首页 > 文献资料
-
糖原累积症Ⅰa型-纯合G727T突变患儿的表型分析
目的对临床诊断为糖原累积症Ⅰa型的患儿及其父母进行葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)的基因突变筛查,并对基因突变完全相同的患儿进行临床特点的比较分析.方法提取患儿及其父母外周血DNA,分别进行G6Pase基因五个外显子的PCR扩增,纯化后进行DNA直接测序;对基因突变相同的6家系7例患儿进行临床表现、生化改变及对治疗反应的比较分析.结果所有7例患儿均为G6Pase 基因外显子5核苷酸位点第727处纯合子型G→T的单个碱基突变(G727T),而其父母均为此杂合突变的携带者.基因突变完全相同的7例患儿临床表现的严重性、对治疗的反应不全相同,除经典的低血糖、生长发育落后、肝脏肿大、肾脏肿大、代谢性酸中毒和乳酸血症外,尚有脾大(1例),轻度肝功能受损(6例),多发肝腺瘤(1例)等.结论 G727T突变很可能是中国人种糖原累积症Ⅰa型的较常见突变;具有相同突变的患儿不仅临床表现轻重不同,而且,对生玉米淀粉治疗的反应也各有差异;通过典型的临床及生化表现辅以外周血基因分析,完全可以取代传统的有创伤性肝穿刺酶学分析的确诊方法.
-
抗糖尿病药物的靶标--葡糖-6-磷酸易位酶
根据目前了解的糖代谢途径以及现有药物的治疗特点,针对肝脏产糖的两条途径,即糖异生和糖原分解,以葡糖-6-磷酸酶为作用靶点,可以同时抑制两条产糖途径,而不必考虑这两条途径之间有何相互影响.围绕此靶点设计的一些抑制剂,包括催化亚单位抑制剂以及T1易位酶抑制剂,其中以T1易位酶抑制剂效果比较好,有较强的特异性.同时总结了T1易位酶抑制剂治疗潜力和治疗顺应性.
-
人脂联素基因的原核表达、纯化及活性检测
目的:在大肠杆菌中表达具有活性的重组人脂联素蛋白.方法:利用PCR技术扩增人脂联素基因完全编码序列,选用Gateway原核表达体系,经过BP反应、LR反应两步反应,将PCR产物克隆入pET-DEST42质粒,构建融合表达载体pET-DEST42/attB-adiponectin,转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达脂联素融合蛋白,经镍柱亲和层析纯化,NDSB201高效复性后,使重组蛋白作用于体外培养的肝细胞,RT-PCR法检测重组脂联素对肝细胞葡萄糖-6-磷酸酶转录水平的影响.结果:成功构建了表达载体pET-DEST42/attBadiponectin,DNA序列测定结果与预期一致.IPTG诱导表达的融合蛋白经纯化后Western Blot鉴定具有人脂联素抗原性,并可使培养的肝细胞中葡萄糖-6-磷酸酶转录水平下降.结论:获得具有生物学活性的重组人脂联素为进一步研究脂联素的生理机制奠定了基础.
-
栎精对葡萄糖-6-磷酸酶基因表达及活性的影响
目的:探讨栎精对葡萄糖-6-磷酸酶基因表达及活性的影响.方法:将原代培养的大鼠肝细胞在含有25mmol/L的葡萄糖和不同浓度的栎精培养16 h后提取RNA,以半定量RT-PCR方法检测葡萄糖-6-磷酸酶的催化亚基(G6PC)和转运亚基(G6PT)的mRNA水平,并应用葡萄糖双脱氢酶偶联法测定葡萄糖-6-磷酸酶的活性.结果:25mmol/L葡萄糖能够使G6PC和G6PT的mRNA水平升高2倍左右(P＜0.05),不同浓度的栎精可抑制G6PC和G6PT的转录及酶的活性.结论:栎精能够抑制体外葡萄糖-6-磷酸酶基因的表达及其活性.
-
葡萄糖和木糖醇对葡萄糖6磷酸酶基因表达的调节作用
目的:探讨葡萄糖以及木糖醇对葡萄糖6磷酸酶基因的表达调控机制.方法:将原代培养的大鼠肝细胞在不同浓度葡萄糖和木糖醇的培养液中培养4 h后提取RNA,以半定量RT-PCR方法检测细胞葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基(G6PC)和6磷酸葡萄糖转运亚基(G6PT)的mRNA水平.结果:高浓度的葡萄糖可使肝细胞G6PC和G6PT的mRNA水平升高.25 mmol/L的葡萄糖能够使G6PC和G6PT的mRNA升高2倍以上(P＜0.05).小剂量的木糖醇能够促进G6PC和G6PT的转录,当木糖醇浓度＞5 mmol/L时这种促进作用逐渐消失甚至表现为抑制作用.结论:葡萄糖能够明显的促进葡萄糖6磷酸酶基因的转录,该酶在糖尿病的发生发展中起着重要的作用.
