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2010～2012年上海市长宁区北新泾地区手足口病聚集性疫情特征分析
目的 对上海市长宁区北新泾地区2010～ 2012年手足口病聚集性疫情特征进行分析,为有效的预防措施和控制方法提供参考.方法 对2010～2012年北新泾地区的手足口病聚集性疫情的流行特征、处置情况、病原学检测结果进行分析.结果 2010 ～2012年北新泾地区共发生35起聚集性事件,包括1起暴发疫情和34起聚集性疫情,涉及病例占该地区报告病例的25.43％.发病高峰时间多在3～5月.所有疫情均进行了病原学检测,其中29起(83.69％)检出病毒阳性.以CVA16和EV71阳性为主.结论 2010 ～2012年北新泾地区聚集性疫情中的病毒阳性检出率较高,CVA16和EV71是主要病毒型别.3～5月是发病高峰,应加强对流动人口聚居区手足口病防控工作.
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2010～2012年北京市顺义区手足口病病原学检测结果分析
目的 通过对2010～2012年北京市顺义区手足口病(Hand-foot-and-mouth disease,HMFD)实验室检测结果分析,了解顺义区手足口病病原学特征,为手足口病防控工作提供科学依据.方法 对2010～2012年顺义区684例临床诊断为手足口病患者标本,应用实时荧光定量RT-PCR法检测标本中的肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CVA16)、非EV71和CVA16的其它肠道病毒(EV)特异性核酸.结果 684例HFMD患者标本中,肠道病毒阳性率为47.37％ (324/684).病原谱构成以CVA16型为主,占55.56％(180/324),其次为EV71占32.41％(105/324),其他肠道病毒占12.03％ (39/324)；4～7月为HFMD检出高峰期；0～5岁为高风险年龄组；性别比1.49∶1,男性阳性率略高于女性,但差异无统计学意义(x2 =0.163,P＞0.05)；散居病例阳性检出率较高.结论 2010 ～2012年顺义区HFMD病例病毒阳性检出率较高,CVA16是优势病毒型别；每年春夏季节,应加强对流动人口聚居区5岁以下儿童的手足口病防控工作.
关键词： 手足口病 荧光定量RT-PCR EV71 CVA16 -
淮南市手足口病病毒分离株VP1基因分子特征分析
目的 了解淮南市手足口病病毒分离株VP1基因遗传特征及进化关系. 方法 用人横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RD)细胞对2014-2016年荧光PCR检测为EV71型、CA16型及CA10型阳性标本进行病毒分离,经2代接种出现细胞病变(CPE)后取培养物上清,提取病毒RNA,RT-PCR法扩增不同基因型VP1基因并测序,采用Bioedit5.0.6、DNAstar7.1和Mega 6.06生物软件对测序结果进行比对及进化分析. 结果 11株EV71型分离株VP1编码区的核苷酸片段长度为891nt,同源性为93.5％-100.0％,氨基酸同源性为98.3％-100.0％;7株CVA16型分离株VP1编码区的核苷酸片段长度为891nt,同源性为95.1％-97.0％,氨基酸同源性为98.7％-100.0％;3株CVA10型分离株VP1编码区的核苷酸片段长度为894nt,同源性为96.5％-100.0％,氨基酸同源性则为98.7％-100.0％.系统进化分析EV71型淮南株与安徽阜阳、山东、河南、北京、云南分离毒株亲缘性较近,处于进化分支C4a,核苷酸同源性为93.5％-100.0％,氨基酸同源性为98.7％-100.0％;CVA16型淮南株为B1b亚型,与山东株、河南株、深圳株、南京株亲缘关系较近,核苷酸序列同源性为95.1％-99.1％,氨基酸序列同源性98.7％-100.0％;CVA10淮南株处于D分支内,与云南、河南、河北株亲缘关系较近,核苷酸序列同源性为96.5％-100.0％,氨基酸序列同源性98.3％-100.0％. 结论 淮南市2014-2016年流行的EV71为C4a亚型,CVA16为B1b亚型,CVA10处于D聚类分支,与国内其他地区流行的手足口病毒亚型一致.
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柯萨奇A组16型对不同细胞的敏感性研究
目的 细胞是进行病毒分离时常被选用的基质,为了分离肠道病毒CVA16型,我们选取了两种细胞,从中筛选出肠道病毒CVA16型的敏感细胞.方法 将20份样本通过核酸检测确定其中的CVA16型阳性样本,通过对比RD、VERO这两种细胞的分离效果来比较细胞的敏感性.结果 核酸检测20份样本中确定9份样本为CVA16型,9份样本在RD细胞中分离出6株毒株,在VERO细胞中分离出8株毒株.结论 CVA16型对VERO细胞的敏感性高于RD细胞,实验中分离CVA16型应首选VERO细胞.
