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海藻糖在哺乳动物细胞保存中的作用机制及应用现状
哺乳动物的细胞保存研究作为低温生物学领域的一个重要分支,近年来已经获得了长足的发展.
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海藻糖应用于人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究
目的 探讨海藻糖的应用能否改善人成熟卵母细胞玻璃化冷冻效果、提高冻融后卵母细胞的发育潜能.方法 从该中心IVF/ICSI治疗的病人中经知情同意获取卵母细胞248枚,随机分成四组:显微注射海藻糖组(A组)、细胞外海藻糖组(B组)、常规蔗糖组(C组)、新鲜对照组(D组).卵母细胞复苏后,所有存活卵母细胞均行卵胞浆内单精子显微注射(ICSI),观察各组卵母细胞冻融后存活率、受精率、卵裂率、囊胚率、优质胚胎率、优质囊胚率.结果 A、B、C三组存活率、优质胚胎率、囊胚率差异无统计学意义(P>0.05),A组受精率、卵裂率、优质囊胚率高于B组和C组,差异均有统计学意义(P<0.05),其中与B组受精率、卵裂率差异极显著(P<0.01),与C组卵裂率差异极显著(P<0.01);B组与C组存活率、受精率、卵裂率、优质胚胎率、囊胚率、优质囊胚率差异均无统计学意义(P>0.05);A组与D组优质胚胎率、优质囊胚率差异有统计学意义(P<0.05);B组及C组与D组受精率、卵裂率、优质胚胎率、优质囊胚率差异极显著(P<0.01).结论 海藻糖作为细胞内冷冻保护剂似乎能够改善人卵母细胞玻璃化冷冻效果及冻融后卵母细胞发育潜能.
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生物发酵法生产海藻糖工艺条件的研究
应用2.5 L全自动发酵罐对酵母Y388海藻糖积累条件进行了研究,单因子实验的佳条件为:控制pH在5.0,发酵温度30℃,风量1:0.6,转速300 rpm,种龄20 h.在优化条件下通过连续流加葡萄糖,海藻糖的含量可持续增加达到1.01 g·L-1.
关键词： 酵母 2.5 L全自动发酵罐 海藻糖 积累条件 连续流加 -
人工泪液在治疗干眼症中的应用
干眼症是指由于泪液的质或量异常,或泪液的动力学异常引起的泪膜不稳定及眼表面的损害,从而导致眼部不适等症状的一类疾病.该病发生较为普遍,任何年龄都可以发生干眼[1],我国干眼症有很高的发病率,而且还有继续增加的趋势.干眼症发病原因复杂,如全身性疾病、环境污染、配戴隐性眼镜、眼局部炎症反应、眼部手术、眼睑位置异常、服用某些药物、年龄增长及工作环境等都是其发病因素.目前,干眼症的治疗主要是人工泪液替代治疗[2].人工泪液是指能够模仿人体正常泪液,对眼睛起到补充水分、滋润眼表面、营养眼表和视神经的泪液替代品.本文就人工泪液在替代治疗干眼症中的应用情况作一综述.
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密码子优化提高海藻糖合成酶基因在大肠杆菌中的表达水平
目的 优化灰色链霉菌海藻糖合成酶(Trehalose synthase,TreS)基因密码子,提高海藻糖合成酶大肠杆菌基因工程菌株表达水平.方法 基于大肠杆菌基因组密码子偏好数据表对tres基因进行密码子优化得基因tres1.基因工程法构建分别含tres及tres1基因的表达载体pET-26b(+)-tres和pET-26b(+)-tres1,CaCl2法转入大肠杆菌BL21(DE3)获得表达海藻糖合成酶的大肠杆菌基因工程菌株,采用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,对摇瓶发酵粗酶液进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析及酶活性测定以确定表达水平.结果 1707 bp海藻糖合成酶tres基因共优化碱基序列268 bp,优化后序列的GC含量由65.8％降低至54.4％,密码子适应指数(CAI)由0.37提升至0.97,SDS-PAGE及酶活性分析表明,含pet-26b(+)-tres1表达载体的大肠杆菌基因工程菌株海藻糖合成酶蛋白表达量高,酶活性比含pet-26b(+)-tres工程菌提高60.3％ 以上.结论 密码子优化可有效提高海藻糖合成酶TreS蛋白在大肠杆菌中的表达,为海藻糖合成酶的异源高效表达提供了重要参考.
