首页 > 文献资料
-
血清miR-378和miR-21联合检测对胃癌的诊断价值
目的 探讨血清miR-378和miR-21联合检测对胃癌的临床诊断价值.方法 选择中国医学科学院肿瘤医院经病理确诊的胃癌患者87例,结直肠癌患者78例,健康体检者83例,采用实时荧光定量PCR法检测血清样本中miR-378和miR-21的表达水平(以log2对结果进行转换).结果miR-378在健康对照者、胃癌患者和结直肠癌患者血清中的相对表达水平分别为－1.24、－3.25和－2.73,miR-378在胃癌和结直肠癌患者血清中的相对表达水平明显低于健康对照者(均P＜0.05).miR-21在健康对照者、胃癌患者和结直肠癌患者血清中的相对表达水平分别为0.11、2.34和2.47,miR-21在胃癌和结直肠癌患者血清中的相对表达水平明显高于健康对照者(均P＜0.05).胃癌患者血清中miR-378的低表达与肿瘤的临床分期有关(P＜0.05),分期越晚,下降程度越大;而miR-21在胃癌患者血清中的升高程度与患者的临床病理特征无关(均P＞0.05).血清miR-378诊断胃癌的曲线下面积(AUC)为0.770,灵敏度为82.0％,特异度为66.0％;miR-21诊断胃癌的AUC为0.900,灵敏度为85.0％,特异度为88.0％;miR-378+miR-21诊断胃癌的AUC为0.930,灵敏度为92.0％,特异度为87.0％.CEA+CA-199诊断胃癌的AUC为0.767,CEA+CA-199+miR-378+miR-21诊断胃癌的AUC为0.946.结论 联合检测血清中miR-378和miR-21的表达对胃癌具有一定的诊断效能.
-
microRNA21在人牙周韧带细胞成骨分化中的表达变化
目的：研究微小RNA21（miR21）在人牙周韧带细胞（PDLC）成骨分化早期的表达变化，探讨其对PDLC成骨分化的作用及可能的调控机制。方法培养PDLC，免疫细胞化学染色鉴定其来源。取第3～4代细胞矿化培养7、14、21 d进行碱性磷酸酶（ALP）检测，21 d进行茜素红染色；分别培养4 h和1、3、7 d，实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测miR21、靶基因萌牙2（SPRY2）和Runt相关转录因子2（RUNX2）；Western blot检测磷酸化细胞外调节蛋白激酶（ERK）1／2、磷酸化p38、SPRY2和RUNX2。对照组为正常培养细胞。结果培养的PDLC来源于间充质，7、14、21 d 的ALP活性明显增高（t7 d＝2.707，P7 d＝0.011；t14 d＝8.189，P14 d＝0.001；t21 d＝3.546，P21 d＝0.024），矿化诱导21 d茜素红染色可见矿化结节，具有成骨分化能力；实时荧光定量PCR结果显示，miR21在矿化诱导3、7 d表达上升，SPRY2的表达则呈下降趋势（FmiR21＝14.567，PmiR21＜0.05，FSPRY2＝7.765，PSPRY2＝0.004）；Western blot结果显示，ERK－丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路在矿化诱导第1天始激活，而后稳步上升（t1 d＝14.378，P3 d＜0.05，t3 d＝6.558，P3 d＝0.003，t7 d＝10.685，P7 d＜0.05）；p38 MAPK信号通路活性在诱导4 h时被激活，而后与对照组活性无差异，在第7天时有所升高（t4 h＝18.803，P4 h＜0.05，t7 d＝9.643， P7 d＝0.001）。结论 miR21与PDLC成骨分化相关，其调控机制可能与ERK-MAPK、p38 MAPK信号通路相关；miR21可能靶向SPRY2调控ERK-MAPK信号通路活性，实验结果为进一步研究miR21的功能作用与调控机制提供理论依据。
关键词： 微小RNA21 牙周韧带细胞 成骨分化 丝裂原活化蛋白激酶信号通路 -
苏子油对兔劲动脉粥样硬化模型的微小RNA21和基质金属蛋白酶9基因表达的影响
