首页 > 文献资料
-
肿瘤-睾丸基因SSX1的原核表达载体的构建
目的:构建肿瘤-睾丸基因SSX1的原核表达载体,为进一步表达、纯化SSX1蛋白,制备肝癌疫苗奠定基础.方法:行RT-PCR从肝细胞癌组织中扩增CT基因SSX1,将SSX1和pMAL-C2质粒进行BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切,然后连接并转化大肠杆菌DH5a,后对重组质粒进行蓝白斑筛选,酶切和测序鉴定.结果:重组表达质粒经鉴定准确无误.结论:成功构建了肿瘤-睾丸基因SSX1的原核表达载体.
-
肿瘤-睾丸抗原SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1在胰腺癌中的表达及其生物学意义
目的 检测肿瘤-睾丸抗原(CTA)SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1在正常胰腺组织、慢性胰腺炎以及胰腺癌中的表达情况,寻找胰腺肿瘤中高表达的CTA.方法 应用免疫组织化学SP法检测8例正常胰腺组织、15例慢性胰腺炎组织、52例胰腺癌组织中SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1的表达.Western blotting检测52例胰腺癌组织中SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1的表达.结果 正常胰腺组织、慢性胰腺炎中SSX、MAGE-A1和NY-ESO-1均不表达,SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1在52例胰腺癌的阳性表达率分别为48.08%(25/52)、7.69%(4/52)、5.77%(3/52);经相关分析,SSX、NY-ESO-1和MAGE-1的阳性表达与患者的年龄、性别、病变部位、分化程度均未见明显相关关系(P＞0.05); SSX的表达与肿瘤的浸润转移呈负相关(r=-0.306,P=0.028); 52例胰腺癌病例中55.77%(29/52)有1种以上的CTA表达.结论 不同种类的CTA在胰腺癌中的表达存在显著差异,SSX的阳性表达率高;胰腺癌中SSX的高表达与肿瘤的转移呈明显的负相关关系;CTA在胰腺癌中的表达呈现簇生现象.
-
肿瘤-睾丸抗原MAGE-1和NY-ESO-1 mRNA在胃肠间质瘤中的表达
目的:探讨肿瘤-睾丸抗原(CTA)MAGE-1和NY-ESO-1作为胃肠间质瘤(GISTs)免疫治疗特异性靶点及MAGE-1和NY-ESO-1 mRNA作为辅助GISTs危险度分级指标的可能性.及其与GISTs生物学行为的关系.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测30例GISTs中MAGE-1和NY-ESO-1mRNA的表达,并取正常胃肠道组织作为阴性对照组,同时分析MAGE-1和NY-ESO-1mRNA表达与病理特征的关系.结果:正常对照组中无阳性表达,30例GISTs中,18例至少表达一种CTA,MAGE-1和NY-ESO-1 mRNA在GISTs中的表达率分别为30%和47%.MAGE-1和NY-ESO-1 mRNA表达与患者年龄、性别和病理类型无关,而与肿瘤生长部位、肿瘤大小及危险度分级有关(P<0.05).MAGE-1和NY-ESO-1 mRNA在低危、中危、高危三个组中表达量随着危险度分级的升高而增高,三组间差异有统计学意义(P<0.05).MAGE-1和NY-ESO-1 mRNA在GISTs中的表达不存在相关性(r=0.018,P>0.05).结论:MAGE-1和NY-ESO-1 mRNA在GISTs中的高特异性表达,其抗原有望成为GISTs免疫治疗特异性的靶点:MAGE-1和NY-ESO-1 mRNA表达与GISTs危险度分级有关,MAGE-1和NY-ESO-1 mRNA有望成为辅助GISTs危险度分级的诊断指标.
-
肿瘤-睾丸抗原研究进展
肿瘤-睾丸抗原又称CT抗原,是一类在多种肿瘤组织中表达而在正常组织中除睾丸外不表达的抗原,因而是很有前途的肿瘤疫苗候选抗原.本文就目前肿瘤-睾丸抗原的定义、分类及其在肿瘤组织及正常组织中表达的特点和作为疫苗的临床研究进展作一综述.
