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MK及VEGF在子宫内膜癌中的表达及其临床意义
目的:探讨血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)和中期因子(Midkine,MK)在子宫内膜癌中的表达及其临床意义.方法:选取子宫内膜癌患者60例作为研究组,选取同期子宫纵膈、子宫肌瘤患者60例作为对照组.分别采用荧光定量PCR法和免疫组化法检测并比较两组不同临床分期患者的MK和VEGF的基因水平和蛋白表达阳性率.结果:研究组MK和VEGF的mRNA水平和蛋白表达阳性率均明显高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);MK和VEGF蛋白表达阳性率随着患者临床分期增加逐渐增大,且临床III期患者的MK和VEGF蛋白表达阳性率均明显大于临床I期患者.结论:MK和VEGF在子宫内膜癌患者呈高表达,且其蛋白水平与临床分期关系密切,该指标可作为子宫内膜癌诊断和预后评估的重要依据.
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中期因子在食管癌中的表达及其意义
目的:研究中期因子(midkine,MK)蛋白在食管癌中的表达情况,并探讨MK与其生物学行为的关系.方法:采用免疫组织化学S-P法,检测45例食管癌患者手术切除标本、10例正常食管黏膜组织及配对癌旁组织MK蛋白的表达情况.结果:MK在食管癌中为高表达(表达率为77.8%),与食管癌的组织分化程度、癌组织浸润深度有统计学意义上的相关性,而与肿瘤部位及淋巴结转移无统计学意义上的相关性.结论:MK与食管癌的形成及肿瘤分化程度、浸润深度有关.
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MK对人脐静脉内皮细胞增殖及迁移的影响
目的 通过研究midkine(MK)蛋白对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移的影响,阐明MK蛋白在血管生成中的作用.方法 选择HUVEC为研究对象进行细胞常规培养,分为5组分别给予不同浓度MK进行干预,实验组MK浓度分别为0.5、5、50和500 ng/ml,以未处理组作为对照组.利用CCK-8试剂盒检测MK对HUVEC增殖能力的影响,利用Transwell技术检测MK对HUVEC迁移能力的影响.结果 与对照组相比,5 ng/ml的MK作用24h和48 h可以促进细胞增殖,差异有统计学意义(P＜0.05);5 ng/ml的MK作用24 h可以促进细胞迁移,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 一定浓度的MK作用于内皮细胞,可以促进其增殖和迁移,提示MK在血管生成中具有重要作用.
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乳腺导管内乳头状瘤和乳腺浸润性导管癌中MK、VEGF表达研究
目的:探讨中期因子(MK)和血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺导管上皮癌变过程中的调控作用,乳腺导管内乳头状瘤(IDP)的生物学特性及乳腺浸润性导管癌与IDP之间可能存在的关系.方法:采用免疫组织化学S-P法.检测80例乳腺浸润性导管癌及35例IDP石蜡标本中VEGF、MK的表达水平.结果:(1)MK及VEGF在正常乳腺导管上皮细胞中均呈阴性表达,而在IDP和乳腺浸润性导管癌组织中呈阳性表达,二者在乳腺浸润性导管癌组织中表达阳性率明显高于IDP(P<0.01).(2)MK及VEGF表达在在IDP和乳腺导管浸润癌中呈显著正相关(P<0.01).结论:(1)MK及VEGF在正常乳腺导管上皮细胞、导管内乳头状瘤、及乳腺浸润性导管癌中阳性表达率均逐渐增高,提示二者在IDP及浸润性导管癌的发生中可能起着一定作用,并可促进其发展.(2)导管内乳头状瘤可能是一个重要的乳腺癌前病变时期,应引起临床工作者的重视.
