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K562细胞经氯化高铁血红素诱导后分化相关基因的筛选
目的研究K562细胞经氯化高铁血红素(Hemin)诱导后在cDNA分子水平上的表达差异. 方法用限制性显示(RD-PCR)方法寻找K562细胞在经Hemin诱导后的c DNA差异表达片段. 结果筛选到差异表达片段4条,并进行了序列测定与同源性分析. 结论 K562细胞分化是多基因参与的结果,这些分化相关基因的共同作用使K562细胞向良性方向分化.
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血红素加氧酶-1对慢性肾功能衰竭大鼠高血压的影响
目的建立大鼠慢性肾功能衰竭高血压模型,研究血红素加氧酶-1(HO-1)对慢性肾功能衰竭大鼠血压的影响,并探讨血红素加氧酶-1在慢性肾衰血压调节中的作用和机制.方法5/6肾切除法建立慢性肾功能衰竭,大鼠随机分成3组:①正常组,②肾衰组,③Hemin组(肾衰+HO-1诱导剂组).检测术后第6、8、10周的血压,第10周血清尿素氮、肌酐、血浆和肾组织丙二醛(MDA),双波长分光光度法测量血浆内源性CO的水平,观察第10周肾脏病理改变,免疫组织化学方法检测肾组织HO-1的表达,应用RT-PCR和Western Blot检测肾组织HO-1 mRNA和蛋白质的表达.结果诱导慢性肾功能衰竭大鼠体内HO-1表达可以:①明显升高血浆内源性CO水平(P＜0.05);②减少血浆和肾组织MDA;③明显降低慢性肾功能衰竭大鼠血压(P＜0.01);④降低血清尿素氮、肌酐(P＜0.01);⑤减轻肾小球系膜增生、间质损害.结论HO-1可以通过释放内源性CO和减少血浆氧化应激水平而降低慢性肾衰大鼠血压,此外它还可能具有降压效应以外的肾脏保护作用.
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HO/CO在甲醛炎性痛大鼠脊髓痛传导及痛觉过敏产生中的作用
目的:探讨血红素氧合酶/一氧化碳(HO/CO)在甲醛诱导的大鼠自发痛和痛觉过敏形成中的作用.方法:采用鞘内注射的方法,在甲醛炎性痛大鼠和正常大鼠分别给予HO抑制剂Znpp和HO激动剂Hemin;采用加权积分法对痛反应进行评分以代表痛反应程度；采用观察热辐射缩足潜伏期和机械刺激缩足反射阈值表示热和机械性痛觉过敏的程度.结果:Znpp各剂量组与单纯甲醛组相比,大鼠痛反应评分明显降低,且Znpp剂量越大,对大鼠痛反应的抑制作用越明显；与单纯甲醛组相比,Znpp各剂量组大鼠注射足热辐射缩足潜伏期和机械刺激缩足反射阈值均无明显变化,而非注射足热辐射缩足潜伏期和机械刺激缩足反射阈值均明显升高,且Znpp的剂量越大,这种改变越明显.正常大鼠鞘内注射HO的激动剂Hemin后,双侧足热辐射缩足潜伏期和机械刺激缩足反射阈值均明显降低.结论:鞘内给予HO抑制剂可明显抑制甲醛诱导的自发痛反应及热和机械性痛觉过敏程度；正常大鼠鞘内给予HO激动剂可诱发热和机械性痛觉过敏的产生,提示HO/CO系统参与脊髓伤害性信息的传导和痛觉过敏的形成过程.
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血红素加氧酶-1的表达对实验性肝硬化内毒素血症大鼠的影响
目的:探讨血红素加氧酶-1(HO-1)的表达对实验性肝硬化内毒素血症大鼠的影响.方法:32只健康雄性wistar大鼠,随机分为4组,正常+脂多糖(LPS)(对照组)、肝硬化+生理盐水对照组(TAA组)、肝硬化+LPS组(TAA+LPS组)、肝硬化+LPS+hemin(氯化高铁血红素)(HM组).用硫代乙酰胺(TAA)诱导肝硬化模型时间共计10周,对照组自由饮清水.于模型造成后,向对照组、TAA+LPS组、HM组大鼠腹腔内注入LPS3 mg/kg;TAA组大鼠腹腔内注入等量的生理盐水;HM组于注射LPS 12 h前,腹腔注射HM(40 mg/kg),并在注入LPS 6 h后,各组动物经腹主动脉穿刺采全血观察血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基酸转移酶(AST)、一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)的表达.留肝组织用免疫组织化学法观察HO-1的表达.结果:对照组、TAA组、TAA+LPS组、HM组血浆中的ALT/AST、MDA、NO依次升高差异有显著性(P＜0.05),对照组、TAA、TAA+LPS、HM组各组大鼠的灰阶值显著依次降低,且有明显差别(P＜0.05).结论:在实验性的肝硬化内毒素中尽管HO-1的表达增加,但它未起到保护作用,它与内毒素对机体的损伤有关.