-
SSX、NY-ESO-1、BRDT及MAGE-C2基因在胃癌等恶性肿瘤中表达及应用
现今已经确认多种肿瘤一睾丸抗原(CTA)基因在同一种肿瘤组织中表达,而在睾丸以外的其他正常组织几乎不表达,正因为其表达特点,肿瘤一睾丸抗原成为研究热点.现从具有代表性的肿瘤-睾丸抗原SSX、NY-ESO-1、BRDT及MAGE-C2基因,阐述在胃癌等恶性肿瘤中的表达及应用予以综述.
-
NY-ESO-1抗原与肿瘤免疫治疗进展
NY-ESO-1抗原是肿瘤-睾丸抗原家族中的重要成员,在多种类型的肿瘤中广泛表达,并且是迄今发现的具免疫原性的肿瘤抗原,可以在NY-ESO-1表达阳性的肿瘤患者体内引起自发性体液免疫反应和特异性T细胞免疫反应.因此,NY-ESO-1被认为是好的肿瘤候选疫苗,在肿瘤免疫治疗中具发展潜力.本文主要介绍了近年来有关NY-ESO-1抗原以及相关疫苗的研究进展.
-
黑色素瘤抗原-A1-A3的表达与喉癌临床特征相关性的研究
目的：了解不同分期喉癌患者手术前后的肿瘤-睾丸抗原（CTA）家族中的黑色素瘤抗原-A1（MAGE-A1）和黑色素瘤抗原-A3（MAGE-A3）的血清学浓度变化情况，筛选喉癌诊断的CTA血清标志物。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测25例喉癌患者手术前、手术后血清中的MAGE-A1和MAGE-A3水平，并进一步检测46例喉癌患者手术前组、33例喉癌患者手术后组和20名健康人血清中的5种CTA。结果 ELISA法检测25例喉癌患者手术前、手术后血清中MAGE-A1和MAGE-A3浓度差异有统计学意义（P＜0.05）。在46例喉癌患者手术前组、33例喉癌患者手术后组和20名健康人中，MAGE-A1和MAGE-A3手术前组和健康人组血清的浓度差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 MAGE-A1和MAGE-A3有可能成为喉癌诊断和预测复发的CTA血清标志物。
-
MAGE-3-HSP70融合基因真核表达载体的构建与鉴定
背景:疫苗诱导的抗肿瘤CD8+T细胞反应被认为在增加机体对肿瘤抵抗力方面起重要作用.研究发现,抗原递呈细胞摄取热休克蛋白70与肿瘤相关抗原的融合蛋白,并在MHC Ⅰ类分子上处理提呈有此热休克蛋白为伴侣的肽后,会启动CD8+细胞毒性T淋巴细胞反应.目的:构建黑色素瘤抗原3(MAGE-3)、人热休克蛋白70(HSP70)融合基因的真核表达载体.设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-06/12在国家卫生部纳米生物技术重点实验室完成.材料:pcDNA3.1(-)Vector为BD公司产品,pINCY/MAGE-3,pOTB7/HSP70为Open Biosystems公司产品,DH5α由纳米生物技术重点实验室保存.方法:设计含Xho Ⅰ酶切位点MAGE-3引物及含Kpn Ⅰ酶切位点人热休克蛋白70引物,以pINCY/MAGE-3和pOTB7/HSP70为模板扩增黑色素瘤抗原3和人热休克蛋白70基因片段,以基因片段为模板,采用MAGE-3上游引物(含Xho Ⅰ酶切位点)及人热休克蛋白70下游引物(含Kpn Ⅰ酶切位点),PCR扩增MAGE-3-HSP70融合基因片段,Kpn Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切并连接至pcDNA3.1(-),转化感受态大肠杆菌DH5α,获得阳性克隆进行双酶切和测序鉴定.主要观察指标:真核表达载体pcDNA3.1(-)IMAGE-3+HSP70的鉴定.结果:测序结果显示黑色素瘤抗原3与Gene Bank上公布的序列完全一致,人热休克蛋白70有3处同义突变.结论:成功构建MAGE-3-HSP70融合基因真核表达载体.
