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急性坏死性胰腺炎模型大鼠肠血流量及血清磷脂酶A2、白介素-1β的变化
观察了急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis, ANP)时肠组织血流量及炎症介质的变化.实验用96只SD大鼠,随机分成对照组和ANP组,以5%牛磺胆酸钠胰腺被膜下均匀注射复制ANP模型.采用放射生物微球技术在制模后0h、2h和12h分别测定肠组织血流量,同时检测血清磷脂酶A2(PLA2)活性及白细胞介素-1β(IL-1β)水平,并观察肠粘膜病理改变.结果显示,ANP组在制模后2h及12h肠组织血流量(0.80±0.07,0.50±0.06)mL/(min*g)较对照组(1.56±0.18,1.61±0.11)mL/(min*g)明显减少(均P＜0.001),血清PLA2活性(94.29±9.96,103.71±14.40)U/L,IL-1β水平(0.78±0.13,0.83±0.20)μg/L较对照组(65.27±10.52,66.63±9.81)U/L,(0.32±0.06,0.33±0.07)μg/L明显升高(均P＜0.001),肠粘膜损伤程度较对照组明显加重(均P＜0.001).提示ANP早期肠组织血流量减少与炎症介质的升高同时发生,两者均是ANP时肠粘膜损伤的重要因素.
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花生四烯酸的生物活性及其钙信号转导作用
花生四稀酸(arachidonic acid, AA)以酯化形式存在膜磷脂中,细胞兴奋时多种信号转导途径可引起游离AA释放,并迅速代谢为具有生物活性的炎症物质,参与细胞免疫和炎症反应.目前大量研究表明,AA本身还直接参与细胞内生物功能的调节,包括影响酶功能,调控各种离子通道,尤其是直接导致细胞内钙信号转导,成为细胞膜受体兴奋-细胞内生物反应偶联的第二信使.但AA的作用机制及其生理和病理生理意义有待进一步研究.
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肺动脉灌注在体外循环中对磷酯酶A2的影响
目的 观察低温肺保护液肺动脉灌注在体外循环(CPB)心脏直视手术中对血氧合指数、肺静态顺应性及磷酯酶A2(PLA2)的影响,探讨肺动脉灌注对减轻肺损伤的生物学机制.方法 选择30例二尖瓣置换术患者,随机分为对照组和肺保护组,每组15例.肺保护组在体外循环中一次性从肺动脉灌注低温肺保护液,对照组未行肺动脉灌注.分别于麻醉诱导前(T1)、阻断升主动脉30 min(T2)、体外循环结束(T3)、手术结束(T4)和术后6 h(T5)各时间点取桡动脉血标本,动态检测两组患者各时间点的磷脂酶A2;在T1、T3、T4、T5对比观察血氧合指数、肺静态顺应性.结果 两组资料差异无统计学意义.CPB开始后,两组的PLA2进行性增高,手术结束时达到高,后逐渐下降,但仍高于麻醉诱导前,对照组增高更显著[肺保护组T2、T3、T4、T5分别为(68.4±15.2)mg/ml、(86.9±25.6)mg/ml、(132.6±37.2)mg/ml、(96.53±6.1)mg/ml;对照组分别为(88.5±13.3)mg/ml、(107.3±25.6)mg/ml、(157.6±35.7)mg/ml、(113.6±39.5)mg/ml].肺保护组T3、T4、T5氧合指数分别为368±41、338±35、325±65,高于对照组(327±31、309±29、299±63);肺保护组T3、T4、T5肺静态顺应性分别为(28.3±2.9)ml/cm H2O、(25.1±2.8)ml/cm H2O、(22.5±3.8)ml/cm H2O,高于对照组[(25.1±3.2)ml/cm H2O、(21.6±2.4)ml/cm H2O、(19.3±4.2)ml/cm H2O].结论 肺动脉灌注低温肺保护液不仅可以改善氧合,同时抑制磷酯酶A2的释放,减轻肺损伤,改善术后肺功能.
