首页 > 文献资料
-
补骨脂素对MCF-7/ADR耐药细胞内ADR及Ca2+浓度的影响
目的 研究补骨脂素对MCF-7/ADR耐药细胞逆转作用及对耐药细胞内Ca2+浓度影响,探讨其可能作用机制.方法 采用MTT法测定补骨脂素对细胞增殖抑制作用,高效液相色谱法检测细胞内ADR的浓度,激光共聚焦显微镜测定细胞内不同时段的Ca2+浓度.结果 补骨脂素在1～20 μmol/L浓度下能不同程度降低ADR对MCF-7/ADR细胞的IC50,并不同程度提高细胞内ADR浓度;1～20 μmol/L补骨脂素在不同作用时段(24、48、96 h)对MCF-7/ADR细胞内Ca2+浓度与作用时间呈负相关.结论 补骨脂素能逆转MCF-7/ADR细胞的MDR,其作用机制与影响耐药细胞内Ca2+浓度,故而增加细胞内ADR浓度有关.
关键词： 补骨脂素 多药耐药 逆转 MCF-7/ADR细胞 -
高胰岛素对MCF-7/ADR细胞化疗敏感性的影响
目的：分析高胰岛素对MCF-7/ADR细胞P-糖蛋白（P-gp）表达和功能的影响，并初步探讨胰岛素对MCF-7/ADR细胞化疗敏感性的影响。方法用不同胰岛素浓度（0.001、0.005、0.01、0.05、0.10μmol/L）的全细胞培养基干预MCF-7/ADR细胞，分别采用Real-time PCR法检测细胞中P-gp mRNA表达，Western Blot法检测细胞中P-gp蛋白表达水平，罗丹明123荧光实验测定P-gp的外排功能变化，MTT法检测MCF-7/ADR细胞活性及化疗敏感性。结果0.10μmol/L的胰岛素可促进MCF-7/ADR细胞增殖，0.05及0.10μmol/L浓度的胰岛素可增加MCF-7/ADR细胞P-gp mRNA及蛋白水平表达，并能增加P-gp的外排功能，降低MCF-7/ADR细胞对表阿霉素的化疗敏感性。结论高浓度胰岛素可能通过促进MCF-7/ADR细胞P-gp的表达和功能，增加乳腺癌细胞化疗耐药性，从而降低MCF-7/ADR细胞的化疗敏感性。
-
沉默HuR的表达增加人乳腺癌耐药MCF-7/Adr细胞对多柔比星的敏感性
目的:研究RNA干扰人抗原R(human antigen R,HuR基因的表达对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/Adr对多柔比星(doxorubicin)敏感性的影响.方法:构建靶向HuR基因的shRNA表达质粒(pGenesil-siHuR),稳定转染至MCF-7/Adr细胞,real-time PCR检测细胞中MDRl mRNA的表达,Western blotting检测MCF-7/Adr细胞中由MDR1基因编码的P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达,MTT法检测pGenesil-siHuR转染后MCFG/Adr细胞在多柔比星作用后的存活率和IC50,流式细胞术检测MCF-7/Adr细胞的凋亡率.结果:与未转染的MCF-7/Adr细胞比较,pGenesil-siHuR质粒转染MCF-7/Adr细胞中MDRl mRNA的表达水平明显减低[(0.184±0.029)vs(1.203±0.026),P＜0.01],P-gp表达水平明显降低.pGenesil-siHuR质粒转染MCF-7/Adr细胞后,MCF-7/Adr细胞对多柔比星的IC50从未转染的(148.2±2.3) nmol/L降至(42.9±0.4) nmol/L;经多柔比星处理后,pGenesil-siHuR质粒转染组MCF-7/Adr细胞的凋亡率明显上升[(34.6±1.1)％vs(1.1±0.2)％,P＜0.01].结论:RNA干扰HuR的表达能抑制MDR1基因的表达,增加耐药乳腺癌MCF-7/Adr细胞对多柔比星的敏感性.