-
二甲双胍对糖尿病大鼠肝脏葡萄糖-6-磷酸酶表达的影响
目的:探讨二甲双胍抑制肝糖输出,减轻肝脏胰岛素抵抗的分子学机制.方法:建立糖尿病大鼠模型并将之分为正常对照组、糖尿病组、低剂量二甲双胍干预组、高剂量二甲双胍干预组,饲养2周后取出肝脏,以半定量RT-PCR方法测定肝脏葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)mRNA的表达,蒽酮比色法测定肝脏糖原含量.结果:(1)糖尿病组肝脏G6Pase催化亚基(P36)及转运亚基(P46)mRNA的灰度高于正常对照组(P＜0.05),而肝脏糖原含量低于正常对照组(P＜0.05).(2)二甲双胍可以明显减少肝脏G6Pase mRNA表达并增加肝糖原含量(P＜0.05),且呈剂量依赖性.结论:二甲双胍能够抑制糖尿病状态下肝脏G6Pase催化亚基及转运亚基mRNA表达,使得6-磷酸葡萄糖向葡萄糖的转化减少,从而减少肝糖输出,达到减轻胰岛素抵抗的作用.
-
生玉米淀粉治疗肝糖原累积病并发严重痛风性关节炎一例
为探讨肝糖原累积病的临床特征及诊治策略,本文回顾性分析了本院2011-03-18收治的1例并发严重痛风性关节炎的肝糖原累积病患者的临床资料.患者为20岁男性,以多发肢体关节剧烈疼痛为主要症状就诊,经常鼻出血.实验室检查发现血尿酸水平明显升高、空腹血糖水平降低、三酰甘油水平升高、肝功能异常等;腹部B超及上腹部CT检查示肝弥漫性病变不伴脾肿大;空腹肾上腺刺激试验阳性.给予患者以生玉米淀粉悬液为主要的营养治疗后,其一般情况改善,关节肿痛好转,各项代谢指标好转,肝脏体积逐渐恢复正常,体质量及身高增加,治疗效果明显.
-
血清中6-磷酸葡萄糖异构酶抗原升高在类风湿关节炎中的意义探讨
目的评估葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase,GPI)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)发病中的意义.方法用酶联免疫吸附试验(DLISA)双抗体夹心法检测100例RA病人、98例其他风湿性疾病病人和108名健康体检者的血清中的GPI浓度,RA病人还检测了抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)和C反应蛋白(CRP)的浓度.结果 RA病人中GPI的浓度为(2.4±5.0)μg/ml,正常对照组为(0.12±0.14)μml(P＜0.01),其他风湿病组为(0.12±0.08)μg/ml(P＜0.01),GPI的浓度在RA活动组和非活动组差异有统计学意义(P＜0.01);RA组23%的病人浓度高于2μg/ml.经过Logistic回归分析发现GPI的浓度与RA病人的关节肿、疼痛成正相关.结论 GPI在部分RA病人,尤其在活动期的RA病人血清中异常升高,可以作为RA临床诊断和评估的实验室指标.
-
以痛风肌炎为临床表现的糖原累积症三例及文献复习
目的 探讨糖原累积症的临床特征、诊断和鉴别诊断.方法 分析3例糖原累积症患者的临床表现、实验室检查、影像学以及病理活检结果并进行相关文献复习.结果 3例患者中男性1例,女性2例,年龄21～37岁,平均27岁;病程0.5～22年,其中1例表现为继发性痛风,2例类似多肌炎;2例患者有高尿酸血症、高脂血症和肝肿大,肝活检显示脂肪变性和糖原累积;1例患者有心脏传导阻滞、突发性呼吸衰竭和明确家族史,α-1,4糖苷酶活性检测显著低于正常值,血乳酸水平显著高于正常值上限,肌肉活检糖原染色阳性.结论 糖原累积症主要症状群中包括关节肌肉方面的表现,对于一些初诊为痛风或炎性肌病的非寻常患者,应仔细了解家族史,并对血液、活检标本等行相关特异性检查,如特定酶的活性测定和糖原染色等以免误诊.
-
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症患儿烧伤12例治疗体会
小儿烧伤约占总烧伤发生率的1/3,致伤原因多为生活烧伤.由于小儿生长发育过程中解剖、生理未臻成熟,伤后对疾病的耐受性较差,特别是葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏的患儿,因并发溶血易致严重贫血、心律失常、循环衰竭及肾功能衰竭等,且创面外用药物的选择也有所受限,病情较为特殊、严重,治疗也更为繁杂.2004年4月-2010年2月,笔者医院收治G-6-PD缺乏症烧伤患儿12例,现回顾其治疗情况并报道如下.
-
华蟾素对H22荷瘤小鼠肝癌细胞Mg2+-ATP酶、葡萄糖-6-磷酸酶活性的影响
应用小鼠H22肝癌细胞悬液制作H22荷瘤小鼠腹水瘤模型,分别腹腔注射华蟾素、氟脲嘧啶(5-Fu)、生理盐水,计算肿瘤抑制率,观察肝癌细胞酶活性的变化.结果 华蟾素组和5-Fu组的肿瘤抑制率分别是35.8%和40.7%,细胞质膜标志酶Mg2+-ATP酶(Mg2+-ATPase)、内质网标志酶葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)反应颗粒变小,数量减少,密度变低,酶活性明显下降.表明华蟾素可降低H22荷瘤小鼠肝癌细胞Mg2+-ATPase及G-6-Pase的活性,抑制肿瘤细胞生长.
关键词： 肿瘤 华蟾素 Ca2+Mg2+-ATP酶 葡糖-6-磷酸酶 -
全自动生化分析仪双速率法检测G6PD的探讨
用性强的检测方法,值得应用推广.
