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乳腺癌中RIN1的表达及临床意义
目的 研究RIN1在乳腺癌中的表达,分析它与乳腺癌预后的关系.方法 用免疫组化SP法检测85例乳腺癌和20例乳腺良性病变组织中RIN1的表达,并对85例乳腺癌病例进行随访；用real-time PCR和Western blot 法检测RIN1在20例乳腺癌和癌旁组织中的表达.Kaplan-Meier分析生存结果.结果 85例乳腺癌标本中RIN1有不同程度表达,其中44例高表达,乳腺癌中RIN1的表达明显高于非癌组织(P＜0.05)；RIN1高表达与肿瘤大直径、组织学分级、肿瘤家族史成正相关(P＜0.05)；RIN1高表达患者的平均生存时间低于RIN1低表达患者(P＜0.05)；RIN1高表达影响肿瘤无病生存率(P＜0.05).20例标本中RIN1的mRNA及蛋白在乳腺癌的表达明显高于癌旁组织(P＜0.05).结论 RIN1影响乳腺癌的发生发展,其高表达RIN1可能成为判断乳腺癌预后的一个标志物.
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RIN1在肝癌组织中的表达及对预后和肿瘤侵袭能力的影响
目的 探讨RIN1在肝癌中的表达及临床意义.方法 应用real-time PCR检测36例配对新鲜肝癌及癌旁组织中RIN1基因mRNA表达水平,再用免疫组化方法检测1 10例肝癌组织石蜡标本RIN1蛋白表达水平,观察RIN1表达与肝癌患者预后的关系.质粒转染HepG2细胞系,细胞侵袭试验观察RIN1对细胞侵袭能力的影响.结果 RIN1在肝癌组织中表达明显低于配对的癌旁组织(x2=7.430,P=0.026).免疫组化结果显示RIN1蛋白在76例(69.1％)肝癌组织中呈低表达或不表达.生存曲线分析显示RIN1低表达患者术后5年生存率(6.46％)明显低于RIN1高表达患者(12.96％)(x2=13.808,P ＜0.05).细胞侵袭试验表明RIN1过表达能够抑制HepG2细胞侵袭能力(t=8.975、9.522,P＜0.05).RIN1表达与ABL2和E钙蛋白呈正相关(r=0.898、0.912,P＜0.05),与基质金属蛋白酶9呈负相关(r=-0.933,P=0.002).结论 RIN1在肝癌组织中呈低表达,与HCC患者预后明显相关,过表达RIN1能够抑制肝癌细胞侵袭能力.
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非小细胞肺癌组织Rin1表达与临床病理因素相关性分析
目的:探讨Rin1在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与肿瘤细胞增殖和迁徙的相关性.方法:选取90例手术切除的NSCLC标本,采用免疫组织化学(SP三步法)检测Rin1在NSCLC中的表达分布水平,并与相应的癌旁组织进行对比分析.采用Ki 67标记指数评估肿瘤细胞的增殖率.结果:90例NSCLC组织中,48(48/90,53.3％)例Rin1表达上调.Rin1的表达与TNM分期和淋巴转移有关,Rin在Ⅲ～Ⅳ期患者中的表达明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者(65.1％vs42.6％),P=0.032;有淋巴结转移的患者明显高于无淋巴结转移的患者(65.9％ vs 41.3％),P=0.019.Rin1阳性表达患者生存时间较短,Rin1阳性表达患者生存时间明显低于Rin1阴性表达患者[(31.15±21.69) vs (48.31±29.31)个月],P＜0.05.结论:Rin1在NSCLC组织中的表达明显高于相应正常的肺组织,Rin1的高表达在肿瘤细胞增殖和迁徙中扮演了重要角色,与NSCLC患者生存率下降有关.
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RIN1在人膀胱尿路上皮癌中的表达
目的 研究RIN1在人膀胱尿路上皮癌中的表达.方法 分别应用免疫蛋白印迹技术和实时定量PCR技术检测RIN1蛋白和RIN1 mRNA在人膀胱尿路上皮癌及癌旁组织中的表达.结果 Real-time PCR结果发现,在15对新鲜的膀胱尿路上皮癌及癌旁组织中,有12对的癌组织中RIN1表达高于癌旁组织.在膀胱尿路上皮癌组织中,RIN1的mRNA表达平均倍数为10.61±5.42,癌旁组织中,RIN1的mRNA平均倍数为4.31±1.77,P＜ 0.05.Western blot法结果认证了RIN1在膀胱尿路上皮癌组织中的表达是升高的.结论 RIN1在膀胱尿路上皮癌组织中的mRNA和蛋白的表达水平高于癌旁组织.
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RIN1基因在PTSD大鼠的表达变化
目的 观察RIN1基因(Ras interaction/interference1,RIN1)在创伤后应激障碍(PTSD)大鼠的表达变化,探讨RIN1基因参与调节创伤后应激障碍大鼠恐惧记忆异常的机制.方法 采用国际认定的单一连续(SPS)刺激建立PTSD大鼠模型,应用条件恐惧实验检测大鼠恐惧记忆,采用免疫荧光共标和Western blot检测SPS大鼠海马和杏仁核中RIN1表达变化.结果 条件性恐惧实验结果显示,在恐惧记忆形成阶段,SPS组大鼠与正常组大鼠相比Freezing时间明显增加.免疫荧光共标染色和Western blot检测显示,SPS组大鼠海马和杏仁核RIN1表达水平均增加.结论 海马及杏仁核RIN1可能参与SPS大鼠恐惧记忆异常的调节.
