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活血通络组方对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能恢复及其抗凋亡机制研究
目的:探讨活血通络组方对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能恢复及其抗凋亡机制研究.方法:大脑中动脉闭塞再通法建立脑缺血再灌沣模型,采用神经行为学评分评价神经功能的恢复,跳台法测试大鼠学习和记忆成绩,原位术端标记法检测凋亡神经元,用免疫组化法检测Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)、凋亡蛋白酶(caspase-8、caspase-3)阳性细胞数.结果:与模型组比较,活血通络组的学习和记忆成绩均优于模型组,神经功能损伤评分亦有明显降低,神经元凋亡指数(AI)、FADD、caspase-8、caspase-3阳性细胞数均显著减少.结论:FADD、caspase-8、caspase-3在脑缺血再灌注后细胞凋亡过程中发挥重要作用,活血通络组方能减轻脑缺血再灌注后神经功能损伤,其机制可能与抑制细胞凋亡死亡受体通路有关.
关键词： 脑缺血再灌注 神经功能 Fas相关死亡结构域蛋白 凋亡蛋白酶 活血通络组方 -
Fas相关死亡结构域蛋白荧光真核表达载体的构建及其鉴定
目的: 构建真核表达载体pEGFP-N1-FADD并检测其在结肠癌细胞株SW480中的表达.方法: 设计人FADD特异性引物, 从人结肠癌细胞SW480细胞提取总RNA, 通过RT-PCR方法获取人FADD全长cDNA, 定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1. 应用PCR、酶切和DNA测序进行鉴定, 确认后转染人结肠癌细胞SW480.G418抗性筛选获得FADD稳定表达细胞克隆,应用Western blot检测FADD的表达水平.结果: 测序及酶切鉴定证明获得人全长FADD基因, FADD基因正确插入pEGFP-N1中, 在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白在SW480细胞中的稳定表达, Western blot检测结果显示稳定转染pEGFP-N1-FADD的细胞FADD表达水平增高, 是未转染细胞的2.34倍.结论: 成功构建真核表达载体pEGF P-N1-FADD, 并且在SW480细胞中稳定表达.
关键词： Fas相关死亡结构域蛋白 真核表达 绿色荧光蛋白 稳定转染 -
Fas相关死亡结构域蛋白在乳腺癌中表达的临床病理研究
目的 探讨Fas相关死亡结构域蛋白在乳腺癌中表达的临床病理特点.方法 选择2013年2月～2017年2月我院收治的行乳腺肿瘤手术治疗患者的人体石蜡包埋组织标本148例,其中乳腺良性病变26例(A组),无淋巴结转移乳腺癌58例(B组),淋巴结转移乳腺癌64例(C组).所有标本均实施免疫组化检查,分析Fas相关死亡结构域蛋白表达.结果 Fas相关死亡结构域蛋白表达于乳腺癌癌细胞胞浆内和乳腺良性病变上皮细胞内.B组中Fas相关死亡结构域蛋白表达较弱,染色范围较小,染色深度均较低;A组、C组中Fas相关死亡结构域蛋白表达较弱,染色深度强.A、B、C三组Fas相关死亡结构域蛋白阳性表达率分别为88.5％ (23/26)、46.6％ (27/58)、65.6％(42/64),A组高于B组、C组,差异有统计学意义(P＜0.05).在乳腺癌患者中,淋巴结转移、确诊年龄与Fas相关死亡结构域蛋白表达有关(P＜0.05),但临床分期、组织学类型与Fas相关死亡结构域蛋白表达无关(P＞0.05).结论 Fas相关死亡结构域蛋白与乳腺癌淋巴结转移、确诊年龄有着密切的关系,但与临床分期、组织学类型无关,需引起高度关注.