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儿童手足口病病原体的检测及致病影响因素研究
目的 建立快速有效的手足口病病原体检测方法,并探讨手足口病病原体在儿童中的影响因素及防控措施.方法 选择2015年3～11月在湖北大学医院感染科确诊的手足口病患儿为研究对象,从中随机抽取200例进行研究.本研究采用荧光定量RT-PCR方法对200份手足口病患者标本进行肠道病毒71型(EV7l)、柯萨奇病毒普通组16型(CVA16)检测,同时,对病例进行Logistic回归分析来确定危险因素.结果 200例粪便标本检测共检出EV71和CoxA16阳性标本共计153例.其中,普通组感染46例,重型组感染66例,危重型组感染41例.EV71阳性标本感染91例,CoxA16阳性标本共78例.Logistic回归分析显示,在所有调查的影响因素中,体质弱、早产、病例接触史、居住环境差、个人卫生差5个为手足口病危险因素(P＜0.05).结论 荧光定量RT-PCR方法具有特异性强,灵敏度高,重复率好的优点,非常适合手足口病病原体的检测;EV71病原体毒力更强,对患儿身体具有更大的破坏性,可引起严重并发症;儿童监护人应为儿童提供一个良好的居住环境和个人卫生,注意儿童膳食营养,避免与手足口病患儿接触,有相关症状应及时入院检查.
关键词： 手足口病 EV71 CVA16 荧光定量RT-PCR 影响因素 -
2016年盐城市手足口病病原学特征及EV71和CVA16型肠道病毒VP1基因特征
目的 了解2016年盐城市手足口病肠道病毒病原谱分布特征,并对鉴定为EV71、CVA16型肠道病毒VP1基因进行分子进化特征分析.方法 收集疑似手足口病咽肛拭子标本,采用实时荧光RT-PCR方法检测通用、EV71和CVA16型肠道病毒核酸,以RT-PCR法扩增其VP1基因全长编码区并进行序列分析,采用MegAlign、mafft、MEGA等软件进行核苷酸及氨基酸序列比对及基因种系进化特征分析.结果 2016年盐城市共收集疑似手足口病标本504份,检出肠道病毒核酸阳性165份,阳性率32.74％,EV71型、CVA16型、其他型别分别占4.37％、6.94％、21.43％.对EV71、CVA16型肠道病毒遗传进化树分析显示,盐城地区EV71和CVA16代表株分别属于C4a、B1b基因亚群进化分支,未发生基因亚群的转换,在各自进化分支中形成3条传播主链,远离各自原型株.结论 2016年盐城市手足病病原谱为多种基因型的肠道病毒共同流行.其他肠道病毒为优势病原体,EV71和CVA16仍占有一定比例.
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江苏省两县柯萨奇病毒A组16型流行病学特征分析
目的:探讨柯萨奇病毒A组16型(CVA16)的流行病学特征,以期为手足口病的综合防治和CVA16疫苗研制提供流行病学依据.方法:基于在江苏建立的肠道病毒所致疾病监测系统,通过主动与被动报告相结合的方式对东海县2 875人、宝应县2 080人进行监测;使用统一调查表格对病例进行个案调查,并采集咽、肛拭子进行实时荧光定量PCR法快速检测.结果:截至2013年2月,东海、宝应两县CVA16感染所致发病率分别为16.73％(481/2 875)和9.28％(193/2 080),整个监测期间均只出现1个发病高峰,均在2012年5月中下旬;两县病例均覆盖所有乡镇,但不同乡镇间发病率存在地区差异;两县所发现病例年龄范围为9 ～42月龄,男、女性别比分别为1.59∶1和1.47∶1,不同性别发病率无统计学差异.结论:2012年3月～2013年2月江苏省东海和宝应两县肠道病毒流行以CVA16为主,病毒流行具有明显的季节性以及地区差异性.
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盐城市2013年手足口病病原学特征分析
目的：对盐城地区2013年手足口病患儿及其临床重症病例进行病原学特征分析。方法：采集手足口病患儿咽、肛拭子，用肠道病毒实时荧光RT-PCR，对其病毒核酸进行肠道病毒检测定型。结果：491例（重症26例）患儿采集咽、肛拭子标本中，共检出肠道病毒核酸阳性193例（39.31%）中，EV71型35例（18.13%）；CVA16型35例（18.13%）， CVA6型96例（49.74%），其他未分型27例（13.99%）。临床重症病例14例中，EV71型3例，CVA16型0例，CVA6型9例，未分型2例，CVA6与EV71、CVA16三者发病比较，差异有统计学意义（χ2=8.0，P<0.01）。结论：检测的以往常见的EV71和CVA16型转变为CVA6型，它是引起重症病例的主要病原体，也是区域性手足口病的重要病原。
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威海市504例手足口病标本核酸检测结果分析
目的:对威海市504例手足口病( HFMD)患儿粪便样本实验室检测结果进行分析,了解威海地区HFMD病原特征,为今后制定HFMD防治措施提供依据.方法:对送检的504例临床诊断为HFMD患者标本,应用实时荧光( Real - time) RT - PCR法检测标本中的人肠道病毒(HEV)、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CVA16)特异性核酸.结果:504例HFMD患者标本中,EV71阳性率为50.99％,CVA16阳性率为18.25％,其它HEV阳性率为17.26％；46例HFMD重症病例中,EV71阳性率84.78％,CVA16阳性率6.52％.结论:威海地区手足口病病原体以EV71和CVA16为主.EV71型是引起重症病例的优势病毒型,应加强监测,特别是4岁以下婴幼儿的监测.