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RIN1过表达对人胃腺癌MKN28细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响
[目的]研究RIN1过表达对人胃腺癌MKN28细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响.[方法]①采用Western blot法和免疫荧光法检测RIN1在MKN28细胞中表达;②采用Burd-U标记检测MKN28细胞高表达RIN1后细胞增殖能力变化;③采用Transwell法、细胞划痕法检测MKN28细胞高表达RIN1后细胞侵袭和迁移能力变化;④采用AV/PI染色法、Hoechst染色法检测MKN28细胞高表达RIN1后细胞凋亡情况.[结果]①RIN1在MKN28细胞中呈高表达,表达量是空载对照组的3.22倍,且主要分布在细胞质中;②Burd-U染色结果显示,RIN1高表达MKN28细胞的阳性率显著性升高,与空载对照组相比为75.6％±5.4％ vs 25.6％±1.1％(P＜0.01);③RIN1高表达MKN28细胞的侵袭和迁移能力明显增强,与空载对照组相比分别为122.0±7.0 vs 65.00±2.52(P＜0.01)和54.22％±3.45％ys 38.6％±2.45％(P＜0.01);④RIN1高表达MKN28细胞株细胞凋亡数显著性减少,与空载对照组相比为21.63％±2.60％vs 8.07％±1.60％(P＜0.01).[结论]RIN1过表达促进MKN28细胞增殖、侵袭和迁移,抑制MKN28细胞凋亡;RIN1可能是介导胃癌发生的癌基因之一.
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RIN1过表达对人胃癌细胞MKN28增殖的影响研究
[目的]研究RIN1过表达对人胃癌细胞MKN28增殖和细胞周期的影响.[方法]采用PCR法扩增人RIN1基因,并构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-RIN1.采用脂质体转染法将pcDNA3.1(+)-RIN1及空载体pcDNA3.1(+)转染至人胃癌MKN28细胞,G418法筛选阳性克隆;Western blot法和免疫荧光法鉴定RIN1的高表达.CCK-8法和平板克隆实验检测RIN1高表达对MKN28细胞增殖的影响.流式细胞术检测RIN1高表达对MKN28细胞周期的影响.[结果]成功构建RIN1真核表达载体,RIN1基因全长为2 353bp.G418法筛选获得高表达RIN1的MKN28克隆细胞株MKN28/RIN1-1和MKN28/RIN1-2,Western blot结果显示这两株细胞分别为MKN28/3.1的3.21倍和3.17倍.过表达RIN1基因后,MKN28细胞增殖显著性加快,克隆数显著性增加;细胞周期改变,G0/G1期细胞减少而S期和G2/M期细胞增加.[结论]RIM基因过表达加速MKN28细胞从G1期向S期的转化促进细胞增殖;RIN1可能成为胃癌治疗的一个潜在靶点.
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过氧化物酶增殖激活受体配体罗格列酮通过诱导Rin1表达上调预防胃癌发生
[目的]我们前期研究发现过氧化物酶增殖激活受体(PPARγ)配体罗格列酮(RSG)具有明显预防化学致癌剂N-甲基-N'-硝基-亚硝基胍(MNNG)诱导大鼠腺胃癌发生的作用,然机制不甚明确,本研究拟探讨RSG防治实验性胃癌的可能机制.[方法]采用微阵列技术比较RSG处理组和对照组大鼠腺胃癌组织基因表达谱的差异,筛选出PPARγ配体抗肿瘤的可能靶基因,并对该靶基因的作用进行验证.[结果]采用微阵列技术在大鼠腺胃癌组织中筛选出79个上调的差异表达基因,其中RsG处理组大鼠腺胃癌组织中Rin1(Ras interference 1,Rin1)基因表达显著高于对照组;检测人胃癌组织发现Rin1基因表达明显低于正常胃粘膜组织(P<0.05).体外实验结果显示RSG可诱导人胃癌细胞株AGS细胞的PPARγ及Rin1的表达,并呈剂量依赖,PPARγ拮抗剂(GW9662)能阻断RSG诱导Rin1的表达.[结论]PPARγ配体罗格列酮可能通过PPAEγ依赖途径上调Rin1基因的表达而预防大鼠实验性腺胃癌的发生.
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癌症相关基因与精神疾病的关联
Stathmin,RIN1和DRD2基因被发现是癌症相关基因,这些基因在乳腺癌,宫颈癌,肝癌等癌细胞中高表达.研究发现Stathmin在情感相关脑区海马及杏仁核高度表达,是参与恐惧记忆调节的基因;RIN1高表达于端脑抑制恐惧记忆的获得;DRD2基因调控多巴胺D2受体表达,该基因失调会导致多巴胺功能紊乱,引起酒精依赖.从而证明这些基因与创伤后应激反应(post traumatic stress disorder,PTSD),精神分裂,抑郁症等精神疾病存在着紧密联系.本文从Stathmin,RIN1,DRD2基因入手,重点阐述这些癌症相关基因在精神疾病中的表现,从基因角度为寻求癌症与精神性疾病之间的关联提供证据.
