首页 > 文献资料
-
五味子乙素通过NOS/NO系统预防BaP所致HTR8-SVneo细胞氧化损伤
目的 研究五味子乙素(Sch B)预防环境污染物苯并(a)芘(BaP)致人绒毛膜滋养层细胞HTR8-SVneo氧化损伤的机制. 方法 以HTR8-SVneo细胞为载体,构建BaP氧化应激模型.实验分为3组,BaP组、Sch B组和空白对照组.MTS法检测细胞存活率,还原酶法检测细胞培养液中一氧化氮(NO)及总一氧化氮合酶(TNOS)含量,用RT-PCR法检测细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA水平. 结果 BaP组细胞存活率(72.2±0.9)％较对照组显著下降(P＜0.05);而0.1、0.5或2 μmol/L Sch B+20 μmol/L BaP各组的细胞存活率分别为(78.2±1.5)％、(86.5±0.6)％、(93.4±1.0)％,显著高于BaP组(P＜0.05).BaP组细胞培养液中NO、TNOS含量、iNOS、eNOS mRNA表达量和eNOS蛋白表达量均显著高于对照组(P＜0.05);而与BaP组相比,Sch B组中NO、TNOS含量,iNOS、eNOS mRNA表达量和eNOS蛋白表达量均随着Sch B剂量的增加逐渐下降(P＜0.05). 结论 Sch B可有效预防BaP所致的HTR8-SVneo细胞氧化损伤,其机制可能与NO)S/NO系统的平衡有关.
关键词： 苯并(a)芘 五味子乙素 人绒毛膜外滋养层细胞 一氧化氮合酶/一氧化氮 -
五味子乙素对两种神经瘤细胞的抑制作用
目的 初步探讨不同浓度的五味子乙素(SchB)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞及C6胶质瘤细胞生长及增殖的影响.方法 体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞及C6胶质瘤细胞,分别以1～ 13 μmol/L SchB作用于SH-SY5Y细胞及C6细胞48 h.倒置显微镜下观察两种肿瘤细胞的形态学及数量变化,四唑盐比色法(MTT法)观察不同浓度的SchB对细胞生长增殖的影响,酶标仪检测各组吸光度.结果 与对照组相比,9～ 13 μmol/L SchB作用48 h均可引起SH-SY5Y细胞生长增殖抑制,1～7 μmol/L SchB对SH-SY5Y细胞没有毒性作用;而5μmol/L SchB即可对C6胶质瘤细胞的生长增殖产生抑制作用.结论 SchB对SH-SY5Y细胞及C6胶质瘤细胞的生长增殖均有明显的抑制作用,且C6胶质瘤细胞对SchB的增殖抑制作用更为敏感.
-
胞浆内的Ca2+浓度变化在五味子乙素诱导HepG2细胞凋亡过程中的作用
目的 探讨五味子乙素在诱导HepG2细胞凋亡过程中Ca2浓度变化的作用和可能机制.方法 体外培养人肝癌HepG2细胞,分为空白对照组、2-APB(2-Aminoethyl diphenylborinate)组、五味子乙素组和联合用药组(五味子乙索与2-APB合加),加药48和72 h后,MTT检测细胞存活率,激光共聚焦显微镜、免疫印迹法检测内质网相关蛋白Grp78、Cleaved caspase-4和CHOP蛋白含量,流式细胞术检测各组细胞的凋亡率.结果 与单加五味子乙素组相比,联合用药组的细胞生存率明显升高(P＜0.05),Ca2浓度、Grp78、Cleaved caspase-4、CHOP蛋白的含量明显降低(P＜0.05).结论 五味子乙素能诱导人肝癌HepG2细胞内质网应激,导致细胞内Ca2浓度显著升高,并进一步诱导细胞凋亡.
