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体外构建组织工程化小口径血管模型
目的体外构建组织工程化人工血管模型.方法将诱导细胞制成细胞ECMgel悬液培养,镜下观察细胞形态;将诱导的平滑肌细胞和内皮细胞悬液分层种植于支架内表面,以荧光显微镜、扫描电镜和HE染色光镜观察.结果在ECMgel凝胶中细胞生长良好;旋转培养的血管模型,质地均匀,内腔面光滑;HE染色可见血管壁三层结构:内皮细胞层、平滑肌细胞层、PGA+交联胶原层;扫描电镜可见内皮细胞融合成片;荧光显微镜观察可见均匀分布的内皮细胞.结论①ECMgel是携带细胞良好的基质;②旋转培养条件可以促进细胞的贴附和分化;③利用体外诱导的种子细胞分层种植可以构建成与天然血管结构相似的血管模型.
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高压氧微重力培养提高冻存胰岛质量和移植效果的实验研究
目的 探讨胰岛冻存前后经高压氧细胞旋转培养系统(HORCCS)培养后移植入糖尿病大鼠能否提高胰岛移植的效果.方法 将分离纯化的大鼠胰岛分为:A.体外实验组:将各组大鼠胰岛经HORCCS培养或普通培养30 d,检测细胞内DNA和胰岛素含量,胰岛存活率,胰岛素分泌水平.B.胰岛移植实验组:将各组大鼠胰岛经HORCCS培养或普通培养7d,然后移植,观察移植受体血糖和胰岛素水平.电镜观察各胰岛移植实验组中培养7 d时的胰岛的超微结构改变.结果 经高压氧 RCCS培养14 d的胰岛存活率及胰岛素分泌水平高于普通培养组(P<0.05).移植了经HORCCS培养的胰岛后,受体血糖在移植后2周即恢复为正常值,并维持到移植后10周.全部受体维持正常血糖耐受曲线.电镜下可见经HORCCS培养后,冻存复苏胰岛表面形成微小的孔道.结论 胰岛冻存前后经高压氧RCCS培养后可以建立营养输送管道,不但有利于氧和营养物质的运输,更有利于胰岛内细胞的均匀一致的冻存,从而减少冻存对胰岛的损害,提高胰岛的分泌活性和成活率.
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狂犬病毒．CTN-1株在Vero细胞上的适感染量
我们对狂犬病毒CTN-1株在Vero细胞上的适感染量进行了试验[3]，现将结果报道如下。 将已知病毒数量的狂犬病毒CTN-1株与精确计数的Ve-ro细胞充分混匀，放37℃温室吸附0.5h后，用细胞生长液稀至0.01MOI、O.1MOI、1.0MOI、10.0MOI四种病毒感染量。不同感染量的细胞悬液分别放入3立转瓶，置37℃恒温室旋转培养。72h待细胞长成片后浸泡6h洗换，置33℃恒温室继续旋转培养7d、11d、14d连续收2～3次，分别进行毒力滴定。再将不同MOI的收获液分别合并，用30万相对分子质量滤板超滤浓缩30～40倍，加入终浓度为0.025％β丙内酯灭活，经柱层析纯化制得4批疫苗，待检效力。 0.01、O.1、1.0MOI三种感染量的细胞培养瓶细胞生长卅以上都是100％，10.0MOI的细胞培养瓶细胞生长卅以上占50％，后者与前三者比较差异有显著意义
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乳猪肝细胞旋转培养的意义
我们采用普通培养箱对乳猪肝细胞进行旋转培养，旨在探讨保持肝细胞良好功能和体外 大规模培养的简便方法，现将结果报道如下。 一、材料和方法 1.材料：本地杂种小猪4头，雌雄不限，猪龄10～15d，体重2.5～2.9kg。
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旋转恒温箱在快速细菌培养及鉴定中的应用
目的探讨在旋转恒温箱中,用氯化-235三苯基四氮唑(TTC)琥珀酸盐培养瓶进行快速细菌增菌培养,以及孵育快速细菌鉴定生化试验管的实用性.方法比较105份模拟标本和52份临床标本,在旋转恒温箱、BACTEC9120全自动血液培养仪、普通恒温培养箱中,分别进行细菌培养时显示阳性所需要的时间;比较靛基质试验(Ⅰ)、苯丙氨酸脱氨酶试验(PD)、尿素酶试验(U)、硝酸盐试验(NO3)、七叶苷试验(E)在旋转恒温箱和普通培养箱中读取结果所需要时间和符合率.结果旋转恒温箱和BACTEC9120全自动血液培养仪比较,阳性显示时间没有显著性差异(x2=3.17,P＞0.05),和普通恒温培养箱比较,阳性显示时间有显著性差异(x2=24.04,P＜0.005);细菌生化鉴定管在旋转恒温箱和普通培养箱中所读取结果与常规法比较没有显著性差异(x2=0.75,P＞0.05),所需时间有显著性差异.结论在旋转恒温箱中,使用TTC琥珀酸盐培养瓶可以代替BACTEC9120全自动血培养仪进行快速细菌培养;细菌生化鉴定管在旋转恒温箱中培养1～4 h即可获得可靠的鉴定结果.
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冻干水痘减毒活疫苗转瓶生产工艺的建立
应用旋转培养的方法,建立冻干水痘减毒活疫苗的生产工艺.选择长成致密单层的2BS细胞,接种带状疱疹病毒Oka株,待细胞病变达75%以上时,收获病毒液,经超声破碎、离心、澄清,冻干后,按常规检定,疫苗各项检定符合
及<冻干水痘减毒活疫苗制造及检定试行规程>要求.与克氏瓶相比,应用旋转培养,不但提高了疫苗单产,降低了牛血清蛋白残留量,而且疫苗质量也保持稳定.
