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HBV-DNA荧光定量检测的临床意义
HBV的临床检测从免疫学方法到分子生物学方法是一个重大进步,分子生物学检测经历了早期的PCR凝胶电泳法、半定量法到现在的各种完全定量法.HBVDNA定量检测方法的出现从根本上突破了免疫学方法的间接检测的局限性,通过直接检测病毒的核酸水平真实地反映病毒的情况,从而对于HBV的准确诊断、有效治疗、精确预后及新药研制等各个方面具有重大意义.
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乙肝病毒cccDNA检测方法研究进展以及临床意义
共价闭合环状 DNA(cccDNA)的形成是乙肝病毒侵入肝细胞后,乙肝病毒在肝细胞内进行复制的起始步骤。早期肝组织乙肝病毒共价闭合环状 DNA 检测因操作繁琐、取材困难,不适宜普遍开展。因此通过了解细胞内乙肝病毒共价闭合环状 DNA 的相关特点以及各种定性与定量检测方法的应用对深入研究乙肝病毒致病机制以及评价药物疗效方面将发挥重要的作用。首先概述了乙肝病毒共价闭合环状DNA 的理化特点,重点阐述了乙肝病毒共价闭合环状 DNA 的定性定量检测方法及临床意义。
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人绒毛膜促性腺激素(HCG)定量检测方法的探讨
1临床资料1.1 资料:A组2009年2月23日至2009年10月1日检测1271人;B组2010年6月1日至2010年12月19日检测1771人.1.2材料:早孕试纸(蓝梦孕知),HCG试剂盒,安图生物工程有限公司.化学发光法(双抗体夹心法),校准品6个,分别为10、25、50、100、500、1000mIU/ml.检验原理:采用双抗体夹心法,即在化学发光微孔板上包被抗HCG单克隆抗体,在微孔板各孔中分别加入标准品、血清样本后,再加入另一株抗HCG单克隆抗体的酶结合物,则标准品、需血清样本中所含的HCG将会与之形成抗体-抗原-抗体-酶结合物.洗去未结合的标记物后,加入化学发光底物,其发光强度与HCG含量成正比.
关键词: 人绒毛膜促性腺激素(HCG) 定量检测方法 -
美托洛尔联合参松养心胶囊对室性期前收缩患者心率变异性的研究
心率变异性(HRV)是反映交感神经与副交感神经张力及其平衡性的无创性定量检测方法[1].本文探讨美托洛尔联合参松养心胶囊对室性期前收缩患者心率变异性的影响.
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不同方法检测血清HBV DNA水平的比较
目前,检测慢性乙型病毒性肝炎血清或血浆病毒的几种分子生物学技术均建立在靶序列或者信号扩增的基础之上,如Quantiplex HBV DNA(bDNA)技术即是基于分支链DNA技术的信号扩增,而COBAS Amplicor则是基于引物特异的靶序列扩增.其他尚有基于核苷酸交联技术的定量检测方法也为实验室所常用.然而以上方法对于开展临床大规模检测来说成本昂贵,不适用于经济不发达地区.实时定量PCR方法因其灵敏度高、检测范围宽、定量值准确、成本低而为临床检测所常用.本研究采用两种实时定量PCR(LightCycler及Mx3000p)方法进行HBV DNA定量检测,同时与COBAS Amplicor方法进行对照.
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重组人源细胞珠蛋白单抗制备及检测方法建立
目的 制备重组人源细胞珠蛋白(recombinant human Cytoglobin,rhCygb)单克隆抗体,并建立检测该蛋白双抗体夹心ELISA法,为下一步研究rhCygb药代动力学做准备.方法 用纯化的rhCygb免疫BALB/c小鼠,采用甲基纤维素半固体培养基法获得抗rhCygb的单克隆抗体杂交瘤细胞,间接ELISA法筛选制备单克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA法.结果 筛选获取了稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过抗原表位相加法实验获得5株表位不同的细胞株,Westem-blotting验证能与rhCygb特异性结合,间接ELISA法验证其不与本实验室制备的其它PET28a-BL21蛋白及BL21裂解液发生交叉反应.本方法 灵敏度为1.25ng/ml,在浓度为10~1250 ng/ml时,线性关系良好,相关性达0.9931,实验内和实验间平均变异系数分别为6.2%和10.92%.结论 成功建立了灵敏度好、特异性高的双抗体夹心法,为下一步研究rhCygb药代动力学奠定了基础.
关键词: 重组人源细胞珠蛋白 单克隆抗体 ELISA双抗体夹心法 定量检测方法