-
细胞凋亡抑制剂防护晶状体上皮细胞氧化损伤及信号转导机制
目的:探讨细胞凋亡抑制剂阿魏酸钠(SF)、五味子乙素(Sch B)、菊花(FC)、车前子(SP)对过氧化氢(H2O2)所致氧化损伤的晶状体上皮细胞(LEC)活性以及细胞内钙(Ca2+)、环磷酸腺苷(Camp)、环磷酸鸟苷(Cgmp)的影响,研究四种细胞凋亡抑制剂防治白内障的细胞信号转导机制.方法:将传代培养的牛LEC与H2O2共同孵育复制氧化损伤的模型,同时加入SF和Sch B单体及Fc和SP水提取液孵育后,采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测LEC活性,采用荧光分光光度法检测LEC内钙离子的浓度([Ca2+];)、放射免疫分析法检测LEC内Camp和cGMP含量,并探讨不同浓度和不同孵育时间(12h、24h、36h)的影响.结果:①It:02组LEC活性下降,SF、Sch B、Fc、SP均可明显增强氧化损伤的LEC活性(P<0.01),呈浓度依赖关系和时间依赖关系.②H2O2组LEC的[Ca2+]i升高,SF、Sch B、FC、Sp均可显著降低氧化损伤I.EC的[Ca2+]i(P<0.01),呈时间.效应关系.③H2O2组LEC的eAMP浓度升高、cGMP浓度下降,SF、Sch B、FC、SP均可使氧化损伤的LEC的cAMP水平显著降低(P<0.01)、cGMP水平显著升高(P<0.01),也呈时间.效应关系.结论:四种细胞凋亡抑制剂SF、sch B、FC、SP可明显抑制LEC氧化损伤及凋亡,通过[Ca2+];、Camp、Cgmp信号转导及相互作用调节生物学效应可能是其主要的细胞和分子生物学机制.
-
HPLC同时测定益心舒片中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和丹参酮ⅡA的含量
目的:建立HPLC同时测定益心舒片中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和丹参酮ⅡA的含量.方法:采用Phenomenex Kinetex C18柱,以乙腈-水梯度洗脱,流速1 mL· min-1,柱温30℃,检测波长250 nm.结果:五味子醇甲在21.56～215.6mg·L-1(r=0.999 9),五味子酯甲在6.500～65.00 mg·L -1(r=1),五味子甲素在3.460～34.60 mg·L-1(r=0.999 9),五味子乙素在6.920～69.20 mg·L-1(r=0.999 9),丹参酮ⅡA在2.400～24.00 mg·L-1(r =0.999 9)呈良好的线性关系,平均回收率五味子醇甲为97.92％,RSD 2.34％(n=6)；五味子酯甲为100.28％,RSD 2.57％(n=6)；五味子甲素为98.34％,RSD 2.73％ (n =6)；五昧子乙素为98.06％,RSD 1.61％ (n =6)；丹参酮ⅡA为99.13％,RSD 1.42％ (n =6)；结论:本法简便、灵敏度高、重复性好,可用于益心舒片的质量控制.
-
HPLC同时测定五子衍宗丸中5种活性成分的含量
目的:建立五子衍宗丸中5种成分金丝桃苷、山柰素、五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素的含量测定方法.方法:Angilent Extend C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-甲醇(10∶1)和0.4％磷酸,梯度洗脱柱温30℃,流速1.0 mL· min-,检测波长250 nm(五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素),360 nm(金丝桃苷、山柰素).结果:在该色谱条件下,金丝桃苷、山柰素、五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素分离良好,分别在4.824 ～ 482.4,4.358 ～87.16,1.854 ～ 185.4,5.610 ～112.2,3.850～77.00 ng呈良好的线性关系,加样回收率(n=9)依次为101.2％,98.9％,101.6％,101.3％,97.6％.结论:所建立的方法简便、准确、重复性好,可用于五子衍宗丸的质量控制.
-
高效液相色谱法测定怡神胶囊中五味子乙素的含量
目的:用高效液相色谱法测定怡神胶囊中五味子乙素的含量.方法:色谱柱为Kromasil C18柱:流动相:甲醇-水(75∶25);检测波长:224 nm;流速:1.0 mL·min-1.结果:线性范围为0.168～0.84 μg,r=0.999 6;平均回收率为99.19%,RSD为0.65%.结论:该法简便、灵敏、准确.