-
睾丸组织中ACRBP的表达及启动子CpG位点的甲基化分析
目的 了解人睾丸组织中ACRBP的表达及其启动子CpG位点的甲基化状态,为探讨该基因表达机制奠定基础.方法 运用免疫组化法研究睾丸组织中目的蛋白定位；结合生物信息学分析该基因启动子CpG位点序列；通过Bisulfite PCR测序法(BSP)分析目的基因CpG位点的甲基化状态.结果 免疫组化显示精子与精子细胞及部分的精原细胞和精母细胞表达目的蛋白.对ACRBP启动子序列(转录起始点-127～+110bp)进行BSP扩增测序,发现该区域共有24个CpG位点,其中仅有3个出现甲基化,其甲基化频率为1.67％.结论 生精小管中ACRBP蛋白呈区域性的阳性反应,可能与生精小管内精子发生的不同步性有关；ACRBP启动子CpG位点低甲基化可能与该基因表达的机制有关.
-
MAGE-A1、MAGE-C2及SSX-1在原发性肝细胞癌中的表达及意义
目的 检测肿瘤-睾丸抗原(CT抗原)MAGE-A1、MAGE-C2和SSX-1 mRNA在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达情况.方法 采用RT-PCR方法检测MAGE-A1、MAGE-C2和SSX-1 mRNA在55例HCC患者癌及癌旁组织中的表达,对产物进行测序,并对检测结果与临床指标进行分析.结果 55例HCC患者的癌组织中,MAGE-A1、MAGE-C2和SSX-1 mRNA的表达率分别为60.0%、14.5%和40.0%;癌旁组织无表达.结论 CT抗原MAGE-A1、MAGE-C2和SSX-1 mRNA在HCC中呈高表达,是HCC免疫治疗的理想靶位.
关键词： 肿瘤-睾丸抗原 癌 肝细胞 逆转录-聚合酶链反应 -
肿瘤-睾丸抗原MAGE-1、MAGE-3、SSX-2及NY-ESO-1在胃癌中的表达
目的检测肿瘤-睾丸(cancer-testis,CT)抗原MAGE-1、MAGE-3、NY-ESO-1及SSX-2基因mRNA在胃癌组织中的表达,探索其在胃癌免疫治疗中的应用价值.方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对胃癌患者癌组织、相应癌旁组织和对照组织(慢性胃炎和正常胃组织)中的MAGE-1、MAGE-3、NY-ESO-1及SSX-2基因mRNA进行检测,结合临床指标进行分析,随机选取RT-PCR阳性扩增产物进行序列测定.结果在在检测的50例胃癌组织中,MAGE-1、MAGE-3、NY-ESO-1及SSX-2基因mRNA阳性率分别是48%(24/50)、42%%(21/50)、11%(6/50)和8%(4/50);多个CT抗原基因mRNA在胃癌中同时表达,至少表达一种CT抗原者达76%(38/50),表达两种或两种以上者为40%(20/50),表达三种或三种以上者为10%(5/50),同时表达四种者为6%(3/50).而相应的癌旁组织和对照组织中均未检测到四种目的基因的表达.DNA测序结果表明RT-PCR产物确为这四种基因的目的片段.MAGE-1、MAGE-3、NY-ESO-1及SSX-2基因的表达与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、浸润深度和淋巴结转移等无显著相关性(P＞0.05).结论CT抗原(MAGE-1、MAGE-3、NY-ESO-1及SSX-2)基因在胃癌组织中呈高特异表达,这使得以这些基因编码的蛋白作为疫苗用于胃癌的免疫治疗成为可能.
-
正常和肿瘤组织中ZNF165 mRNA的表达及其自发性抗体检测
目的:分析正常和肿瘤组织中ZNF165的表达及其在肝癌患者体内诱导产生的自发性体液免疫反应.方法:采用RT-PCR和定量PCR方法检测16种正常和4种肿瘤(肝癌、胃癌、结肠癌、肺癌)组织中ZNF165 mRNA及表达丰度;将ZNF165基因在原核细胞中进行蛋白表达,亲和层析法纯化重组ZNF165蛋白.Western blot方法对ZNF165在82例肝癌患者体内诱导的自发性抗体进行检测.结果:正常组织中ZNF165 mRNA只在睾丸组织表达,肝癌、胃癌、结肠癌和肺癌组织中ZNF165 mRNA阳性率分别为52.4%、 42.8%、 42.8%和21.4%.定量 PCR结果显示ZNF165 mRNA以高水平在肝癌组织与睾丸组织中表达,而在配对的癌旁组织与其他正常组织中仅存在很低水平的表达(P均＜0.01).82例肝癌患者血清中4例与ZNF165蛋白出现免疫反应,阳性率4.9%;36例正常人血清均为阴性.结论:ZNF165是一个新的肿瘤-睾丸抗原基因,它在机体内可诱导体液免疫反应,有可能作为肿瘤免疫治疗的候选抗原.
