 、CCL20和CCR6转录水平的Taqman探针实时定量PCR检测方法.提取胃肠道相关淋巴组织和非胃肠道相关淋巴组织的总细胞RNA,检测CCL25、CCR9、CCL20和CCR6的mRNA的存在和表达水平.结果:(1)在恒河猴的所有检测组织中CCL25、CCR9、CCL20和CCR6的mRNA均有表达.在胃肠道相关淋巴组织中,CCL25和CCR9的mRNA表达主要在小肠而不是大肠,而CCL20和CCR6的mRNA则表达在胃肠道所有节段中.在非胃肠道相关淋巴组织中,CCL25和CCR9的mR-NA在胸腺中的表达水平高;而CCR6mRNA在脾脏和腹股沟淋巴结中含量丰富.(2)相关分析结果显示CCL25与CCR9mRNA的表达具有显著的相关性(P=0.002 0,r2=0.480 2),CCR9与CCR6 mRNA的表达也具有相关性(P =0.003 9,r2=0.436 4).结论:与人相似,CCL25、CCR9、CCL20和CCR6 mRNA在恒河猴的胃肠道相关淋巴组织中高度且有区别地表达,表明恒河猴适宜用于与这些分子相关的黏膜免疫及人类疾病研究.
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IL-2和IL-4联合作用对T-ALL CD4+ T细胞CCR9的调节作用
为了观察IL-2和IL-4对白血病细胞CCR9分布和功能的调节作用,我们对21例T-ALL患者的血液标本进行分析.流式细胞仪检测发现T-ALL CD4+ T细胞高表达CCR9(83.0%±7.0%),IL-2和IL-4联合作用后CCR9的表达显著降低(16.0%±4.0%);RT-PCR、Northern blot和Western blot及免疫荧光数字共聚焦显微镜检测发现,IL-2和IL-4联合作用后T-ALL CD4+ T细胞上CCR9的mRNA和蛋白质的表达水平没有改变,只是位置发生变化,即CCR9发生了内置;功能检测发现IL-2和IL-4联合作用亦可相应抑制这些细胞上CCR9的黏附功能和趋化功能.实验结果可能为白血病细胞因子的治疗提供一定的线索.
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CCL25/CCR9在溃疡性结肠炎中的表达研究
目的：研究趋化因子CCL25，CCL25的受体CCR9在溃疡性结肠炎（UC）中的表达情况以及与UC病变程度和范围的关系及相关性，探讨其在UC发病机制中的作用。方法用免疫组织化学法检测32例活动期UC及22例正常对照石蜡包埋组织中CCL25及CCR9的表达情况。结果 UC组CCL25及CCR9均为阳性表达。对照组为阴性或弱阳性表达。CCL25及CCR9在UC组的表达与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.01）。UC病变范围越广、程度越重，CCL25及CCR9表达阳性率越高，CCL25和CCR9表达具有相关性（r=0.759，P<0.01）。结论 CCL25/CCR9相互作用参与了UC的发生和发展。CCL25/CCR9高低反映了疾病的炎症程度，且可能作为药物治疗的潜在靶点。
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119例非小细胞肺癌中CCR9的表达及其预后分析
目的：探讨 CC 族趋化因子受体9( C-C chemokine receptor 9, CCR9)在非小细胞肺癌( non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达及其预后判断的价值。方法应用免疫组化PV-9000两步法检测119例NSCLC及相应癌旁正常肺组织中CCR9蛋白的表达,并分析CCR9表达与临床病理特征及患者总生存率的关系。结果 CCR9在NSCLC中的阳性率(54.6%)明显高于癌旁正常肺组织(10．1%)( P <0．05)；CCR9表达与 NSCLC 病理组织类型、淋巴结转移、p-TNM 分期有关( P <0．05)。 Kaplan-Meier生存分析显示肺癌中CCR9蛋白表达与患者术后总生存率呈负相关(Log-rank=9．917,P=0．002)。单因素生存分析显示,淋巴结转移、p-TNM分期、CCR9蛋白表达与NSCLC患者术后总生存率有关( P<0．05)。多因素生存分析显示,CCR9是NSCLC患者术后总生存率的独立预测因素(RR=0．447,95%CI：0．201~0．993,P<0．05)。结论 CCR9阳性患者预后较差,其可作为NSCLC患者预后判断的新生物学标志物。
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趋化因子受体CCR9在人乳腺癌患者预后中的临床意义
目的 探索趋化因子受体CCR9在乳腺癌患者中的预后意义,调查对乳腺癌患者的远端转移及预后是否有临床指导意义.方法 通过59例乳腺癌患者的石蜡切片并对其趋化因子受体CCR9进行染色,对免疫组化结果进行其临床分期的相关性研究,并通过每一期癌和癌旁染色对比其临床意义,后通过预后分析统计其CCR9对乳腺癌患者预后的临床指导意义.结果 相比癌旁组织,乳腺癌组织的CCR9表达量显著升高,并随着临床分期的进展而显著升高,高表达CCR9的乳腺癌患者比低表达CCR9的乳腺癌患者的预后意义显著下降(P＜0.05).结论 趋化因子受体CCR9在乳腺癌患者高表达,并且显著影响其生存期,可以作为临床预后的指标之一.