-
五味子乙素靶向调节Aβ及下游NF-κB/TNF-α信号通路保护受损神经元的分子机制
目的:基于β-淀粉样蛋白(A β)靶点探讨五味子乙素(Sch B)对受损神经元的保护作用及下游核因子κB(NF-κB)/肿瘤坏死因子(TNF-α)信号通路凋节的分子机制.方法:本研究通过OpenSPR技术检测Sch B在体外对Aβ配体的结合常数、解离常数及解离平衡常数;SDS-PAGE实验检测Sch B对A β寡聚体解聚的影响.在细胞水平检测Sch B对A β损伤SH-SY5Y细胞增殖率的影响,FACS检测受损神经元凋亡情况.蛋白水平通过Westernblot检测线粒体凋亡途径相关蛋白Bcl-XL、Caspase-3的表达情况,并检测阿尔茨海默症病理特征性蛋白Aβ1-42、p-Tau表达及其下游NF-κB/TNF-α信号通路蛋白表达的水平.结果:Sch B能促进A β的解聚,增加Aβ损伤SH-SY5Y细胞的增殖率,抑制受损SH-SY5Y细胞凋亡,增加Bcl-XL的表达和降低Caspase-3的表达,抑制A β142和p-Tau的表达水平,下调NF-κB/TNF-α信号通路的表达水平结论:Sch B能靶向与Aβ配体亲和并有效促进Aβ寡聚体解聚,抑制神经元的凋亡,其机制可能与靶向亲和Aβ配体使其寡聚体解聚并下调神经元Aβ的表达,抑制Tau蛋白高度磷酸化,进而下调NF-κB/TNF-α通路有关.
关键词： 五味子乙素 β-淀粉样蛋白 NF-κB/TNF-α信号通路 凋亡 受损神经元 -
HPLC法测定五味子中五味子乙素的含量
目的采用高效液相色谱法测定五味子中五味子乙素的含量。方法色谱柱：Diamonsil C185μm（4.6×250mm），流动相：甲醇-水（72：28），流速：0.8ml·min-1，柱温：30℃，检测波长：236nm。结果五味子在0.1106～1.106μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9993）；平均加样回收率为99.78%，RSD为0.16%(n=6)。结论该方法简便易行，结果可靠，可有效地控制五味子的质量。
-
枣地安神丸质量标准研究
目的建立枣地安神丸的质量标准。方法采用薄层色谱法对制剂中酸枣仁、制何首乌进行定性鉴别。采用高效液相色谱法对五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素进行含量测定,用Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温40℃,检测波长254 nm。结果酸枣仁、制何首乌薄层色谱斑点清晰,分离效果较好,且阴性无干扰。五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素分别在338～1690 ng(r2＝0.9991)、128～640 ng(r2＝0.9993)、236～1180 ng(r2＝0.9994)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.2%、99.0%、98.9%。结论本方法准确可靠、专属性强、重复性好,可作为枣地安神丸的质量控制标准。
-
HPLC-DAD同时测定黄芪生脉饮中4种成分含量
目的：采用高效液相色谱法建立同时测定黄芪生脉饮中五味子乙素、五味子酯甲、党参炔苷和鲁斯可皂苷元含量的方法。方法色谱柱：Agilent Eclipse C18(4.6 mm×250 mm,5μm)；柱温：30℃；流动相：乙腈-0.1%冰醋酸水溶液,梯度洗脱；流速：1.0 mL/min；检测波长：280 nm。结果五味子乙素、五味子酯甲、党参炔苷和鲁斯可皂苷元的标准曲线线性关系良好,线性范围分别为0.8625～21.5625μg(r2＝0.9991)、0.7375～18.4375μg(r2＝0.9994)、0.0952～2.3800μg(r2＝0.9996)、0.8100～20.2500μg(r2＝0.9990),平均回收率分别为98.06%、99.61%、97.98%、99.30%,RSD分别为1.64%、2.72%、1.45%、1.25%。结论该法准确可靠、快速、专属性强、结果稳定、重复性好。
-
HPLC测定荣心丸中的5种化学成分
该文通过HPLC建立了同时测定荣心丸(五味子、丹参)中五味子醇甲,丹参酮Ⅰ,隐丹参酮、丹参酮ⅡA,五味子乙素5种有效成分的方法.Agilent C18色谱柱,以甲醇-水为流动相,线性梯度洗脱,体积流量1.0mL·min-1;柱温30℃;检测波长240 nm.五味子醇甲,丹参酮Ⅰ,隐丹参酮,丹参酮ⅡA,五味子乙素分别在3.000 ～48.00(r=1.000),3.985 ～63.76(r=0.999 9),6.370 ～101.9(r=1.000),8.690～ 139.0(r =0.999 9),1.700 ～ 27.20 mg·L-(r=0.999 9)呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.44％,100.3％,99.29％,99.07％,98.42％,RSD分别为0.60％,1.1％,0.52％,0.72％,0.97％.实验表明本方法简便、准确、重复性好,可同时测定荣心丸中5种化学成分.