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血清MK和Th17/调节性T细胞对类风湿关节炎患者病情发生发展的影响
目的 观察辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Terg)免疫失衡在来风湿关节炎患者发病时的作用,探讨血清中期因子(MK)和Th17/调节性T细胞对类风湿关节炎患者病情发生发展的影响.方法 选取2013年3月~2016年1月在我院接受治疗的类风湿关节炎患者58例,分为活动组和非活动组,DAS28≤3.2为非活动组,DAS28>3.2为活动组,另将30例健康患者作为对照组,活动组患者32例,非活动组患者26例,采用酶联免疫吸附法对3组患者的血清MK、白介素-17(IL-17)、白介素-6(IL-6)、白介素-23(IL-23)水平进行检测,利用流式细胞术检测调节性T细胞和外周血Th17细胞的比例变化,并对其比例变化和血清MK、IL-17、IL-6、IL-23的水平进行比较.结果 活动组Th17、调节性T细胞比例分别与非活动组相比较差异具有统计学意义(P<0.05),活动组与非活动组的Th17、调节性T细胞比例分别与对照组相比较异具有统计学意义(P<0.05).活动组与非活动组的IL-17、IL-6和IL-23水平分别与对照组相比较异具有统计学意义(P<0.05).血清MK与Th17、T细胞的百分比和平衡相关的相关性结果显示,Th17和Treg均与血清MK无关,P>0.05,而与STAT5成负相关(P<0.05).结论 类风湿性关节炎患者的血清MK上升,且类风湿性关节炎患者Th17/Terg平衡中Th17相对增高,而Terg会相对降低,MK的上升和Th17/Terg平衡失调都促进了RA的发生发展.
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MKmRNA在人乳腺癌组织中的表达
目的 探讨Midkine(MK)mRNA在乳腺癌组织中的表达.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)技术检测6例乳腺浸润性导管癌组织及相应癌旁正常组织中MK的表达情况.结果6例乳腺癌组织均表达MKmRNA(表达率为100%),而6例癌旁正常组织除1例有较弱的MK mRNA表达外,其余5例表达阴性(表达率16.7%).结论MK基因高频率、高程度地表达于乳腺癌组织中.
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MK-EGFP融合蛋白在人肝癌细胞Hep-G2中的核定位
目的 构建MK-EGFP真核表达质粒,研究该融合蛋白在肝癌细胞株Hep-G2中的定位.方法 RT-PCR技术扩增MK编码基因.克隆到真核表达载体pEGFP-N2中,重组质粒pMK-EGFP转染肝癌细胞Hep-G2,显微镜下实时追踪观察融合蛋白的胞内表达与定位.结果 成功构建表达质粒pMK-EGFP,真核转染后,在宿主细胞内发生核定位,融合蛋白在核仁区富集.结论 转染产生的MK-EGFP融合蛋白在人肝癌细胞Hep-G2中大量表达,并发生明显的核定位现象.
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子宫内膜异位症患者腹腔液中MK和VEGF的表达
[目的]探讨中期因子(midkine,MK)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)发病中的作用.[方法]采用双抗体夹心酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测36例不同程度EMT患者(实验组:Ⅰ～Ⅱ期4例为轻度组,Ⅲ～Ⅳ期32例为重度组)及17例非EMT患者(对照组)腹腔液(peritoneal fluid,PF)中MK、VEGF的浓度.[结果]MK水平重度组明显高于对照组(P＜0.05),而轻、重度组间差异无统计学意义(P＞ 0.05);VEGF水平重度组明显高于对照组、轻度组(P＜ 0.01,P＜ 0.05).实验组MK水平分泌期明显高于增生期(P＜0.05),而对照组差异无统计学意义(P＞0.05);对照组和实验组VEGF水平增生期和分泌期差异均无统计学意义(P＞0.05).实验组MK与VEGF的表达呈具有显著意义的正相关(r=0.525,P＜ 0.05).[结论]EMT患者PF中MK、VEGF水平升高,提示二者可能共同参与了EMT的发生发展.