关键词： Fas相关死亡结构域蛋白 乳腺癌 淋巴结转移 临床病理 -
FADD与恶性肿瘤的关系
FADD是Fas系统的一个信号连接蛋白,是死亡受体与胞浆成分之间联系的纽带,介导细胞凋亡.恶性转化的肿瘤细胞是因为生长失控导致的过度增殖,肿瘤细胞凋亡机制受到抑制而导致肿瘤细胞不能进行正常凋亡并且清除.FADD作为凋亡信号的连接蛋白,在恶性肿瘤的发生、发展过程中起着重要的作用,现就FADD与恶性肿瘤的关系进行综述.
关键词： Fas相关死亡结构域蛋白 细胞凋亡 恶性肿瘤 -
Fas相关死亡结构域蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及其与癌细胞凋亡的关系
目的 研究Fas相关死亡结构域(FADD)蛋白在膀胱移行细胞癌(TCCB)中的表达,并探讨其与TCCB中癌细胞凋亡的关系.方法 采用免疫组化方法SP法检测68例TCCB及13例正常膀胱黏膜组织FADD蛋白表达.原位末端标记(TUNEL)法检测TCCB细胞的凋亡.结果 正常膀胱黏膜FADD呈阳性表达,在TCCB Ⅰ级(G1)、Ⅱ级(G2)、Ⅲ级(G3)和浅表性(Tis～T1)、浸润性(T2～T4)肿瘤的阳性表达率分别为84.6%、48.3%、19.2%和65.6%、25.0%;FADD的阳性率在3组不同组织学分级的TCCB中差异有显著性意义(P＜0.05),在两组不同临床分期的TCCB中差异有非常显著性意义(P＜0.01),在复发组与未复发组分别为36.8%和53.3%,差异无显著性意义(P＞0.05).所有标本均可检测到细胞的凋亡,FADD蛋白表达水平与癌细胞凋亡程度呈显著正相关(rs=0.49,P＜0.01).结论 FADD表达异常在TCCB的发展中可能起着重要作用,FADD表述水平与TCCB细胞凋亡密切相关.
关键词： Fas相关死亡结构域蛋白 膀胱肿瘤 免疫组织化学 细胞凋亡 -
虎纹捕鸟蛛毒素对脑缺血模型大鼠海马肿瘤坏死因子凋亡通路的影响
背景：虎纹捕鸟蛛毒素经离子通道分析技术证明是一种作用于突触前膜的N型钙离子通道阻断剂。目的：观察新型钙通道拮抗剂虎纹捕鸟蛛毒素对全脑缺血再灌注损伤模型大鼠海马组织肿瘤坏死因子凋亡通路中肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体Ⅰ、肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域、Fas相关死亡结构域蛋白、Caspase 8表达的影响。方法：采用Pulsinel i“四血管阻断法”构建全脑缺血结合蛛网膜下腔置管大鼠模型，通过留置的PE10管注入虎纹捕鸟蛛毒素或生理盐水。应用电镜、RT-PCR实验技术检测全脑缺血再灌注损伤大鼠海马CA1区锥体细胞超微结构和胞内线粒体形态变化及对海马组织中肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体Ⅰ、肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域、Fas相关死亡结构域蛋白、Caspase 8等肿瘤坏死因子凋亡通路相关因子基因表达。结果与结论：虎纹捕鸟蛛毒素能维持全脑缺血再灌注脑损伤大鼠线粒体基本形态且能不同程度降低肿瘤坏死因子凋亡通路中促凋亡因子肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体Ⅰ、肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域、Fas相关死亡结构域蛋白、Caspase 8 mRNA表达。提示天然活性多肽虎纹捕鸟蛛毒素作为一种新型N-型电压依赖性钙通道阻断剂，能有效阻断胞外Ca2+的大量内流，使细胞内游离钙降低，减少由于细胞内钙超载而引起的一系列病理损害，从而保护神经细胞，减轻缺血缺氧海马神经细胞的损伤。
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FADD研究进展
FADD是Fas系统的一个信号连接蛋白,是死亡受体与胞浆成分之间联系的纽带,可将膜表面受体与胞浆中细胞凋亡的终末酶联接起来,从而向胞内传递凋亡信号,介导细胞凋亡,与多种疾病过程有关.同时,FADD在T细胞增殖中也起一定的作用.现就有关FADD与细胞凋亡、T细胞增殖以及在疾病中作用的研究进展加以综述.