-
五味子乙素对Aβ1-42诱导的阿尔茨海默病细胞DNA甲基化的影响
目的:探讨DNA甲基化在五味子乙素(Schisandrin B,Sch B)抗Aβ1-42所致阿尔茨海默病中的作用及机制.方法:MTT法检测细胞存活率;Real-time PCR检测细胞中DNMT1和DNMT3A的mRNA表达;Western blot检测细胞中DNMT1和DNMT3A的蛋白含量.结果:Sch B对Aβ1-42损伤的SH-SY5Y细胞具有明显改善作用,无论在细胞形态还是活力上均发生显著变化;Real-time PCR及蛋白印迹的结果显示,AD细胞模型组DNMT3A及DNMT1的mRNA和蛋白表达量均明显降低,经Sch B治疗后,各剂量给药组DNMT3A和DNMT1的mRNA和蛋白表达量显著增加.结论:Sch B能够有效抑制Aβ1-42对SH-SY5Y细胞的损伤,且这可能与DNA甲基化有关.
-
复方五味子素B及其成分体外抑制胃癌细胞的增殖
目的:筛选复方五味子素组方佳配比,比较复方五味子素B及其成分对胃癌细胞的增殖抑制作用.方法:采用L4(23)正交设计的方法筛选药物的佳配比.用MTT的方法观察组方及其成分对胃癌细胞的增殖抑制作用.空白对照组加培养液;阴性对照和阳性对照组分别加DMSO和5-氟尿嘧啶(5-FU).结果:高浓度五味子乙素(100 mg/L)、低浓度芦荟大黄素(50 mg/L)、低浓度黄芪多糖(50mg/L)组方为复方五味子素B的药物佳配比.同阴性对照组(0.427±0.018)相比,五味子乙素低浓度(0.296±0.011)和高浓度组(0.260±0.012)、芦荟大黄素低浓度(0.376±0.017)和高浓度组(0.334±0.013),复方五味素B组(0.162±0.007)在波长490 nm处的吸光度A值均显著性降低(P＜0.01);增殖抑制率结果显示,五味子乙素低浓度(26.26%±4.65%)和高浓度组(39.11%±5.13%),芦荟大黄素高浓度组(21.78%±3.67%),复方五味素B组(52.06%±9.87%)抑制率均明显增高.结论:合理的中药有效成分组方可能有效提高单纯中药有效成分的作用,将中药有效成分合理组方可能是开发现代化复方中药的有效方法和途径之一.