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MODS患儿血清磷酯酶A2的变化及意义
目的:探讨磷酯酶A2(PLA2)在多脏器功能障碍综合征(MODS)患儿中的作用及意义.方法:结合危重病例评分,采用ELISA 法检测26例MODS患儿血清PLA2含量,并与健康体检儿童20例对照.结果:多脏器功能障碍综合征患儿血清PLA2含量明显高于正常对照组,P<0.01,并与危重病例评分成正相关.结论:PLA2参与MODS的病理生理过程,与危重病的病情有关,并可作为早期预警多脏器功能障碍综合征的实验参数.
关键词： 儿 童 多脏器功能障碍综合征 磷酯酶A2 -
静脉内谷氨酰胺支持下调牛磺胆酸钠诱导急性重症胰腺炎猪血浆内毒素水平及磷酸酶A2和弹性蛋白酶活性
目的 观察静脉内滴注谷氨酰胺(glutamine,Gln)对牛磺胆酸钠混合液诱导的急性重症胰腺炎(acute severe pancreatitis,ASP)猪血浆内毒素(1ipopolysaccharide,LPS)及磷酯酶A2(phospholipase A2,PLA2)和弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)活性的影响.方法 选健康长白种猪21头,体重16 kg～22 kg,雌雄不限,按完全随机分组法将动物分为4组:假手术对照组(Sham组,每组5例)、ASP对照组(ASP组,每组5例)、胰腺炎+甘氨酸(Gly)组,即Gln组对照组(Gly组,每组5例)、ASP+Gln组(Gln组,每组6例).在麻醉状态下,进腹向胰总管内注入1 ml/kg 5%牛磺胆酸钠混合液(内含8 000～10 000BAEE单位胰蛋白酶/ml,pH 7.6)诱导ASP.以0.9%NaCl磷酸盐缓冲液取代5%牛磺胆酸钠混合液即为Shan组.分别于ASP诱导前30 min、ASP诱导后6、24、48、72 h采集腔静脉血样本以测定血浆LPS、Gln水平、PLA2、NE.凡涉及LPS采样、保存和测定过程中所有物品都须进行去热原和无菌处理.结果 牛磺胆酸钠诱导ASP猪可引起血浆Gln水平明显下降,而血浆LPS水平及PLA2和NE活性升高,ASP后各时点与ASP前比较差异有统计学意义(P＜0.01).静脉内Gln支持不仅可显著增加血浆Gln浓度,与Sham组和Gly组比较差异有统计学意义(P＜0.01),相反,血浆LPS、PLA2和NE水平明显下降(P＜0.01),但除了SEP诱导后72 h血浆NE接近正常外,其余仍显著高于SEP诱导前水平.结论 结果提示保持高水平血浆Gln可下调ASP后血浆LPS水平及PLA2和NE活性,有利于减轻这些促炎介质促发的瀑布样炎性反应及胰腺外器官功能损害.
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新型膜性肾病标志物PLA2R抗体的双抗原夹心-时间分辨荧光免疫分析
目的 建立M型磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体的时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)法,评估该指标在特发性膜性肾病(IMN)中的检测价值.方法 以PLA2R抗原包板并对其进行Eu3+-链霉亲和素标记,建立PLA2R抗体的双抗原夹心TRFIA法.检测63例IMN患者(男36例、女27例,年龄25～75岁)和90例健康体检者(男30名、女60名,年龄22～ 53岁)血清中的PLA2R抗体含量.采用Kruskal-WallisH检验和Mann-Whitney u检验分析数据.结果 本方法灵敏度5μg/L,线性测量范围0～10 mg/L,有效剂量(ED)20、ED5o和ED8o分别为(0.144±0.012)、(0.707±0.029)和(3.466±0.098) mg/L.批内和批间CV分别为4.7％和5.1％.健康体检者的血清PLA2R抗体水平为0.455(0.320,0.593) mg/L,而IMN患者的血清PLA2R水平为2.690(0.717,7.750) mg/L,较前者升高显著(z=-3.688,P＜0.05);且血清PLA2R抗体水平在不同年龄组及不同病理分期患者间差异有统计学意义(x2值:10.328和9.716,均P＜0.05).由受试者工作特征(ROC)曲线可知,以血清中PLA2R抗体的质量浓度0.80 mg/L为阈值时,PLA2R抗体检测诊断IMN的灵敏度为73.0％(46/63),特异性为95.6％ (86/90).结论 成功建立双抗原夹心测定人血清PLA2R抗体的TRFIA法,该法快速、简便,有助于提高对IMN患者的诊断准确性.