关键词： Fas相关死亡结构域蛋白 细胞凋亡 细胞增殖 -
FADD在人肺腺癌细胞A549诱导T淋巴细胞凋亡中的作用
背景与目的:细胞凋亡是肺癌免疫逃逸的机制之一.Fas相关死亡结构域蛋白(Fas associated death domain protein,FADD)在细胞凋亡过程中起着重要作用.本研究旨在探讨FADD在人肺腺癌细胞A549诱导人T淋巴细胞凋亡过程中的作用.方法:用人肺腺癌细胞株A549细胞诱导人淋巴瘤T细胞株Jurkat细胞凋亡,分别于0、2、4和6 h后用流式细胞术检测Jurkat细胞的凋亡率；RT-PCR及Western blot检测Jurkat细胞中FADD的mRNA及蛋白表达情况.结果:人肺腺癌细胞A549诱导Jurkat细胞凋亡呈时间依赖性,各实验组中Jurkat细胞表达FADD蛋白及mRNA水平较对照组显著升高.结论:肺癌细胞可能通过影响T淋巴细胞FADD表达从而反击机体免疫系统,达到自身免疫逃逸的目的.
关键词： 肺癌 Fas相关死亡结构域蛋白 凋亡 -
参芎注射液对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及Fas死亡结构域蛋白表达的影响
目的:探讨参芎注射液对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)及其mRNA表达的影响.方法:100只SD大鼠随机分为正常组(n=10)、假手术组(n=10)、脑缺血再灌注组(n=40)和参芎注射液组(n40).线栓法制备大脑中动脉闭塞模型,TUNEL法检测神经细胞凋亡,分别应用免疫组织化学染色和逆转录-聚合酶链式反应检测FADD蛋白和mRNA表达.结果:与正常组和假手术组相比,脑缺血再灌注组凋亡神经细胞计数显著增加(P＜0.01),FADD蛋白和mRNA表达均显著增强(P均＜0.01).与脑缺血再灌注组比较,参芎注射液组凋亡神经细胞显著减少(P＜0.05,P＜0.01),FADD蛋白和mRNA表达显著减弱(P＜0.05,P＜0.01).结论:参芎注射液能通过下调FADD表达抑制大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡.
关键词： 参芎注射液 脑缺血 再灌注损伤 凋亡 Fas相关死亡结构域蛋白 -
miR-497对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及机制
目的 探讨微小RNA-497(miR-497)对肝癌细胞增殖能力、凋亡的影响及机制.方法 RT-PCR观察肝癌组织和癌旁组织、肝癌细胞和正常肝细胞miR-497的表达差异;转染肝癌细胞过表达miR-497,MTT法和软琼脂集落形成试验观察miR-497对肝癌细胞增殖能力的影响,肝癌细胞周期和凋亡采用流式细胞仪检测,Western blotting法观察miR-497对肝癌细胞Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)表达的影响.结果 肝癌组织miR-497 表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05);癌细胞miR-497表达水平显著低于肝细胞(P<0.05);miR-497过表达组在96 h和120 h肝癌细胞增殖能力显著低于对照组(P均<0.05);对照组细胞增殖能力显著高于miR-497过表达组(P<0.05);miR-497过表达组早期凋亡细胞数显著高于对照组(P<0.05);对照组FADD相对表达量显著低于miR-497过表达组(P<0.05).结论 miR-497可抑制肝癌细胞的增殖,促进凋亡,其作用可能与miR-497促进FADD表达有关.