-
五味子乙素对急性心肌梗死小鼠心肌结构和心功能的影响
目的 探讨五味子乙素对心肌梗死小鼠心肌结构和心功能的影响及其机制.方法 C57BL/6J雄性小鼠56只,由南京医科大学动物中心提供.采用随机数字表法将小鼠分为3组,即假手术组(n=8)、五味子乙素组(n=24)和心肌梗死组(n=24).采用冠状动脉结扎术建立小鼠心肌梗死模型,假手术组只开胸不结扎.术后五味子乙素组小鼠给予五味子乙素80 mg·kg-1 ·d-1灌胃治疗.术后3周观察各组小鼠存活率,通过二维超声心动图检测各组小鼠心功能指标,处死小鼠计算心脏质量/体重比,通过氯化三苯基四氮唑染剂(TTC)和伊文思蓝染色计算心肌梗死面积,制作心脏病理切片并行HE及Masson染色以观察小鼠心肌炎性浸润、结构及纤维化的情况,通过免疫荧光法检测小鼠缺血心肌组织细胞凋亡情况,通过酶联免疫吸附试验检测转化生长因子-β (TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)蛋白的表达水平,Western blot法检测核因子-κB (NF-κB)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关蛋白X(Bax)、Bcl-2、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、磷酸化eNOS(p-eNOS)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt (p-Akt)蛋白的表达水平.结果 术后3周,假手术组小鼠存活率为100％(8/8),五味子乙素组小鼠存活率为83.33％ (20/24),心肌梗死组小鼠存活率为54.17％(13/24),五味子乙素组小鼠存活率明显高于心肌梗死组(P＜0.05).五味子乙素组小鼠左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD)均明显低于心肌梗死组[分别为(4.13±0.40) mm比(4.44±0.46) mm和(3.07±0.39) mm比(3.46±0.52) mm),P均＜0.05],左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)均明显高于心肌梗死组[(51.77±8.50)％比(40.23±8.30)％和(26.44±5.15)％比(19.53±4.56)％,P均＜0.05],心脏质量/体重比值明显低于心肌梗死组[(0.59±0.06)％比(0.68±0.10)％,P ＜0.05].五味子乙素组小鼠心肌梗死面积为(23.4 ±2.36)％明显小于心肌梗死组的(39.4±2.06)％(P＜0.05).HE染色结果显示心肌梗死组小鼠梗死边缘区域心肌大量炎性浸润,排列结构非常紊乱,而五味子乙素组小鼠心肌病变情况则明显轻于心肌梗死组.Masson染色结果显示,五味子乙素组心肌纤维化范围明显小于心肌梗死组、程度明显轻于心肌梗死组.心肌梗死组小鼠心肌细胞凋亡指数[(45.33±2.02)％]明显高于假手术组[(5.00±1.83)％](P＜0.05),而五味子乙素组小鼠心肌细胞凋亡指数[(26.00±2.73)％]则明显低于心肌梗死组(P＜0.05).五味子乙素组小鼠心肌组织抗凋亡蛋白Bcl-2明显高于心肌梗死组(P＜0.05),凋亡蛋白Bax则明显低于心肌梗死组(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值明显高于心肌梗死组(P＜0.05).心肌梗死组小鼠心肌组织NF-κB、TGF-β、TNF-α和IL-1β的表达水平均明显高于假手术组(P均＜0.05),而五味子乙素组上述炎症因子的表达水平均低于心肌梗死组(P均＜0.05).假手术组、五味子乙素组、心肌梗死组小鼠心肌组织中eNos、Akt的表达差异均无统计学意义(P均＞0.05).而五味子乙素组小鼠心肌组织p-eNOS和p-Akt的表达水平均明显高于心肌梗死组(P均＜0.05).结论 五味子乙素具有改善梗死后心肌重构及心功能的作用,而其机制可能与其抗纤维化、抗炎、抗细胞凋亡和增强修复的作用有关.
-
五味子乙素联合氟尿嘧啶对人胃癌细胞增殖及凋亡的影响
目的:探讨五味子乙素(Sch B)与5-氟尿嘧啶(5-FU)体外协同作用及对人胃癌细胞增殖及凋亡的影响.方法:MTT法检测不同浓度Sch B单用或与5-FU联用对细胞增殖的抑制作用；光学显微镜观察细胞生长状态变化并计数细胞分裂指数；电镜观察药物对细胞超微结构的影响；TUNEL法检测细胞凋亡.结果:Sch B单独应用对细胞增殖的抑制作用弱,与5-FU联用抑制作用显著,呈剂量依赖性；药物处理48 h后,联合用药组细胞分裂指数为(1.1±0.28)％,与Sch B组(13.7±0.43)％、5-FU组(5.1±0.52)％比较显著降低,P＜0.05；电镜下可见细胞皱缩,胞膜界限模糊,核膜消失,核质浓缩及凋亡小体形成,以双药联用为显著.TUNEL法分析示,联合用药组细胞凋亡率为(73.9±5.1)％,与Sch B组(16.4±2.4)％、5-FU组(34.6±3.2)％比较差异有统计学意义,P＜0.05.结论:Sch B与5-FU联合应用能有效抑制胃癌细胞增殖,促进细胞凋亡,二药具有协同增效作用.