目的 研究苏子油对兔颈动脉粥样硬化干预作用及微小RNA21(miR-21)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)基因表达的影响.方法 用数字法将50只健康成年新西兰雄性大耳白兔随机分为正常组、模型组、对照组、高剂量及低剂量实验组,各10只.经150 g· d-1高脂饲料喂养和颈动脉球囊损伤术处理建立颈动脉粥样硬化模型.对照组,给予阿托伐他汀钙2.5 mg·(kg·d)-1;低高2个剂量实验组,给予苏子油软胶囊0.15,0.60g·(kg·d)-1;正常组、模型组的动物给予等量0.9％ NaC1灌胃.6周后,用病理图像分析系统观察右颈动脉血管壁(中膜)面积/血管腔面积之比(W/L),用胆固醇氧化酶法检测血清总胆固醇(Tc)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,以磷酸甘油氧化酶法检测血清三酰甘油(TG)水平,用实时荧光定量PCR法检测miR-21、MMP-9基因表达水平.结果 治疗后,正常组、模型组、对照组和高、低2个剂量实验组的右颈动脉血管W/L分别为(1.27 ±0.15),(6.42±o.81),(2.94±0.42),(2.88±0.41),(4.17 ±0.54),与模型组比较,各组动物上述指标差异有统计学意义(P＜0.05);与低剂量组比较,高剂量组和对照组动物右颈动脉血管W/L差异有统计学意义(P＜0.05),且高剂量组和对照组动物右颈动脉血管W/L比较差异无统计学意义(P＞0.05).治疗后,正常组、模型组、对照组和高、低2个剂量实验组的血清TC水平分别为(1.59±0.22),(22.45±3.17),(8.43±1.06),(8.39±1.04),(13.54±1.27)mmol·L-l,TG水平分别为(0.79±0.11),(2.86±0.38),(1.24±0.15),(1.21±0.12),(1.87±0.26) mmol· L-l,LDL-C水平分别为(0.71±0.08),(15.38±2.14),(6.56±0.93),(6.51±0.89),(9.89±1.32)mmol·L-1,与模型组比较,各组动物上述指标水平差异有统计学意义(均P＜0.05);与低剂量组比较,高剂量组和对照组动物血清TC、TG及LDL-C水平差异有统计学意义(均P＜0.05),且高剂量组和对照组动物血清TC、TG及LDL-C水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).治疗后,正常组、模型组、对照组和高、低剂量试验组的miR-21基因表达水平分别为(0.20±0.02),(1.25±0.12),(0.42±0.05),(0.42±0.05),(0.81±0.11),MMP-9基因表达水平为(0.25±0.04),(1.22±0.17),(0.51±0.07),(0.52±0.07),(0.91±0.12),与模型组比较,各组动物上述指标水平差异有统计学意义(P＜0.05),与低剂量组比较,高剂量组和对照组动物miR-21、MMP-9基因表达水平差异有统计学意义(均P＜0.05),且高剂量组和对照组动物miR-21、MMP-9基因表达水平比较无明显差异(P＞0.05).结论 苏子油能够降血脂和抗动脉粥样硬化可能是通过同时抑制miR-21、MMP-9的表达而实现,且作用效果随剂量增大而增强.
-
雷公藤甲素通过调节microRNA21的表达干预K562/A02细胞的化疗敏感性
目的:研究雷公藤甲素对K562/A02细胞多药耐药性的逆转作用,并探讨其机制.方法:四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测雷公藤甲素细胞毒性;采用非毒性浓度雷公藤甲素作用于K562/A02细胞,AnnexinV/PI双标法检测细胞凋亡;荧光定量PCR检测microRNA21表达水平;蛋白印迹法检测Bcl-2蛋白表达水平.microRNA21反义寡核苷酸转染K562/A02细胞,观察细胞增长率,凋亡率和Bcl-2表达的变化.结果:非毒性浓度(5 nmol/L)雷公藤甲素明显增强K562/A02细胞对多柔比星的敏感性,并能增强多柔比星诱导细胞凋亡的作用,使K562/A02细胞平均凋亡率由4.3%明显上升到18.5%(P<0.05);雷公藤甲素作用后,microRNA21和Bcl-2蛋白水平降低;microRNA21反义寡核苷酸转染K562/A02细胞后,降低了Bcl-2表达,提高多柔比星敏感性和多柔比星诱导的细胞凋亡.结论:雷公藤甲素增强K562/A02细胞对多柔比星的敏感性,并诱导其凋亡,可能与下调microRNA21水平有关.