关键词： HFMD Real-time RT-PCR HEV EV71 CVA16 -
2014年湖南省郴州市手足口病病原谱及CVA16基因特征分析
目的 了解2014年湖南省郴州市手足口病病原谱和优势毒株的基因特征,为郴州市手足口病的防治提供科学依据.方法 采集2014年郴州市手足口病监测病例标本,应用荧光PCR方法检测HEV71、CVA16、CVA6、CVA10和其他肠道病毒.未能分型的其他HEV阳性标本进行RT-PCR扩增,通过基因测序鉴定病原体型别.结果 共检测854份标本,阳性检出率为55.62％.病原谱中已知型别的前5位分别为CVA16(28.00％)、HEV71(25.05％)、CVA6(13.89％)、CVA10(12.42％)、CVB5(0.84％),仍有20.63％的其他HEV未分型.不同月份、不同年龄组、不同病例类型的病原体型别的构成比差异均有统计学意义(均P＜0.05);男女性别的病原体型别的构成比差异无统计学意义(P＞0.05).郴州市的6株CVA16分离株均为B1基因亚型.结论 2014年郴州市的手足口病流行毒株显示了一定的季节性分布特征,主要的几种优势毒株相互交替流行,并与人群的免疫基础相互作用体现在月份和年龄组的分布上.郴州市的CVA16分离株与国内流行株的基因型别一致.
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衡阳市2010年手足口病实验室检测结果分析
目的 对衡阳市2010年4-12月手足口病(HFMD)实验室检测结果进行分析,了解衡阳市HFMD流行特征,为今后制定或调整HFMD防治措施提供参考.方法 对2010年4-12月衡阳市各县区疾病预防控制中心(CDC)及各类医疗机构送检的625例临床诊断为HFMD患者标本,应用实时荧光(Real-time)RT-PCR法检测标本中的人肠道病毒(HEV)、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CVA16)特异性核酸.结果 625例HFMD患者标本中,EV71阳性率为26.08%(163/625),CVA16阳性率为8.80%(55/625),其它HEV阳性率为19.84%(124/625);95例HFMD重症病例中,EV71阳性率(67.80%,40/95)高,并且男性阳性率(50.85%)略高于女性(27.78%),未检出CVA16型;9例HFMD重症死亡病例中,6例为EV71型,阳性率为66.67%.4-7月为HFMD高发期,3岁以下为高风险年龄组,重症病例及重症死亡病例比其它年龄组高.结论 衡阳市2010年HFMD发病率较高,EV71型是引起重症及重症死亡病例的优势病毒型,应加强监测,特别是3岁以下婴幼儿的监测.
关键词： HFMD Real-time RT-PCR HEV EV71 CVA16 -
重组EV71和CVA16型手足口病双价VLP疫苗构建及免疫保护效果评价
目的 运用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达EV71和CVA16的病毒样颗粒,并对纯化的重组EV71、CVA16双价病毒样颗粒疫苗进行免疫效果评价.方法 构建重组杆状病毒Bacmid-P1-3CD,转染Sf9昆虫细胞,纯化EV71、CVA16的病毒样颗粒并检测其形态和生物特性;通过EV71、CVA16的病毒样颗粒免疫ICR雌鼠后,以EV71、CVA16强毒株腹腔攻击5日龄乳鼠,对重组EV71、CVA16型双价VLP免疫保护性进行评价.结果 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功构建并表达EV71和CVA16病毒样颗粒,颗粒大小约为23～30 nm,存在Mr约39 000 VP1特异性蛋白表达.重组EV71、CVA16双价VLP疫苗免疫接种能够诱导小鼠机体产生高效价的特异性抗体(EV71中和抗体效价为1∶960,CVA16中和抗体效价为1∶624)并发挥优于单价VLP疫苗的有效免疫保护效果.结论 重组EV71、CVA16型双价VLP疫苗免疫原性和保护性显著高于单价疫苗,为手足口病疫苗的研发提供了新的思路及实验基础.