关键词： 肝肿瘤 微小RNA-497 细胞增殖 Fas相关死亡结构域蛋白 -
股骨颈骨折后不同时期股骨头内细胞凋亡与Fas相关死亡结构域蛋白的表达
目的:研究股骨颈骨折后的不同时期股骨头软骨细胞、骨细胞凋亡以及Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)的表达.方法:采用光镜观察、免疫组织化学和原位末端标记法对31例新鲜股骨颈骨折(新鲜骨折组)、21例陈旧股骨颈骨折(陈旧骨折组)、28例股骨颈骨折后坏死(坏死组)患者的股骨头骨细胞和软骨细胞进行组织学观察、FADD蛋白及细胞凋亡检测.结果:3组患者的标本均可见不同程度的软骨、骨细胞空陷窝化、FADD的表达及凋亡.其中,坏死组软骨细胞FADD蛋白的表达及细胞凋亡(分别为0.3176±0.0413和22±6)较新鲜骨折组和陈旧骨折组明显增强,差异有统计学意义(P<0.05),陈旧骨折组(分别为0.1338±0.0278和8±2)与新鲜骨折组(分别为0.1046±0.0215和6±2)比较差异无统计学意义.陈旧骨折组骨细胞FADD蛋白的表达及细胞凋亡(分别为0.2515±0.0379和34±7)与新鲜骨折组(分别为0.1923±0.0314和25±5)比较差异无统计学意义,与坏死组(分别为0.4584±0.0756和50±9)相比差异有统计学意义(P<0.05);新鲜骨折组骨细胞FADD蛋白的表达及细胞凋亡较坏死组明显增强,差异有统计学意义(P<0.05).结论:FADD的表达与股骨颈骨折后软骨细胞、骨细胞的凋亡关联密切,对于股骨颈陈旧骨折如能及时正确地进行保头治疗,可以减少股骨头坏死的发生.
关键词： 股骨颈骨折 Fas相关死亡结构域蛋白 细胞凋亡 股骨头坏死 -
非小细胞性肺癌中Fas相关死亡结构域蛋白的表达及意义
目的:探讨Fas相关死亡结构域蛋白(Fas-associated death domain protein,FADD)在非小细胞性肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及意义.方法:免疫组化SP法检测62例NSCLC及13例癌旁正常肺组织FADD蛋白表达,TUNEL法检测NSCLC中癌细胞凋亡.结果:NSCLC中,FADD蛋白阳性表达率为80.6%(50/62),低于正常肺组织(100%,13/13),但两者差异无显著性(χ2=1.73,P＞0.05).癌组织中FADD表达多呈中度或强阳性(36/62),正常肺组织FADD表达多呈弱阳性(11/13),癌组织FADD表达程度高于非癌肺组织(χ2=7.845,P＜0.05).NSCLC中FADD表达与肿瘤的分化程度有关,低分化的肿瘤FADD表达减少(P＜0.05),但与患者性别、年龄、肿瘤分期及是否转移无关(P＞0.05).所有标本均可检测到癌细胞的凋亡,FADD表达水平与癌细胞凋亡程度之间呈显著正相关(rs=0.380,P<0.01).结论:FADD表达异常在NSCLC的发展中可能起着重要作用,FADD表达水平与NSCLC细胞凋亡密切相关.
关键词： 非小细胞性肺癌 脱噬作用 Fas相关死亡结构域蛋白 -
银杏叶提取物对急性肝衰竭大鼠FADD表达的影响
目的 观察银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对硫代乙酰胺(TAA)损伤的大鼠肝脏的作用及对FADD的影响,并探讨其作用机制.方法 实验分5组,GBE低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg连续灌服GBE 30 d,1次/d,正常对照组和模型组分别给与等体积的生理盐水；模型组、GBE低、中、高剂量组第28 d用TAA(300mg/kg)腹腔注射,正常对照组腹腔注射等体积的生理盐水.用试剂盒检测血清中AST、ALT的水平,并分别用RT-PCR和Western blot的方法检测各组肝脏FADD在mRNA和蛋白水平的表达情况.结果 模型组与正常组相比,血清中ALT、AST水平明显升高,肝组织中FADD在mRNA和蛋白水平均上调；而GBE组与模型组相比,血清中ALT、AST水平明显降低,肝组织中FADD在mRNA和蛋白水平均下调.结论 肝衰竭过程中FADD参与肝细胞的凋亡,GBE可通过FADD抑制急性肝衰竭大鼠肝细胞凋亡,从而对肝脏起到保护作用.