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干扰人乳腺癌MDA-MB-231细胞 MK表达对内皮细胞增殖、迁移及脉管形成的影响
目的：观察干扰乳腺癌MDA-MB-231细胞中期因子( midkine, MK)表达对内皮细胞的增殖、迁移、脉管形成能力的变化,分析MK在肿瘤血管形成中的作用。方法采用shRNA法降低人乳腺癌MDA-MB-231细胞MK的表达,通过RT-PCR及Western blot法检测MK干扰效果,实验分为MK干扰组、空载体组及对照组；采用制备肿瘤条件培养基模拟肿瘤微环境培养HUVECs细胞,通过CCK-8法检测各组内皮细胞增殖能力、Transwell小室检测内皮细胞迁移能力、Matrigel检测内皮细胞脉管形成能力。结果与对照组及空载体组相比,MK干扰组细胞的增殖、迁移及脉管形成能力均明显降低(P<0．05)。结论干扰乳腺癌MDA-MB-231细胞MK的表达可抑制内皮细胞增殖、迁移、脉管形成能力,提示MK可能在肿瘤血管形成中起重要作用。
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子宫颈鳞癌中MK、p63α的表达及临床意义
目的 探讨MK、p63α在正常子宫颈鳞状上皮和子宫颈鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)组织中的表达及其意义.方法 采用免疫组化SP法检测30例正常子宫颈鳞状上皮和98例子宫颈SCC组织中MK、p63仅的表达,并分析两者表达的相关性及与临床病理特征、预后的关系.结果 MK在正常子宫颈鳞状上皮组织中几乎不表达,在子宫颈SCC组织中的高表达率与低表达率分别为28.6％和38.8％;p63α在正常子宫颈鳞状上皮组织中高表达率与低表达率分别为73.3％和16.7％,在子宫颈SCC组织中高表达率与低表达率分别为34.7％和45.9％,差异有统计学意义(P＜0.01).p63α和MK在子宫颈SCC组织中的表达呈负相关(rs=-0.372,P＜0.01);p63α和MK表达与患者年龄、肿瘤直径和组织分化有相关性(P＜0.05),与临床分期、淋巴结转移无相关性(P＞0.05).MK高表达患者的生存期显著低于阴性患者;p63α阴性患者生存率显著低于高表达患者.结论 MK、p63α表达与子宫颈癌的发生、发展密切相关,联合检测两者有助于子宫颈癌预后的判断.
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胃癌患者血清MK和VEGF表达及其临床意义的研究
目的 检测胃癌患者血清中中期因子(MK)与血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达,探讨MK和VEGF在胃癌中的关系.方法 采用酶联免疫吸附法检测59例胃癌患者血清中MK和VEGF的表达情况,并与20例胃炎和20例健康人群对照.结果 胃癌患者外周血中MK、VEGE的阳性表达率均高于对照组,且MK和VEGF在胃癌血清中的表达呈正相关.结论 MK和VEGE在胃癌的发生、发展中起到重要作用,并且两者可能存在一定的协同作用,共同检测可能对于胃癌的治疗和预测预后有重要价值.
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Midkine在食管鳞癌中的表达及其与微血管密度的关系
目的研究MK在食管鳞癌中的表达及与肿瘤血管形成的关系.方法采用免疫组织化学SP法检测45例食管鳞癌组织中MK的表达,同时以CD34标记微血管内皮细胞测定微血管密度(microvessel density,MVD).结果 45例食管鳞癌组织中MK阳性表达率为77.8%,MK阳性的食管鳞癌组织MVD为40.43±6.27,MK阴性的食管鳞癌组织MVD为31.34±3.89 ,两者有显著性差异(P＜0.01).结论 MK在食管鳞癌中高表达并与血管形成有关.
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Midkine与肿瘤关系的研究进展
0 前言Midkine(MK)是1988年Kadomatsu等用差异杂交的方法在视黄酸诱导的小鼠胚胎肿瘤细胞系HM-1细胞cDNA文库中筛选出的一种新基因.它与PTN(多效营养因子,又称肝素结合相关因子)基因结构很相似,共同组成MK家族.
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血清 VEGF、MMP 及 MK 与胃癌术后复发转移的关系研究
目的：：研究及探讨血清 VEGF、MMP 及 MK 与胃癌术后复发转移的关系.方法：选取2012年1月~2015年6月于本院进行诊治的78例胃癌术后复发转移患者为 A 组,同时期未发生复发转移78例患者为 B 组,78名健康人员为 C 组,然后将3组的血清 VEGF、MMP 及 MK 水平进行比较,并比较 A组中局部复发、区域淋巴结转移和远处转移者的检测水平,并与 Logistic 分析血清 VEGF、MMP 及 MK与胃癌术后复发转移的关系.结果：A 组的血清 VEGF、MMP 及 MK 指标均高于 B 组及 C 组,均 P ＜0．05；而 B 组与 C 组之间则无明显差异,均 P ＞0．05；同时 A 组中区域淋巴结转移和远处转移者的检测水平高于局部复发者,均 P ＜0．05；经 Logistic 分析显示,上述指标均与胃癌术后复发转移有密切的关系.结论：胃癌术后复发转移患者的血清血清 VEGF、MMP 及 MK 呈现高表达状态,上述指标均与本病有密切的关系.