关键词： ZNF165重组蛋白 肿瘤-睾丸抗原 原核表达 自发性抗体 -
基于XAGE-1b抗原靶向免疫治疗在前列腺癌中的研究进展
前列腺癌是男性常见的恶性肿瘤之一,严重威胁着男性健康,其发生发展是一个多基因相互作用、相互影响的复杂过程,免疫反应在整个过程中扮演了重要的角色.随着对前列腺癌肿瘤免疫学和肿瘤微环境研究的不断深入,靶向免疫治疗被认为是前列腺癌有前景的治疗方式.XAGE-1b抗原是一种前列腺癌相关抗原,具有强免疫原性,大量研究表明其与前列腺癌的发生及进展密切相关,不少学者认为XAGE-1b抗原是晚期前列腺癌免疫治疗的潜在靶点.现就针对XAGE-1b抗原前列腺癌靶向免疫治疗研究进展作一综述.
-
肿瘤-睾丸抗原在胃癌组织中的表达
目的 检测8种肿瘤-睾丸抗原(CTA)基因mRNA在胃癌组织及相应癌旁组织中的表达.方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测55例胃癌患者的癌组织和相应癌旁组织中8种CTA基因mRNA的表达,30例非肿瘤患者胃黏膜组织作为对照.结果 55例胃癌组织中,表达MAGE-A1、MAGE-A3、CT9、CT10、NY-ESO-1、SSX-1、SSX-2、SXX-4基因的阳性率分别是60.0%(33/55)、30.9%(17/55)、34.5%(19/55)、12.7%(7/55)、10.9%(6/55)、23.6%(13/55)、3.6%(2/55)和27.3%(15/55),而相应的癌旁组织均为阴性.非肿瘤患者胃黏膜组织未见此8种CTA基因的表达.8种CTA基因的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、幽门螺旋杆菌感染及TNM分期无明显相关(P>0.05).结论 多种CTA基因在胃癌中呈特异性高表达,为胃癌的免疫治疗提供了新的潜在的靶位.
关键词： 肿瘤-睾丸抗原 胃癌 逆转录-聚合酶链反应 -
肿瘤-睾丸抗原SSX1基因mRNA在肝细胞肝癌中的表达
目的检测肿瘤-睾丸抗原SSX1基因mRNA在肝细胞肝癌(HCC)中的表达情况.方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对47例HCC患者的癌组织和相应癌旁组织以及15例肝硬化和15例正常肝组织的SSX1基因mRNA表达情况进行检测,随机选择4例RT-PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定.结果 47例HCC患者中,39例表达SSX1 mRNA,阳性率为83%,相应的癌旁组织中有3例为弱阳性,其中2例患者获得了离癌灶更远处的活检组织,对其进行RT-PCR检测,结果显示阴性;所测的15例肝硬化和15例正常肝组织均未检测到SSX1的表达.4例DNA测序结果表明RT-PCR产物确为SSX1 cDNA.SSX1的表达与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清甲胎蛋白(AFP)水平、乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染无显著相关性(P>0.05).结论 SSX1在HCC中呈高比例、高特异表达,可望成为HCC免疫治疗的理想靶位.