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氯化高铁血红素对人晚期内皮祖细胞数量和血红素加氧酶-1表达的影响
目的 观察氯化高铁血红素(简称血红素)在体外对人晚期内皮祖细胞(EPCs)数量和血红素加氧酶-1(HO-1)的影响.方法 从健康分娩产妇脐带静脉血中分离提取单个核细胞,体外培养诱导分化为晚期EPCsO在不同体积分数胎牛血清(FBS)条件下用血红素(10μmol/L)干预并设置对照组,干预24 h后,锥虫蓝染色计数,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞毒性,Western印迹法检测HO-1的表达.结果 在低体积分数(0.2%)FBS条件下,与对照组相比,血红素减少了晚期EPCs的数量,但随着FBS体积分数的逐渐提高,血红素对晚期EPCs增殖的抑制能力减弱,促增殖能力逐渐增强(P＜0.05),且诱导HO-1的表达逐渐提高.结论 细胞体外培养中,FBS体积分数在血红素对晚期EPCs数量和活性的作用方面有着重要的影响,且在高体积分数(5%)FBS条件下,血红素促进细胞增殖的效应初步推测是通过诱导HO-1高表达来实现的,但其具体机制和其中涉及的信号转导通路有待进一步探讨.
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血红素加氧酶-1诱导对鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用
目的研究血红素加氧酶-1(heme oxygenase-Ⅰ,HO-1)在鼠肝缺血再灌注损伤肝组织中的表达及其作用.方法建立小鼠部分肝脏热缺血再灌注损伤模型,36只清洁级Balb/C小鼠随机分为3组:假手术组(S组)、缺血/再灌注损伤组(I/R组)、HO-1诱导剂氯化高铁血红素(hemin)预处理组(HM组).免疫组化半定量分析肝组织HO-1蛋白的表达,检测血清AST和ALT,肝组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并观察肝组织的病理变化.结果与S组比较,I/R组HO-1蛋白表达显著增强,hemin预处理后,HO-1蛋白表达较I/R组增高(P＜0.01).I/R组AST,ALT活性和MDA的含量显著高于S组,而HM组均显著低于I/R组(P＜0.01);I/R组SOD活性下降,而HM组显著高于I/R组(P＜0.01).HM组病理损伤程度明显轻于I/R组.结论HO-1在鼠肝缺血再灌注损伤肝组织中表达上调,对肝脏具有保护效应.
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血红素氧化酶-1对肾性高血压的影响及其与血管紧张素Ⅱ的关系
目的:研究诱导血红素氧化酶-1(HO-1)表达对5/6肾切除大鼠血压的影响及与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的关系.方法:大鼠随机分成3组:①假手术组(Sham组),②肾大部分切除组(NX组),③hemin组(NX+氯化高铁血红素组).检测第3、10周的尿蛋白及第10周血压、血清尿素氮、肌酐,观察第10周肾脏病理改变,并用放免法检测血浆和肾组织AngⅡ,免疫组织化学方法检测肾小管HO-1的表达,应用RT-PCR检测肾组织HO-1mRNA的表达.结果:与肾大部分切除组相比,hemin组肾小管HO-1表达明显增加,血浆AngⅡ显著下降(P＜0.05),血压、血清尿素氮、肌酐降低(P＜0.01),尿蛋白排泄量明显减少(P＜0.05),肾小球系膜增生、间质损害减轻.结论:诱导HO-1表达可降低5/6肾切除大鼠血压,并且可能与血浆AngⅡ水平下降有关.
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大鼠5/6肾切除肾脏中血红素氧合酶-1免疫组织化学及病理学研究
目的探讨细胞周期检测点激酶1，2（Chk1，2）在急性白血病中表达的意义。方法 用RT-PCR方法、免疫组织化学方法及共聚焦显微镜检测Chk1和Chk2的mRNA和蛋白在白血病细胞株K562及急性白血病骨髓单个核细胞中的表达。结果 Chk1和Chk2的mRNA水平在急性白血病与增生性贫血之间无显著差异，Chk1和Chk2在K562细胞及白血病骨髓单个核细胞的细胞质和细胞核中均有表达， Chk1蛋白在初治及骨髓幼稚细胞大于30%的复治白血病的骨髓单个核细胞中核表达显著增高，Chk2蛋白在白血病骨髓单个核细胞中核表达与增生性贫血相比无显著差异。结论 Chk1和Chk2的mRNA水平与白血病发生无关，但Chk1蛋白表达水平与白血病发生有一定的相关性，Chk1有作为白血病治疗靶点的可能性，Chk2蛋白表达水平与白血病发生无关.
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Hemin诱导K562细胞红系分化过程中BCR/ABL表达的变化
目的:观察氯化高铁血红素(Hemin)在诱导K562细胞红系分化过程中融合基因BCR/ABL表达的变化.方法:分别应用不同浓度的形态变化,采用CCK8法检测0、10、20、30、40、50μmol/L的Hemin诱导24 h后细胞的增殖活,并通过实时荧光定量PCR及蛋白质印迹分析分别从基因和蛋白水平检测各组BCR/ABL融合基因的表达.结果:经过不同浓度的Hemin诱导24 h后,细胞增殖活降低,BCR/ABL融合基因的表达下调,且随着Hemin浓度的升高融合基因的表达量逐渐减低.结论:Hemin明显抑制BCR/ABL融合基因的表达,作用随着Hemin浓度的加大逐渐增强.
关键词： 氯化高铁血红素 K562细胞 Bcr/abl融合基因