关键词： 急性肝衰竭 硫代乙酰胺 银杏叶提取物 Fas相关死亡结构域蛋白 -
五味子乙素对H2O2损伤人肝细胞Fas通路的影响
目的 建立H2O2诱导氧化的L02人肝细胞模型,从细胞凋亡调控因子FAS、具有死亡功能区的Fas相关蛋白(fas associateddeath domain protein,FADD)和Caspase-8的表达变化来研究五味子乙素(Sch B)对L02细胞的可能作用机制.方法 用实时荧光定量PCR法检测FAS、FADD和Caspase-8 mRNA的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,ELISA法检测FAS蛋白含量,Western blotting检测FADD蛋白变化和分光光度法检测Caspase-8活性.结果 在5～15.μmol/L剂量范围内,Sch B可剂量依赖性抑制H2O2引起的FAS、FADD的表达和Caspase-8的活化.结论 Sch B可部分抑制H2O2诱导的L02细胞凋亡,其作用机制可能是通过影响了FAS-FADD- Caspase-8通路.
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大骨节病死亡受体途径调节因子表达的组织学改变
目的 观察大骨节病软骨组织中Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)和细胞FLICE抑制蛋白(c-FLIP)表达的变化,明确其在大骨节病软骨损伤中的作用.方法 将依据大骨节病和骨关节病诊断标准收集的软骨分为大骨节病组(KBD)、骨关节病组(OA)和正常对照组.采用免疫组化染色法检测3组关节软骨的死亡受体调节因子FADD和c-FLIP表达变化,并在显微镜下计数和比较3组关节软骨不同层间阳性表达率的显著性差异.结果 (1)KBD和OA组软骨[分别为(28.68±2.19)％和(35.40±2.34)％]中层FADD表达显著较正常组增高(F=16.245,P=0.000),而在表、深层3组间均无显著差异(P=0.206,P=0.761); (2)FADD在KBD软骨中表达以中层高,为(28.68±5.38)％,其次为深层的(17.94±8.38)％; (3)KBD和OA软骨表层FLIP表达均显著低于正常组(F=5.929,P=0.018),而中层和深层与正常组间均无显著差异.结论 KBD软骨中层FADD显著上调,而软骨表层FLIP表达显著下调,表明死亡受体途径及其调节因子在大骨节病软骨损伤中具有重要作用.
关键词： 大骨节病 死亡受体途径 Fas相关死亡结构域蛋白 FLICE抑制蛋白 免疫组化 -
膀胱尿路上皮癌Fas相关死亡结构域蛋白表达及意义
目的 研究Fas相关死亡结构域 (FADD) 蛋白在膀胱尿路上皮癌(BUC)组织的表达,并探讨其与肿瘤生物学行为之间的关系.方法 采用免疫组化SP法检测68例BUC及13例正常膀胱黏膜组织FADD蛋白表达.原位杂交法检测其中34例BUC组织FADD mRNA 表达水平.结果 正常膀胱黏膜FADD蛋白呈阳性表达.FADD的阳性率在不同组织学分级、不同临床分期的BUC组织中差异均有极显著性(χ2=15.38、11.34,P<0.01);复发组与未复发组FADD的阳性率分别为36.84%和53.33%,差异无显著意义(χ2=1.85,P>0.05).BUC组织中FADD mRNA阳性率为44.12%, FADD蛋白阳性率为47.06%,两者差异无统计学意义(χ2=0.06,P>0.05).结论 FADD表达异常在BUC的发展中可能起着重要作用, FADD阳性表达与BUC病理分级、浸润关系密切,但与BUC复发无关.
关键词： Fas相关死亡结构域蛋白 膀胱肿瘤 免疫组织化学 原位杂交