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从面包酵母中提取海藻糖的研究
目的 研究从面包酵母中提取海藻糖.方法 在不同的乙醇浓度、提取温度、提取时间及不同酵母质量浓度下提取海藻糖,测定提取率.用活性炭脱色,阴阳离子交换除杂质和脱色,经浓缩,结晶,干燥,制成海藻糖成品.结果 在乙醇体积分数55%,提取温度(80 ±1)℃,提取时间90 min.酵母质量浓度50 g/L条件下,海藻糖的提取率可达92.51%,制得的海藻糖成品纯度为97.23%.结论 确定了从面包酵母中提取海藻糖的工艺条件.
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海藻糖的安全性
海藻糖是自然界中广泛存在的非还原性双糖,具有独特的生物活性,在食品加工和贮藏、农作物育种、精细化工、化妆品、保健食品和医药等方面的应用越来越广泛.人们在关注其有效性的同时,还应关心它的安全性.本文依据近年来的国内外相关文献,对海藻糖的安全性研究进行综述.
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海藻糖食用的安全性评价
海藻糖为非还原性双糖,由于它是许多有机体能够在干燥环境中无水生活的关键物质,从而成为近年来国际上有关低聚糖的研发热点之一.现将海藻糖饮食毒性的研究进展作一综述.
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海藻糖的生物学特性及在医药领域的研究与应用
海藻糖是自然界中广泛存在的非还原性双糖,化学性质稳定,除了具有低聚糖的一般特性,还有独特的生物学特性.本文依据近年来的国内外相关文献,对海藻糖的生物学特性及在医药领域的研究与应用进行综述.
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海藻糖在化妆品中的应用
海藻糖(α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside),是一种稳定的非还原性双糖,由两个吡喃环葡萄糖分子与1,1-糖昔键连结而成.海藻糖广泛存在于低等植物,藻类、细菌、真菌、昆虫及无脊椎动物中,既是一种贮藏性糖类,又是应激代谢的重要产物.
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海藻糖治疗干眼症的研究进展
眼表泪膜失衡或眼睑异常会引发泪液分泌减少,角膜上皮细胞干燥,眼睛出现疼痛、搔痒、灼伤、异物感等症状,即干眼综合征(主要是Sj(o)gren指综合征),是眼科临床的主要眼表疾病之一.
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海藻糖的应用研究进展
隐生生物(crypohidden life)现象广泛存在于生物界,这类生物在干燥时脱水,以极低或停滞的新陈代谢形式处在一种保存状态,当环境允许再水化时它们可立即复活.
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海藻糖的研究现状及其应用前景
综述海藻糖的理化特性、生物活性、生产制备及应用前景.海藻糖对生物物质具有保护作用.制备方法包括微生物提取法、微生物发酵法、酶合成法和基因工程法等.海藻糖广泛应用于生物药物、食品及化妆品等行业.
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红细胞深低温保存方法的比较研究
探寻可替代甘油并简化复温后洗涤过程的较理想的红细胞低温保护剂,为低温保存红细胞临床应用提供便利.依据血红蛋白溶液浓度与其在波长为412nm处吸光度的关系曲线,建立红细胞回收率评估方法,研究比较了使用5种低温保护剂实现人类红细胞液氮深低温保存效果的优劣.结果表明: 35.5% (w/v)甘油的保存效果佳,其回收率为97.84%; 其次为25% (w/v)右旋糖酐40, 其回收率为85.08%; 再次之为1M海藻糖(加载并孵育17.5h), 其回收率为55.35%; 回收率低的两组为1M海藻糖(未经孵育)和10% (w/v)的二甲亚砜,对应的回收率均不足35%.初步推断:右旋糖酐40是一种可望替代甘油的红细胞低温保护剂.
