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RASSF1基因转录本A和C的表达与卵巢癌关系的研究
目的探讨RASSF1基因转录本A和C在多个卵巢癌细胞系和卵巢癌组织中所起的作用.方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和激光捕获显微切割技术检测3个卵巢癌细胞系和80例人原发卵巢上皮性恶性肿瘤组织中RASSF1A和RASSF1C mRNA的表达.结果 RASSF1A mRNA在卵巢癌SK-OV3细胞中表达缺失;RASSF1A和RASSF1C在人卵巢癌组织中的表达率分别为40.0%(32/80)和91.3%(73/80).RASSF1A mRNA的表达在浆液性癌、黏液性癌和内膜样癌组织中分别是41.2%(20/48),38.1%(8/21)和36.4%(4/11),P>0.05;临床Ⅰ期和Ⅱ期分别为71.4%和75.0%(10/14,9/12),明显高于临床Ⅲ期和Ⅳ期(26.7%、12/45和14.1%,1/9),P<0.05;高和中分化组分别为58.6%和50.0%(17/29,10/20),明显高于低分化组(16.1%,5/31),P<0.05.结论卵巢癌细胞和人原发卵巢癌组织中存在RASSF1A mRNA表达的缺失,RASSF1A的表达与卵巢癌的临床分期和组织学分级有关,可能作为一种新的抑癌基因在卵巢癌的发生和发展过程中起重要作用,RASSF1A mRNA的缺失提示预后不良.
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胃癌组织RASSF1A甲基化对其mRNA及蛋白表达的影响
目的 研究RASSF1A基因启动子区甲基化对胃癌组织中RASSF1A mRNA及蛋白表达的影响.方法 RT-PCR方法检测54例胃癌及癌旁正常组织RASSF1A mRNA表达,甲基化特异性PCR方法检测RASSF1A启动子区CpG岛甲基化状态;Western blot方法检测20例胃癌及癌旁正常组织中RASSF1A蛋白表达.结果 (1)RASSF1A mRNA和蛋白表达水平在胃癌组织中明显低于癌旁正常组织(A值分别为0.2589±0.2407 比 0.5448±0.2971,P＜0.0001;0.1874±0.0737 比 0.6654±0.2201,P＜0.0001);(2)RASSF1A在胃癌组织和正常组织中的甲基化频率分别为66.7%和14.8%,差异有统计学意义(P＜0.0001);(3)在胃癌组织中,甲基化组RASSF1A mRNA的表达明显低于非甲基化组(0.1384±0.1142 比 0.5018±0.2463,P＜0.0001).结论 胃癌组织RASSF1A mRNA和蛋白表达缺失或低下,与其启动子甲基化程度增高显著相关.
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抑癌基因FASSF1在胃癌组织中表达及其临床意义的研究
目的:探讨Ras相关区域家族1基因(RASSF1)两种不同转录本RASSF1A和RASSF1B在胃癌组织中的表达情况及与临床病理特征的关系.方法:采用RT-PCR方法,检测32例胃癌组织及相应的32例远隔病灶部位胃组织和51例胃良性病变中RASSF1A和RASSF1B mRNA的表达情况,并探讨RASSF1与临床病理因素之间的关系.结果:RASSF1A和RASSF1B在癌旁组织中表达缺失率均为6.25%(2/32),在胃癌组织中的表达缺失率分别为59.3%(19/32)和28.1%(9/32),两者表达RASSF1A的缺失率比较差异有统计学意义,P=0.008;RASSF1B的差异无统计学意义,P=0.078.RASSF1A和RASSF1B在浅表性胃炎组织中表达缺失率分别是10.0%(3/30)和6.7%(2/30);在萎缩性胃炎组织中分别为28.6%(6/21)和14.3%(3/21),两组之间比较差异无统计学意义,P=0.060.RASSF1A和RASSF1B表达与胃癌高、中、低分化程度及肿瘤大小等均无相关性,P均＞0.05.结论:RASSF1A在胃癌组织中的表达缺失更明显.RASSF1A在癌旁正常组织到胃良性病变到胃癌中表达缺失率逐渐增加,表明RASSF1A是一种抑癌基因.检测RASSF1A在胃癌组织中的缺失率对临床判断肿瘤发生发展有指导意义.