关键词： 癌 肝细胞 肿瘤-睾丸抗原 逆转录-聚合酶链反应 SSX1基因 -
NY-ESO-1与MAGE-A1在乳腺癌组织中的表达及意义
目的 探讨NY-ESO-1与MAGE-A1在乳腺癌组织中的表达及意义.方法 健康对照者乳腺组织20例,不同病理类型及分级的病例90例,标本进行免疫组织化学SP法染色;采用Tanaka改良定量记分法测阳性率.结果 NY-ESO-1与MAGE-A1在正常乳腺组织中不表达;乳腺癌组织中NY-ESO-1与MAGE-A1阳性表达率分别为37.78％和23.33％;阳性表达与临床病理各参数不具有相关性(P＞0.05).结论 NY-ESO-1和MAGE-A1在乳腺癌组织中呈高特异性表达,对乳腺癌的早期诊断有一定的临床意义.
-
肿瘤-睾丸抗原在乳腺癌中的研究现状
肿瘤-睾丸抗原(cancer-testis antigen,CTA)是一类具有特异性表达模式的肿瘤相关抗原,是包含MAGE、NY-ESO-1等抗原肽的一个基因大家族.基于CTA在肿瘤患者体内可诱发肿瘤特异性免疫应答,CTA已成为肿瘤免疫治疗的重要候选分子.本文就CTA在乳腺癌中的表达情况,尤其在三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)中的表达及临床意义作一综述,为制订乳腺癌免疫治疗策略提供新的概念和思考,CTA有望成为TNBC特异性免疫治疗的理想靶点.
-
不同XAGE-1异构体在肝细胞癌中的表达
目的 探讨肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721以及肝癌患者肿瘤组织标本中的4种XAGE-1异构体的表达情况,同时研究其与肝癌患者临床病理之间的关系.方法 使用RT-PCR方法检测肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721以及80例肝癌患者肿瘤组织标本中的4种XAGE-1异构体的表达情况,同时收集患者临床资料,对XAGE-1b的表达与肝癌患者临床病理特征之间的关系进行研究.结果 XAGE-1b和XAGE-1d mRNA在肝癌细胞株和部分患者肿瘤组织标本中阳性表达[分别是35/80(43.75%)、6/80(7.50%)];而XAGE-1a和xAGE-1c mRNA在肝癌细胞株和肝癌患者标本中均为阴性表达;在对照组组织标本(4例肝血管瘤,8例肝破裂)中4种xAGE-1异构体均为阴性表达.XAGE-1bmRNA在肝癌组织中具有较高的表达率,并且其表达与肝癌TNM分期相关.结论 XAGE-1b在肝癌细胞中呈阳性表达,同时在肝癌组织中呈高度阳性表达,预示XAGE-1b的表达与肝癌预后相关,可作为其免疫治疗的潜在靶点之一.
-
XAGE-1b 基因与肿瘤的关系及研究进展
XAGE-1b 基因是 XAGE 亚科，属于 GAGE 家族的一员。这个基因强烈表达于尤文氏肉瘤，腺泡状横纹肌肉瘤和正常睾丸。该基因编码的蛋白含有一个核定位信号，并与其他GAGE/ PAGE 蛋白质共用一个相似性序列。因为表达模式和序列的相似性，这种蛋白也属于 CT(癌-睾丸)抗原家族。该基因的选择性剪接，除了替代转录起始位点，还产生多个转录变异体。
-
肿瘤—睾丸基因在中国人群髓母细胞瘤中的表达
目的:研究肿瘤—睾丸(Cancer-testis,CT)基因在中国人群髓母细胞瘤中表达的情况.方法:收集25例髓母细胞瘤病例,分别采用RT-PCR和免疫组化检测髓母细胞瘤CT基因和蛋白的表达,并结合分型进行分析.结果:non X-CT抗原之间相比,肿瘤分犁之间的差异两两之间具有统计学意义(P＜0.05).25例病例至少表达1个CT基因.GAGE是常表达的CT基因,25例病例有17例(68％)存在.19/20(95％)的病例中发现存在X-CT基因的共表达,而只有1/18(5.6％)的病例存在nonX-CT基因的共表达.所有病例中单克隆抗体CT 7-33(MAGEC1)是染色阳性反应多的蛋白.对CT基因mRNA的表达和患者的临床参数(如年龄及临床结果)进行了统计学分析,并显示两者之间无显著相关性.结论:在分子水平上,CT抗原在10个CT基因中至少有1个存在.很多CT基因有mRNA水平的表达,却很少有蛋白水平的表达.