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CCR9在T淋巴细胞白血病CD4+T细胞上表达的变化及临床意义
目的:探讨淋巴细胞白血病(TLL)CD4+T细胞上CCR9表达的变化及临床意义.方法:选择38例TLL患者[T-急性淋巴细胞白血病(ALL)21例,T-慢性淋巴细胞白血病(CLL)17例],对照组18例.用免疫磁珠分选出各组CD4+T细胞,以流式细胞仪分别测定CCR9在T-ALL和T-CLL CD4+T细胞上的表达及在对照组CD4+T细胞上的表达,各组间进行对比分析.结果:CCR9表达在T-ALL与T-CLL患者CD4+T细胞比较[(73±17)%:(35±18)%,P＜0.01],与对照组(2.0±1.0)%比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:TLL患者CD4+T细胞存在CCR9高表达,CCR9检测可能作为其诊断和疗效观察指标之一.
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CCR9/CCL25途径在小鼠皮肤移植急性排斥反应中的表达及意义
目的 探讨CCR9/CCL25途径在小鼠皮肤移植术后急性排斥反应时的表达及意义.方法 以BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠分别作为同种异体皮肤移植和同系皮肤移植的供鼠,以C57BL/6小鼠为受者,建立小鼠皮肤移植模型,术后给予部分同种异体移植受鼠尾静脉注射抗CCL25中和抗体(实验组)或IgG同型对照抗体(对照组),剂量为2μg/只,每2天注射1次,共注射10次.观察各组受鼠移植皮片的存活时间,并在移植后3、5、7d收集各组受鼠的移植皮片和脾脏,通过HE染色检测移植皮片的炎症反应程度;采用免疫组织化学法及共聚焦检测确定CCR9表达水平与表达部位.结果 同种异体移植受鼠移植皮片中存在广泛的炎症细胞浸润;免疫组织化学及共聚焦检测显示同种异体移植组受鼠移植皮片及脾脏高表达CCR9蛋白,且主要表达于CD3+T淋巴细胞表面,给予受鼠尾静脉注射抗CCL25中和抗体可明显延长同种异体移植受鼠移植皮片的存活时间,并降低移植皮片的炎症反应程度.结论 同种异体皮肤移植术后CCR9高表达于移植皮片及脾脏T淋巴细胞中,给予抗CCL25抗体可明显延长移植皮片的存活时间,CCR9/CCL25途径在小鼠皮肤移植急性排斥反应中具有重要作用.
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化疗药物对膀胱癌细胞CCR9的表达影响及临床意义研究
目的:研究化疗药物对膀胱癌细胞的CCR9表达的影响,初步探讨CCR9在膀胱癌细胞的转移与侵袭中的作用. 方法:研究采用PCR法、流式细胞术以及趋化小室的体外侵袭实验等方法进行研究.结果:研究发现CCR9在膀胱癌细胞5637上高表达而在化疗药物处理组中低表达,同时发现CCL25与CCR9的相互作用影响膀胱癌细胞的转移和侵袭能力,初步证实了CCR9在膀胱癌细胞的转移和侵袭中的作用.
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归巢受体与TLR4在溃疡性结肠炎小鼠肠道中的相关性研究
目的 比较溃疡性结肠炎模型小鼠结肠组织中淋巴细胞归巢受体CCR2、CCR9与Toll样受体4(TLR4)随时间的变化及其相关性,以探讨TLR4介导归巢受体引起的结肠炎症在溃疡性结肠炎中的可能作用机制.方法 50只BALB/c小鼠随机分为5组,分别用于DSS造模的第0天、第3天、第6天、第9天、第12天取得各组小鼠的结肠标本,用RT-PCR和Western blotting的方法半定量检测CCR2、CCR9、TLR4在基因和蛋白水平上的表达.结果 ①正常小鼠结肠内无TLR4表达,CCR2、CCR9的表达均呈低水平.②随着造模时间的延长,UC模型小鼠结肠内TLR4、CCR9、黏膜炎症评分均呈进行性升高,CCR2则维持在较低水平.③各组小鼠TLR4与CCR9的表达呈正相关,TLR4与CCR2无相关.结论 TLR4介导的淋巴细胞归巢可能参与了溃疡性结肠炎的致病机制,其信号传导依赖于CCR9而不是CCR2.