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急性坏死性胰腺炎时胃粘膜缺血与炎症介质相关性的实验研究
目的探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)时胃粘膜缺血与炎症介质过度释放度的关系.方法 SD大鼠64只,随机分成对照组和ANP组.5%牛磺胆酸钠胰腺被膜下均匀注射制成ANP模型.采用放射生物微球技术在制模后2小时及12小时分别测定胃粘膜血流(GMBF),同时检测血清磷脂酶A2(PLA2)、白细胞介素-1β(1L-1β)水平及胃粘膜病理变化.结果 ANP组大鼠在制模后2小时及12小时血清PLA2活性(94.29±9.96,103.71±14.40)U/L、IL-1β水平(0.78±0.13,0.83±0.20)ng/ml均较对照组(65.27±10.52,66.63±9.81)U/L、(0.32±0.06,0.33±0.07)ng/ml明显升高(P值均＜0.001).ANP组GMBF在制模后2小时与12小时均较对照组明显减少,GMBF与血清PLA2、IL-1β水平之间呈密切负相关(P＜0.05).结论 ANP早期GMBF的减少与炎症介质的增高同时发生,两者均是ANP胃粘膜损伤的重要因素.
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两种剂量辛伐他汀对急性冠脉综合征患者介入术后炎性因子水平的影响
目的 研究炎性因子在急性冠脉综合征(ACS)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后水平的变化及早期应用不同剂量辛伐他汀对ACS患者稳定斑块、减少炎症反应的作用.方法 将57例ACS行PCI患者随机分为治疗Ⅰ组(n=29)和治疗Ⅱ组(n=28).治疗Ⅰ组予以常规治疗加辛伐他汀20 mg·d-1,每晚1次口服;治疗Ⅱ组予以常规治疗加辛伐他汀40 mg·d-1.另设健康对照组(n=30)与之对照.在PCI术前,PCI术后即刻及PCI术后2周抽血检测磷脂酶A2(sPLA2)、抗原4JD配体(CD40L)、高敏C反应蛋白(hscRP)水平.结果 ①治疗组CD40L、sPLA2、hsCRP水平较正常对照组明显升高(P＜0.01).②治疗组PCI术后即刻CD40L、sPLA2、hsCRP水平均升高,但只有sPLA2差异有极显著性(P＜0.05).③治疗Ⅰ组治疗后CD40L、sPLA2和hsCRP水平分别降低29%,30%,27%,治疗前后比较差异有显著性(P＜0.05).治疗Ⅱ组治疗后cD40L、sPLA2和hsCRP水平分别降低50%,55%,65%,治疗前后比较差异有显著性(P＜0.01).④治疗Ⅰ组和治疗Ⅱ组治疗前CD40L、sPLA2和hsCRP水平相似,差异无显著性(P＞0.05),治疗后治疗Ⅱ组cD40L、sPA2和hsCRP水平明显低于治疗Ⅰ组水平(p＜0.01),血脂各组分大致相近.差异无显著性.结论 ACS患者PCI术后存在着动脉粥样硬化斑块不稳定及炎症加速的过程.早期应用大剂量他汀药物,可明显降低血清炎症因子水平,减少患者冠状动脉粥样斑炎症反应,具有稳定斑块作用.