-
肝再生磷酸酶-3-信号传导和转录激活子3-微小RNA21信号通路促进结肠癌细胞增殖侵袭的研究
目的 观察肝再生磷酸酶-3-信号传导和转录激活子3-微小RNA21(PRL-3-STAT3miR-21)信号通路对结肠癌细胞增殖侵袭的作用.方法 构建稳定转染PRL-3基因和空白对照质粒的结肠癌细胞株LoVo-PRL-3和LoVo-VC,用荧光实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测稳转细胞株中miR-21的表达并在瞬时转染PRL-3的SW480及CaCO2细胞中进行验证.用Western blot法对PRL-3调控STAT3的表达进行检测,在LoVo-PRL-3细胞中对STAT3进行RNA干扰,检测miR-21的表达,在稳转细胞株中转染miR-21或对其进行敲除,用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell实验对细胞的增殖侵袭能力的变化进行研究.结果 LoVo-PRL-3细胞在72、96 h的增殖能力以及在Transwell实验24 h后的侵袭能力要强于对照组LoVo-VC细胞(P＜0.01).在结肠癌细胞株LoVo-PRL-3中pSTAT3、miR-21的表达明显上调,干扰STAT3可以抑制miR-21的表达(P＜0.05).在LoVo-VC细胞中过表达miR-21促进了细胞的增殖侵袭(P＜0.01),而在LoVo-PRL-3细胞中敲除miR-21抑制了细胞的增殖侵袭(P＜0.05).结论 PRL-3-STAT3-miR-21信号通路在结肠癌细胞增殖侵袭中起促进作用.
关键词： 肝再生磷酸酶-3 信号传导和转录激活子3 微小RNA21 -
miRNA21/PDCD4环路在卵巢癌组织中的表达
目的 探讨miRNA21/PDCD4环路在卵巢肿瘤中的作用及其临床意义.方法 采用qRT-PCR和Western blot方法检测miRNA21和PDCD4在108例卵巢癌患者、67例交界性病变、75例良性病变和35例正常组织中的表达情况.结果 miRNA21在卵巢癌组织中的表达水平是正常卵巢组织的12.3倍(P＜0.01);在交界性病变组织中的表达水平是正常卵巢组织的7.8倍(P＜0.01);在良性病变组织中的表达水平是正常卵巢组织的3.6倍(P＜0.05).PDCD4蛋白含量在卵巢癌组织中的表达明显低于交界性病变组织,交界性病变组织低于良性病变组织,良性病变组织低于正常卵巢组织,两两相比差异均具有统计学意义(P＜0.05),正常卵巢组织与卵巢癌和交界性病变组织中PDCD4蛋白含量相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论 miRNA21/PDCD4环路异常在卵巢癌发生中具有重要的作用.
关键词： 微小RNA21 程序性细胞死亡因子4 卵巢癌 荧光定量PCR 免疫印迹 -
miRNA21在溃疡性结肠炎患者中表达的意义
目的 研究溃疡性结肠炎患者血清miRNA21的水平,并探讨其在溃疡性结肠炎发展中的意义.方法 选取溃疡性结肠炎患者2 5例及正常对照组20例,采用qRT-PCR方法检测血清miRNA21的水平.结果 溃疡性结肠患者血清miRNA21的水平为1.32+0.24,正常对照组血清miRNA21的水平为1.11±0.17.溃疡性结肠组有轻度升高,且差异有统计学意义(P＜0.05).结论 溃疡性结肠炎患者血清miRNA21的表达上调,可能为溃疡性结肠炎的治疗及临床诊断提供新的方向.
-
循环miRNA21在肝细胞癌早期诊断中的价值
目的 探讨血浆中miRNA21作为肝细胞癌早期生物标志物的诊断价值.方法采用定量RT-PCR(quantitative RT-PCR)检测55例肝细胞癌患者、60例慢性肝炎患者、50例健康对照者血浆中miRNA21的表达水平.结果 血浆miRNA21在肝细胞癌组中水平显著高于慢性乙肝组(P<0.01)和健康对照组(P<0.01).通过绘制受试者工作曲线(receiver-operator characteristic curve,ROC curve)分析,miRNA21作为肝细胞癌和慢性乙肝的诊断标志物,其诊断价值分别为:灵敏度(65%),特异度(85%),受试者工作曲线下面积(AUC)为0.771,而miRNA21作为肝细胞癌和健康对照者的诊断标志物,其诊断价值分别为:灵敏度(89%),特异度(95%),AUC为0.956.结论 miRNA21是肝细胞癌潜在的早期诊断标志物.