-
补骨脂素逆转人乳腺癌细胞多药耐药性的研究
目的研究中药补骨脂素对人乳腺癌细胞多耐药性的逆转作用.方法用MTT法测定药物的细胞毒性和IC50用流式细胞仪测定耐药细胞P170糖蛋白表达,并选异搏定作阳性对照,观察具有钙拮抗作用的补骨脂素对MCF-7/ADR多药耐药性的逆转作用.结果补骨脂素在非细胞毒性剂量下能使MCF-7/ADR对阿霉素的浓度升高,但对细胞表面的糖蛋白P-170却没有影响.结论补骨脂素具有逆转人乳腺癌MCF-7/ADR多药耐药性的作用.
关键词： 乳腺肿瘤 MCF-7细胞 MCF-7/ADR细胞 补骨脂素类 多药耐药抗药 -
地高辛逆转乳腺癌MCF-7/阿霉素细胞的耐药性及其机制
本研究旨在探究地高辛对乳腺癌MCF-7/阿霉素(ADR)细胞耐药性的影响,并探讨其分子机制.将正常培养的MCF-7和MCF-7/ADR细胞分别设为对照组和ADR组;经地高辛(100 nmol/L)处理48 h后的MCF-7/ADR细胞为ADR+ digoxin组;用shRNA技术沉默HIF-1a基因的MCF-7/ADR细胞为shHIF-1α组,并设置对照组为shcontrol组.采用CCK-8法检测ADR的细胞毒作用,以测定IC50与耐药指数;用RT-PCR法检测缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)和多药耐药基因1(multidrug resistance-1,MDR1)的mRNA水平;用Western blot方法检测HIF-1α和MDR1蛋白的表达水平;用流式细胞术检测细胞凋亡.结果显示,ADR组细胞对ADR的耐药指数高达115.6,地高辛使其耐药指数下降至47.2 (P＜ 0.05);ADR组细胞中HIF-1α与MDR1的mRNA和蛋白水平均高于对照组细胞(均P＜ 0.05),而地高辛可显著降低ADR组细胞HIF-1α与MDR1的蛋白水平,以及MDR1的mRNA水平(P＜0.05),但对HIF-1α的mRNA水平无明显影响;经shRNA干扰HIF-1a基因表达后,HIF-1α和MDR1的蛋白水平均显著降低(P＜0.05);沉默HIF-1a基因能显著增强ADR对ADR组细胞的促凋亡作用(P＜0.05).地高辛可有效地诱导shcontrol组和shHIF-1α组细胞凋亡(P＜0.05),但二组之间无显著差异.以上结果提示,地高辛可通过下调HIF-1α蛋白表达从而在转录水平抑制MDR1的表达,也可通过不依赖HIF-1α的通路诱导MCF-7/ADR细胞凋亡,进而在一定程度上逆转MCF-7/ADR细胞的耐药性.
关键词： 地高辛 MCF-7/ADR细胞 缺氧诱导因子-1α 多药耐药基因1 细胞凋亡 -
塞来昔布逆转MCF-7/Adr细胞多药耐药及其机制探讨
目的 观察环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对肿瘤多药耐药(MDR)的逆转作用,并探讨其初步作用机制.方法 在乳腺癌耐药细胞株MCF-7/Adr中,应用MTT方法检测塞来昔布对多柔比星(阿霉素,DOX)的耐药逆转倍数;RT-PCR及Western blot方法检测基因及蛋白的变化;流式细胞术(FCM)检测细胞膜P-gp的表达、功能、细胞周期和凋亡.结果 塞来昔布作用24小时后,MCF-7/Adr细胞对DOX的敏感性明显增加,浓度为10 μmol/L及20 μmol/L时,耐药逆转倍数分别为1.82和3.80,呈现剂量依赖性.COX-2、mdr1、c-Jun、YB-1、survivin等在基因和蛋白水平明显下调(P<0.01),NF-κB无明显差异(P>0.05);20 μmol/L作用24小时,P-gp的功能受抑制;G0+G1期细胞增多,S期细胞减少(P<0.05),凋亡率明显增高(P<0.05).结论 选择性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布可有效逆转MCF-7/Adr细胞多药耐药,在一定的浓度范围内呈现剂量依赖性,初步机制可能涉及干预转录因子的表达而下调mdr1,阻滞细胞周期及增加细胞凋亡.