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谷氨酰胺对ASP猪血浆内毒素和炎性介质的影响
目的 观察静脉滴注谷氨酰胺(Gln)对牛磺胆酸钠混合液诱导的急性重症胰腺炎(ASP)猪血浆细胞因子和炎性介质的影响.方法 选健康长白种猪21头,体重16～22kg,雌雄不限,随机分4组.假手术对照组(Sham组,n=5)、ASP对照组(ASP组,n=5)、ASP+甘氨酸组即Gln对照组(Gly组,n=5)、ASP+Gln(Gln组,n=6).在麻醉状态下,进腹向胰总管内注入1 ml/kg 5%牛磺胆酸钠混合液诱导ASP.以0.9%NaCl磷酸盐缓冲液取代5%牛磺胆酸钠混合液即为Sham组.分别于ASP诱导前30 min、ASP诱导后6,24,48,72 h采集腔静脉血样本以测定血浆内毒素、Gln水平、磷酯酶A2(PLA2)、弹性蛋白酶.凡涉及内毒素采样、保存和测定过程中所有物品都须进行去热原处理.结果 静脉内Gln支持不仅可显著增加血浆Gln浓度,接近正常水平,与Sham组和Gly组比较有显著性(均P＜0.01),还可明显降低血浆内毒素、PLA2和弹性蛋白酶水平.结论 静脉内Gln支持可显著地升高血浆Gln水平,同时可显著地ASP后降低血浆内毒素水平及PLA2和弹性蛋白酶活性.血浆Gln可能是ASP后重要生命器官功能损害和炎性介质紊乱的病理生理机制之一.
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粉防己碱治疗重症胰腺炎的实验研究
[目的]探讨粉防己碱治疗重症胰腺炎的作用机制.[方法]采用随机对照观察法.健康Wistar大鼠42只,随机分成正常组6只,胰腺炎对照组18只,治疗组18只.对照组和治疗组大鼠造模全部处理为重症胰腺炎模型.治疗组18只,以粉防己碱片剂灌胃,每次0.4mg,每天3次.各组分别于给药后12h、24h、48h处死6只,进行有关指标观察.[结果]治疗组各时相血清及胰腺组织磷酯A2活性均比对照组显著降低(P＜0.05);治疗组各时相胰腺病变比对照组改善显著(P＜0.05).[结论]粉防己碱能显著降低模型动物的血清和胰腺组织磷酯酶A2活性;同时,能显著改善模型动物的胰腺病变.
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急性冠脉综合征血浆脂蛋白相关磷脂酶A2表达变化的临床意义
目的 探讨急性冠脉综合征(ACS)患者体内血浆脂蛋白相关磷酯酶A2(Lp-PLA2)变化情况及其与疾病严重程度、进展和预后的关系,为急性冠脉综合征诊治提供临床依据.方法 随机收集2013年3月～2015年3月我院收治的50例急性冠脉综合征患者作为观察组研究对象,根据临床分型分为心肌梗死(MI)组27例和不稳定型心绞痛(UA)组23例;另随机选取同期20例行冠状动脉造影术未见冠状动脉狭窄的患者作为对照组.对观察组与对照组患者血浆脂蛋白相关磷酯酶A2含量、Gensini积分、随访3个月的不良心血管事件发生情况等进行对比分析.结果 观察组与对照组经过Lp-PLA2的含量测定,ACS患者两亚型中血浆Lp-PLA2均高于对照组,且3者间差异均有统计学意义(F=293.6,均P＜0.05),ACS患者中AMI亚型与UA患者之Gensini积分均高于对照组,且3者间差异亦有统计学意义(F=537.2,均P＜0.05).对Lp-PLA2水平与Gensini积分相关性分析显示,其中中危组、高危组与Lp-PLA2水平呈高度正相关(r=0.61、0.77),且差异均有统计学意义(均P＜0.05).随访3个月时,心血管事件在高水平组的发生率(69.6％)明显高于低水平组(25.9％),差异有统计学意义(x2=4.15,P＜0.05).结论 Lp-PLA2与Gensini积分存在高度正相关,同时Lp-PLA2较高危患者的不良心血管事件发生率高,证实Lp-PLA2能间接反映粥样斑块的稳定性,且为急性冠脉综合征诊治和严重性的预判提供支持.
