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柯萨奇病毒A组6型抗体中和试验Nt-ELISPOT方法的建立
目的 建立快速、高效的柯萨奇病毒A组6型(CVA6)抗体中和试验Nt-ELISPOT检测法. 方法 取CVA6单克隆抗体(1D5)用HRP标记,以此为检测抗体,基于酶联免疫斑点检测技术(ELISPOT)建立CVA6抗体中和试验Nt-ELISPOT,通过对不同效价血清以及手足口病疑似患者血清标本的检测,比较该方法与传统抗体中和试验(Nt-CPE)的一致性. 结果 以CVA6单克隆抗体1D5为检测抗体,建立了快速检测针对CVA6中和抗体的Nt-ELISPOT检测法;该方法与Nt CPE法相比,其检测时间显著缩短;运用这两种方法分别对4份不同效价血清样品及70份手足口病疑似患者血清样品进行CVA6抗体检测,其中和试验结果的一致性为100％. 结论 建立的Nt-ELISPOT方法快速、高效,可用于手足口病CVA6感染检测,为CVA6的疫苗免疫原性评价、血清流行病学调查等提供了技术支持.
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2015年广东省广州地区疱疹性咽峡炎病原学特征分析
目的 了解2015年广东省广州地区疱疹性咽峡炎病原学特征,为疱疹性咽峡炎的防控提供数据基础.方法 收集123例疱疹性咽峡炎病例的粪便标本和咽拭子标本共211份,采用荧光定量PCR和巢式PCR进行肠道病毒检测,肠道病毒阳性标本接种RDa细胞进行病毒分离,选取CVA6阳性标本或毒株进行VP1全长序列扩增与测序,运用DNAStar6.0和MEGA5.2软件对获取序列进行系统进化分析.结果 123例疱疹性咽峡炎病例中,肠道病毒阳性率为93.50％,共检出CVA6、CVA10、CVA2、EV71、CVA16、CVB2、Echo14和Echo30等8种肠道病毒,其中CVA6阳性率高(60.98％),其次为CVA10(13.01％);粪便标本肠道病毒阳性率(x2=29.88,P＜0.01)和病毒分离阳性率(x2=8.67,P＜0.01)均高于咽拭子标本;基于VP1全长序列遗传进化分析发现,疱疹性咽峡炎CVA6核苷酸同源性96.9％～99.9％,氨基酸同源性99.0％ ～ 100.0％,均属于D3基因亚型.结论 2015年广东省广州地区疱疹性咽峡炎的病原体以A组肠道病毒为主,其中D3基因亚型的CVA6是优势流行株.
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盐城市2013年手足口病病原学特征分析
目的：对盐城地区2013年手足口病患儿及其临床重症病例进行病原学特征分析。方法：采集手足口病患儿咽、肛拭子，用肠道病毒实时荧光RT-PCR，对其病毒核酸进行肠道病毒检测定型。结果：491例（重症26例）患儿采集咽、肛拭子标本中，共检出肠道病毒核酸阳性193例（39.31%）中，EV71型35例（18.13%）；CVA16型35例（18.13%）， CVA6型96例（49.74%），其他未分型27例（13.99%）。临床重症病例14例中，EV71型3例，CVA16型0例，CVA6型9例，未分型2例，CVA6与EV71、CVA16三者发病比较，差异有统计学意义（χ2=8.0，P<0.01）。结论：检测的以往常见的EV71和CVA16型转变为CVA6型，它是引起重症病例的主要病原体，也是区域性手足口病的重要病原。