-
化痰散结方含药血清诱导MCF-7/ADR细胞凋亡的实验研究
为观察化痰散结方含药血清对人乳腺癌耐阿霉素(ADM)株MCF-7/ADR细胞凋亡的影响.将实验随机分为10%正常鼠血清组(对照组)、5%化痰散结方含药血清组(以下简称药血清组)、10%药血清组、20%药血清组;ADM+10%正常鼠血清组、ADM+10%药血清组六组,各组药物分别作用于MCF-7/ADR细胞24 h后,应用流式细胞技术检测细胞周期及凋亡情况.结果化痰散结方含药血清可作用于耐药细胞株G1/S节点,使耐药细胞株阻滞于G0-G1期;与对照组比较,含药血清组细胞凋亡比例不同程度升高,其诱导凋亡作用与药物剂量存在量效关系,随着剂量的增加,细胞凋亡增加(P<0.05);含药血清与阿霉素联用时,促使细胞凋亡作用为显著,明显优于单用阿霉素组(P<0.05).表明化痰散结方可致耐药细胞株凋亡,并能加强阿霉素的诱导凋亡作用.
关键词： 化痰散结方 MCF-7/ADR细胞 凋亡 -
逆转胶囊对人乳腺癌MCF-7/ADR细胞中P-gp和MRP表达的影响
目的:检测逆转胶囊对乳腺癌耐药相关蛋白表达的影响,探讨其逆转乳腺癌多药耐药的作用机制.方法:流式细胞术、免疫印迹技术(Western-blot)检测逆转胶囊作用前后MCF-7/ADR细胞表面P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)的表达.结果:逆转胶囊能显著抑制MCF-7/ADR细胞表面P-gp的表达,并可诱导MRP表达下降,其作用随血药浓度增加和作用时间的延长而增强.结论:逆转胶囊逆转乳腺癌多药耐药的机制与下调P-gp和MRP的表达有关.
-
化痰散结方对荷瘤鼠一般情况、免疫器官及局部肿瘤的影响
目的 探讨化痰散结方的抑瘤作用.方法 实验建立含人乳腺癌细胞系MCF-7/ADR细胞的动物荷瘤模型.分组:空白组:不接种肿瘤,亦不给任何干预.对照组:灌服生理盐水0.4ml/只,1次/d.阿霉素(ADM)组:ADM(4mg/kg)尾静脉注射,每4d注射1次,共7次.方药组:灌服中药混悬液0.4ml/只,1次/d.ADM+方药组:中药灌服方法同方药组,ADM给药方法同ADM组.结果 通过观察各组小鼠的一般情况及瘤重,表明化痰散结方对乳腺癌细胞系MCF-7/ADR细胞有明显的抑制作用.各治疗组瘤重均显著低于对照组,ADM组、方药组、ADM+方药组与对照组比较,差异均有显著性(P<0.01).与ADM组比较,ADM+方药组效果更好(P<0.05).结论 化痰散结方有明显的抑瘤作用.
关键词： 乳腺肿瘤 化痰散结 MCF-7/ADR细胞 -
甲基莲心碱对乳腺癌MCF-7/Adr细胞MDR逆转的研究
目的 探讨甲基莲心碱(Neferine,Nef)对耐药人乳腺癌细胞增殖,细胞内ADM积聚浓度及mdr-1/P-gp表达的影响.方法 采用MTT法测定细胞毒作用,高效液相色谱法测定细胞内ADM积聚浓度,RT-PCR技术及蛋白质印迹技术检测mdr-1/P-gp表达.结果 10μg/ml Nef+ADM组细胞的抑制率及细胞内ADM积聚浓度比ADM组高(P＜0.01);20μg/ml Nef+ADM组细胞抑制率及细胞内ADM积聚浓度较5μg/ml异博定+ADM组及10/ag/ml Nef+ADM组均高(P＜0.01).10μg/ml Nef+ADM组MCF-7/Adr细胞mdr-1 mRNA及P-gp表达比ADM组明显下降(P＜0.01).20μg/ml Nef+ADM组细胞mdr-1 mRNA及P-gp表达较10μg/ml Nef+ADM组明显下调(P＜0.01).结论 Nef能抑制耐药人乳腺癌细胞增殖.Nef能增加MCF 7/Adr细胞内ADM积聚浓度.Nef通过降低耐药人乳腺癌细胞mdr-1 mRNA及P-gp的表达逆转MDR.
关键词： 甲基莲心碱 多药耐药 P-糖蛋白 MCF-7/ADR细胞