-
五味子乙素抑制晶状体氧化损伤的实验研究
目的 探讨五味子乙素对过氧化氢(H2O2)所诱发的晶状体上皮细胞氧化损伤的影响.方法 摘取SD大鼠晶状体后随机分为空白对照组、五味子乙素组(5 mmol/L五味子乙素)、氧化损伤组(1 mmol/L H2O2)、氧化损伤+五味子乙素组(1 mmol/L H2O2+5 mmol/L五味子乙素)离体培养24 h,显微镜下观察晶状体混浊情况,透射电子显微镜观察晶状体上皮细胞超微结构改变,Western-blot法检测晶状体上皮细胞中血红素加氧酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)、核转录因子红系2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf-2)的蛋白表达.结果 晶状体透明度观察结果显示,氧化损伤组晶状体透明度明显下降,而氧化损伤+五味子乙素组晶状体混浊情况明显轻于氧化损伤组;透射电子显微镜结果显示,空白对照组及五味子乙素组晶状体上皮细胞胞膜完整连续,核仁形态规则;氧化损伤组晶状体上皮细胞呈弥漫性改变,胞膜残缺不全,部分核碎裂;氧化损伤+五味子乙素组多数晶状体上皮细胞形态改变轻微,可看到连续的核膜结构.氧化损伤组大鼠晶状体上皮细胞中HO-1及Nrf-2含量明显低于空白对照组及五味子乙素组(P<0.05).氧化损伤+五味子乙素组大鼠晶状体上皮细胞中HO-1及Nrf-2含量高于氧化损伤组(P<0.05).结论 五味子乙素对晶状体上皮细胞氧化损伤具有抑制作用,其作用机制可能与上调HO-1及Nrf-2表达有关.
-
关键词：
-
肝复康丸中五味子甲素和五味子乙素含量测定方法研究
目的:建立肝复康丸中五味子甲素和五味子乙素的含量测定方法.方法:样品用己烷超声提取,提取液过滤,蒸干.残渣用甲醇溶解后,注入高效液相色谱仪分离测定.色谱条件包括:LUNA-C18分析色谱柱,柱温30℃.乙腈-水(68∶32)混合液(含0.2%磷酸,用三乙胺调pH5)作为流动相.检测波长为254nm.结果:肝复康丸中五味子甲素和五味子乙素与其它成份分离良好.五味子甲素峰和五味子乙素峰保留时间分别约为16min和21min.五味子甲素和五味子乙素峰与其相邻峰的分离度大于1.5.以五味子甲素峰计算理论板数是6 070.以五味子乙素峰计算理论板数是7 015.五味子甲素对照品线性浓度范围35.00～140.0μg.ml-1,r=0.999 9,平均回收率为100.5%,RSD为1.5%(n=5).五味子乙素对照品的线性浓度范围25.00～100.0μg.ml-1,r=0.999 9,平均回收率为102.4%,RSD为1.7%(n=5).结论:本法灵敏度高、操作简便、结果准确,可用于肝复康丸中五味子甲素和五味子乙素的含量测定.
-
五味子乙素抑制M146L细胞Aβ42生成的机制研究
目的 研究五味子乙素抑制M146L细胞Aβ42生成的机制.方法 体外培养高效表达Aβ42的M146L细胞株,分别加入不同浓度的五味子乙素(1.67,5.00和15.00 μg·mL-1)、β分泌酶抑制剂(S4562,100.00 μg·mL-1)和γ分泌酶抑制剂(S2188,13.68 μg·mL-1).用CCK-8(cell counting kit-8)比色法检测不同处理对M146L细胞活性的影响;用ELISA法测定M146L细胞所分泌的Aβ42的变化;用Western blotting检测APP的β分泌酶剪切产物C99蛋白的含量变化,结合用β和γ分泌酶活性试剂盒,检测五味子乙素对这两种酶活性的影响.结果 不同处理因素对M146L细胞的存活率均无影响,不具有细胞毒作用.中、高剂量的五味子乙素均不同程度地抑制M146L细胞分泌Aβ42及γ分泌酶的活性,但都不改变M146L细胞C99蛋白的含量及β分泌酶的活性.结论 五味子乙素可抑制γ分泌酶活性,其降低Aβ42生成是通过抑制γ分泌酶的活性来实现的.