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海藻糖对过氧化氢诱导 M14黑素瘤细胞氧化损伤的保护作用
目的：：确定海藻糖对过氧化氢诱导的M14黑素瘤细胞损伤的保护作用。方法：不同浓度过氧化氢处理后的M14黑素瘤细胞加入0.5μg/mL、1μg/mL、10μg/mL海藻糖，采用MTT法检测各组细胞存活率，嘌呤氧化酶法检测处理前后超氧化物歧化酶( SOD)的活性。结果：浓度为1μg/mL的海藻糖抗氧化作用明显，可提高低浓度过氧化氢(小于400μmol/L)损伤后的M14黑素瘤细胞存活率约33％，可提高SOD活力约20％。当过氧化氢浓度大于400μmol/L时，各浓度海藻糖对提高细胞存活率无明显作用。结论： 1μg/mL海藻糖对低浓度(小于400μmol/L)过氧化氢诱导的M14黑素瘤细胞损伤具有保护作用。
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一种快速鉴定光滑念珠菌与热带念珠菌的方法
目的:探讨一种快速检测光滑念珠菌与热带念珠菌的方法.方法:试验菌株经API 20、科玛嘉色原法、玉米吐温琼脂鉴定后,并以传统发酵法检测光滑念珠菌、白念珠菌、热带念珠菌发酵海藻糖情况.采用4%海藻糖液孵育各试验株3小时后用尿糖试纸检测.E-test法测试光滑念珠菌对氟康唑、伊曲康唑的敏感性.结果:光滑念珠菌与热带念珠菌皆可发酵海藻糖,尿糖试纸呈阳性反应,但后者菌落在科玛嘉色原培基为蓝色,在米粉吐温琼脂有假菌丝.结论:采用海藻糖法配合米粉吐温琼脂或科玛嘉色原培养基可快速简便鉴定光滑念珠菌和热带念珠菌.
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海藻糖的特性及其应用研究进展
海藻糖是一种非还原性双糖,化学性质非常稳定,并且对生物体和生物大分子具有非特异性保护作用.本文对海藻糖的特性及其应用研究进展进行了简要综述.
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海藻糖作为药用辅料的安全性评价
目的 评价海藻糖作为药用辅料使用的总体安全性.方法 以SD大鼠为试验对象,测定急性经口毒性;以健康白色家兔为试验对象,测定皮肤、眼刺激性;以豚鼠为试验对象,测定皮肤变态反应(致敏)性;以SD大鼠为试验对象,采用肌肉注射的方法进行90 d给药试验,测定长期毒性.结果 在本试验条件下,海藻糖对SD大鼠急性经口毒性为实际无毒,对家兔皮肤、眼睛无刺激性,对豚鼠皮肤的致敏强度为弱致敏物,SD大鼠连续90 d肌肉注射给药试验未观察到海藻糖明显的毒性反应,其无毒作用剂量＞200 mg/kg.结论 海藻糖作为药用辅料,安全性良好.
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基于离子色谱法的海藻糖检测方法研究
目的 建立符合药用辅料检测要求的海藻糖检测分析方法.方法 采用离子色谱高效阴离子交换层析分离与脉冲安培检测器联用技术进行检测.结果 海藻糖与杂质的色谱分离度R＞1.5；检测限为2μg·L-1(S/N=3.5),定量限为10μg·L-1(S/N=13.3);检测线性范围为62.5～10000μg·L-1(进样量25μL,标准曲线Y=0.0026X+0.1265,r=0.9999)；精密度试验RSD=0.42％;回收率为98.09％～100.0％,RSD=0.58％.结论 本文建立的海藻糖检测分析方法达到中国药典对药物检测分析方法的相关要求,可作为海藻糖药用辅料的检测方法.
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海藻糖对液氮保存同种瓣的保护作用
目的探索将海藻糖作为保护剂用于液氮冻存同种瓣.方法10%二甲亚砜+0.1mol·L-1海藻糖(实验组)和单独使用10%二甲亚砜(对照组)作为冷冻保护剂,经程控梯度降温,液氮冻存大鼠的同种瓣6个月后复温,通过电镜、光镜观察和内皮细胞活力测定,对两种保存方法的优劣进行比较.结果实验组的内皮细胞活力明显高于对照组,并且其结构的破坏也较对照组轻.结论10%二甲亚砜+0.1mol·L-1海藻糖作为同种瓣的冷冻保护剂,其保护效果明显好于单独使用10%二甲亚砜.