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人口腔白斑和口腔鳞癌组织中RASSF1和RASSF2的甲基化分析研究
目的 探讨口腔白斑(OLK)、口腔鳞状细胞癌(OSCC)与正常口腔黏膜组织中抑癌基因RASSF1、RASSF2的甲基化状态变化与病理学及人口学资料的关系.方法 收集就诊于首都医科大学附属北京口腔医院黏膜科OLK 87例,OSCC 39例,30例正常口腔黏膜作为对照,采用内切酶消化法和实时定量PCR的方法对RASSF1和RASSF2甲基化状态进行研究.结果 在正常口腔黏膜中,RASSF1、RASSF2启动子区处于未甲基化状态,口腔白斑中RASSF1甲基化阳性率为44.83％,RASSF2甲基化阳性率为52.87％,与正常对照相比显著增高(P<0.017);口腔鳞癌RASSF1甲基化阳性率为25.64％,RASSF2甲基化阳性率为43.59％,与正常对照相比显著增高(P<0.017).结论 抑癌基因RASSF1、RASSF2启动子甲基化有成为口腔黏膜癌变早期标志物的可能性.
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RASSF1基因研究进展
2000年,Reinhard等在染色体3p21.3区发现了RASSF1基因.随后的研究显示,RASSF1-A、-B、-C三种不同转录剪接本分别参与了细胞凋亡和多种恶性肿瘤发生发展机制.
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5-氮杂胞苷对RASSF1去甲基化与胃癌细胞增殖和凋亡的关系
目的：探讨5-氮杂胞苷对RASSF1基因去甲基化与胃癌细胞增殖和凋亡的关系。方法将SGC7901胃癌细胞分为AZA组（5-氮杂胞苷处理）和CON组（未用5-氮杂胞苷处理），比较两组细胞RASSF1基因启动子甲基化、基因表达、细胞周期和凋亡的差异。结果 CON组SGC7901胃癌细胞RASSF1基因启动子MSP处于甲基化状态，AZA组胃癌细胞未检测到甲基化，AZA组RASSF1基因mRNA和蛋白质表达水平高于CON组细胞。AZA组SGC7901胃癌细胞G0/G1期和凋亡率高于CON组细胞（P<0.05），S期、G2/M期和PI低于CON组细胞（P<0.05）。结论5-氮杂胞苷可逆转胃癌细胞RASSF1基因启动子甲基化状态，使沉默的RASSF1基因重新获得表达而抑制胃癌细胞的增殖并促进其凋亡。
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原发性肝细胞癌RASSF1基因启动子甲基化检测及其临床意义
目的 检测原发性肝细胞癌RASSF1基因启动子甲基化状态并探索其作为新的肿瘤生物标志物在肝细胞癌诊断中的意义.方法 应用MSP和RT-PCR分别检测60例原发性肝细胞癌组织样本和癌旁组织RASSF1基因启动子甲基化状态和mRNA表达.结果 60例PHCC组织样本中有51例存在RASSF1基因启动子甲基化状态(85.0％),均检测不到mRNA表达,癌旁组织甲基化阳性率为5％,mRNA表达正常.RASSF1基因启动子甲基化与肿瘤病理分期和直径大小呈正相关关系,而与患者性别、年龄和血清AFP水平无关.结论 RASSF1基因启动子甲基化在PHCC的发病机制中起到重要作用,可以作为新的肿瘤生物标志物为PHCC诊 断和评估提供重要分子线索.
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RASSF1A在胃癌中的甲基化检测及表达
目的:探讨RASSF1A基因在胃癌及癌前病变组织中的表达及与启动子区甲基化的关系.方法: RT-PCR方法检测40例胃癌、20例中-重度慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生和不典型增生组织及20例癌旁正常组织RASSF1A mRNA表达,甲基化特异性PCR方法检测RASSF1A启动子区CpG岛甲基化状态;Western blot方法检测RASSF1A蛋白表达.结果: RASSF1AmRNA和蛋白表达水平在胃腺癌组织中明显低于中-重度慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生和不典型增生组及癌旁正常组织;RASSF1A在胃癌组织、中-重度慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生和不典型增生组织和正常组织中的甲基化频率分别为80%、25%和5%, 差异有显著性 (P<0.01);在胃癌组织中,RASSF1A mRNA阳性表达组甲基化明显低于表达缺失组.结论: 胃癌组织RASSF1A mRNA和蛋白表达缺失或低下与其启动子甲基化程度增高有关,启动子甲基化参与了胃癌的发生发展.
